mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达

目的: 构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法: 分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果： 通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。 结论： 成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。     

LncRNA44372在卵巢癌中的差异表达及生物信息学分析

目的:探讨lncRNA44372在卵巢癌中的表达及其在卵巢癌发生发展过程中的作用机制.方法:从NCBI GEO数据库中下载卵巢癌样本及其对照样本的基因芯片数据GSE119054,选用在线工具CRN分析在卵巢癌中差异表达的lncRNA;利用在线工具Annolnc筛选与lncRNA44372有关的共表达基因,然后使用Dav...     

七氟烷对衰老模型大鼠认知功能的影响及机制初探

目的:探讨七氟烷(Sev)对衰老模型大鼠认知能力及大脑前额叶皮质炎症因子表达的影响.方法:48只4月龄雄性SD大鼠,于大鼠头颈部皮下注射D-半乳糖(125 mg·kg-1·d-1)持续42 d建立衰老大鼠模型,按随机数字表法分为4组:空白对照(Con)组、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂M...     

三级淋巴结构：肿瘤免疫治疗的预后因素与新兴靶点

三级淋巴结构（TLS）是指非生理条件下由于长期发生炎症而形成的异位淋巴组织,是架构在成纤维细胞网络上的淋巴细胞聚集体,包含两个重要的结构区域——T细胞区和滤泡B细胞区。TLS在肿瘤中以不同的成熟状态存在,最终形成生发中心,其内含有T滤泡辅助细胞和滤泡树突状细胞,并且与B细胞紧密联系。近年研究明确了新生的TLS的关键特征、相关的生物标志物及检测手段,进一步阐述了TLS通过刺激相关的肿瘤抗原调控淋巴细胞的浸润,以增强抗肿瘤免疫效应的作用机制。对TLS与肿瘤患者临床获益之间的相关性研究结果表明,TLS可作为包括免疫治疗在内的生物治疗的良好预后和预测因素。目前,研究者正在开发诱导TLS形成的技术,包括使用趋化因子、细胞因子、抗体、抗原提呈细胞或合成支架等。在“冷肿瘤”和“热肿瘤”中诱导TLS新生联合抑制炎性环境的治疗剂或免疫检查点抑制剂的方案,代表了肿瘤治疗的新希望。     

病理学专业硕士学位研究生与规范化培训衔接的研究

由于病理学专业硕士学位研究生的培养方式仍处于摸索阶段,没有规范性的制度与措施,导致病理学专业硕士学位研究生与住院医师规范化培训的衔接呈现出许多问题。本研究以作者所处单位病理科专业学位硕士研究生出现的问题为基础,结合国内病理科相关现状,思考并研究了相应的问题与解决措施,旨在解决临床病理专业学位研究生培养与住院医师规范化培训衔接的相关问题,为今后制度及规范的确立提供思路。     

连续性肾脏替代疗法患者感染的预防性护理分析

目的探讨预防连续性肾脏替代疗法(CRRT)患者感染的护理方法并分析效果。方法选取CRRT治疗的患者45例为观察组,采用预防性护理预防感染,选取同期收治的40例CRRT患者作为对照组,给予常规护理。比较2组的临床相关指标及APACHEⅡ评分的变化以及感染率、病死率、住院时间。结果观察组治疗后的血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、C反应蛋白(CRP)均低于对照组(P0.05);观察组治疗后的APACHEⅡ评分低于对照组,感染率低于对照组,住院时间短于对照组(P0.05)。结论预防性护理能够预防CRRT患者感染的发生,促进临床指标的改善,缩短患者的住院时间。     

基于扎根理论的老年人健康养老需求调查研究

目的 调查中国四川省老年人健康养老需求,为养老政策制定提供参考依据。方法 于2022年7—8月在四川省选取42名老年人进行半结构化访谈,基于质性研究中的扎根理论,运用NVivo 12软件对访谈材料进行编码分析。结果 参与调查老年人共42名,对访谈资料进行分析和编码,最终得出68个初始概念、26个范畴,10个主范畴和4个核心范畴,据此建立了老年人健康养老需求模型。老年人健康养老需求模型包括生存型需求、享乐型需求、发展型需求和经济支持4个维度。结论 四川省老年人健康养老需求更加多样,主要包括生存型需求、享乐型需求、发展型需求和经济支持。在需求变化的过程中,社会的应对策略也应做出及时的调整和布局,充分保障此类需求的有效供给,最大限度满足老年人的实际需求。     

上皮卵巢癌细胞系LncRNAs、mRNAs表达谱基因芯片分析

目的通过基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系中差异表达的Lnc RNAs、m RNAs表达谱,为研究上皮卵巢癌相关Lnc RNAs的功能提供实验依据。方法采用基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系A2780、HO8910、SKOV3与卵巢上皮细胞系HOSEpi C中Lnc RNAs和m RNAs的表达差异;对差异表达的m RNAs进行KEGG通路富集分析;用q RT-PCR在上皮卵巢癌细胞系及卵巢上皮细胞系中验证差异明显的6条Lnc RNAs的表达水平。结果基因芯片结果发现在3个肿瘤细胞系中上调的Lnc RNAs有227条,下调的有483条;3个上皮卵巢癌细胞系中差异表达的m RNAs主要富集在PI3K-AKT、m TOR及TNF-α等肿瘤相关通路中(P0.05);PTPRG-AS1、CCNT2-AS1、XLOC_009869、LINC01138在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、和OVCR3中表达上调(P0.05);RP11-252P19.2、RP11-744I24.2在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、HO8910、OVCR3和3AO中表达下调(P0.05)。结论基因芯片筛选出在上皮卵巢癌细胞系中差异表达的Lnc RNAs和m RNAs,差异表达m RNAs与PI3K-AKT、m TOR及TNF-α等肿瘤通路有关,有望为卵巢癌的诊断及治疗提供新的靶点。     

IgA肾病与微生物免疫的研究进展

IgA肾病(IgAN)是最常见的慢性肾小球肾炎之一,但明确的病因和发病机制仍不清楚.该疾病与多种潜在机制有关,其中黏膜免疫反应是重要的致病因素之一.而微生物产生的IgA蛋白酶和细胞因子都会在免疫作用中引起相应的组织学改变.目前,微生物的多样性分析与IgAN患者的临床疗效和预后有紧密的联系.随着致病机制相关研究的开展,许...     

术中输血的非心脏手术患者术后初始血红蛋白值与预后的相关性研究

目的 分析术中输血的非心脏手术患者其术后初始（术后24 h）血红蛋白（hemoglobin, Hb）值与预后之间的关系,为手术合理用血提供参考。方法 回顾性分析四川大学华西医院2012–2018年所有非心脏手术、术中输血且年龄≥18岁的患者。以术后初始Hb分组,共划分为6组：Hb<75 g/L,75 g/L≤Hb<85 g/L,85 g/L≤Hb<95 g/L,95 g/L≤Hb<105 g/L,105 g/L≤Hb<115 g/L和Hb≥115 g/L。采用多元线性回归分析比较各组患者住院时间的差异,二元logistic回归分析比较其住院死亡率、自动出院率、急性缺血性损伤（包括急性肾损伤、心肌梗死和脑梗死）发生率、住院时间>28 d患者比例的差异,同时分析术后初始Hb与手术类型、术中红细胞输注量（输注量<8 U vs.输注量≥8 U）和术前是否贫血（术前Hb<100 g/L vs.术前Hb≥100 g/L）的多重交互作用对术后住院时间的影响。结果 本研究共纳入7 528例患者,以95 g/L≤Hb<105 g/L组患者为参照组,H...