miR-132调节非小细胞肺癌hedgehog信号通路受体基因PTCH1及细胞增殖、迁移和侵袭

 目的  研究miR-132在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系H1299中的作用及相应的靶基因。方法  real-time PCR检测7种细胞系中miR-132的表达量。用CCK-8检测稳定株细胞H1299-pEGP-miR-132与H1299-pEGP-miR-null 的生长速率的变化。使用稳定株细胞H1299检测miR 132对于细胞克隆形成、细胞迁移和细胞侵袭的影响。用Transwell结合matrigel的方法检测H1299-pEGP-miR-132细胞与H1299-pEGP-miR-null细胞在72 h时细胞迁移和侵袭的变化,同时在H1299-pEGP-miR-132细胞中使用anti-miR-132进行了相关的实验验证。运用生物信息学方法预测miR-132的靶基因,并运用双荧光实验、real-time PCR和Western blot验证。在H1299-pEGP-miR-132细胞中共同转染anti-miR-132和PTCH1 siRNA检测其对细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。结果   miR-132在肺癌细胞系中呈现高表达,在NSCLC细胞H1299中miR-132通过靶向调节PTCH1基因的表达发挥作用。H1299-pEGP-miR-132细胞的增殖(P<0.01)、迁移(P<0.05)、侵袭(P<0.05)能力明显高于对照组。在H1299-pEGP-miR-132细胞中转入PTCH1 siRNA后细胞增殖能力升高(P<0.05),迁移和侵袭能力降低(P<0.001)。H1299-pEGP-miR-132细胞15天形成的克隆数目是对照组细胞的1.41倍(P<0.05)。Western blot法检测显示miR-132使H1299中PTCH1蛋白表达量显著降低(0.68倍),anti-miR-132使PTCH1表达量显著升高(1.97倍)。结论  miR-132可能参与NSCLC的细胞增殖、迁移和侵袭。它的致癌性部分归因于对Hh信号通路关键的负调控蛋白PTCH1的调节。     

基因芯片的Meta分析和组织芯片分析表明AXL在肺腺癌(LAD)癌旁组织中的表达高于肺腺癌组织

 目的  研究比较AXL在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LAD)和正常及癌旁组织中的表达。方法  通过文献检索和数据库查询,得到了21套人LAD组织基因芯片表达谱,其中18组数据来源于NCBI的GEO数据库。共包含1 060例LAD组织及正常组织(或癌旁组织),对这些数据进行了AXL基因表达的Meta分析。进一步用包含48例LAD及每例相对应的癌旁组织的人LAD组织芯片进行了AXL蛋白的检测。结果  Meta分析数据表明,在LAD癌旁组织中,AXL的表达量显著高于LAD组织(Z=-7.21,P<0.0001);而在正常组织中,AXL的表达量与LAD中相比差异无统计学意义(Z=-1.62,P=0.106)。LAD组织芯片水平的研究表明,与癌旁组织相比,LAD组织中AXL蛋白量显著降低(P=0.005)。结论  AXL在癌旁组织中的表达高于LAD组织,其意义有待进一步研究。