蛋白酶激活受体在人单核细胞上的表达

目的蛋白酶激活受体（protease activated receptors,PARs）表达于几乎所有的造血细胞上,PARs在单核细胞上的表达结果不一致,我们用高纯化的人外周血单核细胞研究PARs在单核细胞的表达。方法采用密度梯度离心法和磁激活细胞分选法分离人外周血单核细胞,采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）、流式细胞仪分析单核细胞PARs的表达情况。结果人外周血单核细胞表达PAR-1、PAR-3和PAR-4但不表达PAR-2蛋白质,单核细胞表达PAR-1和PAR-3,但是不表达PAR-2和PAR-4 mRNA。结论单核细胞表达PARs,这为进一步研究PARs在单核细胞的功能奠定了基础。     

凝血酶诱导人单核细胞分泌白细胞介素-6的分析

目的凝血酶通过蛋白酶激活受体（PARs）调节细胞的功能而在炎症和免疫反应中起重要作用，对于其诱导单核细胞产生细胞因子的报道则结果不-致。方法用凝血酶及PARs的激动肽分别激发高度纯化后的单核细胞16h后，用ELISA检测单核细胞培养上清液中的1L-6。结果凝血酶呈浓度依赖性地诱导单核细胞产生IL-6，当凝血酶酶活性被抑制后，诱导单核细胞产生IL-6的能力被抑制。PAR-1激动肽SFLI。R—NH2和PAR-4激动肽GYPGQV—NH2呈浓度依赖性地诱导单核细胞产生IL-6，PAR-1、PAR-4不能诱导单细胞产生IL-6，而PAR-3激动肽TFRGAP—NH2和反激动肽PAGRFr—NH2对于单核细胞产生IL-6无明显作用。结论凝血酶可以诱导高度纯化的成人外周血单核细胞产生IL-6，它们的作用依赖于酶的活性，说明它可能是通过PARs激活单核细胞。     

凝血酶诱导人单核细胞分泌白细胞介素-6的分析

目的 凝血酶通过蛋白酶激活受体(PARs)调节细胞的功能而在炎症和免疫反应中起重要作用,对于其诱导单核细胞产生细胞因子的报道则结果不一致.方法 用凝血酶及PARs的激动肽分别激发高度纯化后的单核细胞16 h后,用ELISA检测单核细胞培养上清液中的IL-6.结果 凝血酶呈浓度依赖性地诱导单核细胞产生IL-6,当凝血酶酶活性被抑制后,诱导单核细胞产生IL-6的能力被抑制.PAR-1 激动肽SFLLR-NH2和PAR-4 激动肽GYPGQV-NH2呈浓度依赖性地诱导单核细胞产生IL-6,PAR-1、PAR-4不能诱导单细胞产生IL-6,而PAR-3激动肽TFRGAP-NH2和反激动肽PAGRFT-NH2对于单核细胞产生IL-6无明显作用.结论 凝血酶可以诱导高度纯化的成人外周血单核细胞产生IL-6,它们的作用依赖于酶的活性,说明它可能是通过PARs激活单核细胞.     

冰冻机采血小板复融后的质量研究

目的：通过对复融后的冰冻机采血小板的质量研究，为临床正确保存和使用冰冻机采血小板提供依据。方法：冰冻血小板制剂自超低温冰箱取出后，立即浸泡在42℃恒温水浴箱中，轻柔的不断的摇动直至完全融解；融解后的血小板制剂于百级净化台用一次性无菌空袋留样3份，其中一份保存于22℃，一份保存于4℃4小时后取出置于室温，另一份保存于4℃24小时后取出置于室温，分别检测血小板计数、血块收缩试验（血浆法）。结果：冰冻机采血小板复融后置于22℃，保存48小时内血小板计数无显著性差异（t〈0．01，P〉0．05），其血块收缩试验保存2小时内为80％以上，保存4小时后呈明显下滑。冰冻机采血小板复融后置于4℃保存4小时和24小时后取出置于室温，其血小板汁数在刚取出时无明显变化，其后血小板数量呈明显减少，取出4小时后血小板数量几乎全部受破坏，血块收缩试验在刚取出时为70％左右，很快呈现明显下滑。结论：冰冻机采血小板复融后最好置于22℃保存，越快输注效果越好，尽量缩短运输和保存时间，尽量在复融后2小时内输注完毕，避免低温保存和体外放置时间过长，防止血小板输注无效。     

采集后6小时与72小时制备的冰冻单采血小板质量研究

目的通过比较采集后6h和72h制备的冰冻单采血小板制品的多项质量参数,为冰冻单采血小板的制备标准提供依据。方法以美国产Trima血细胞分离机配套全密闭7d保存袋采集的单采血小板,分别于采集后6h和72h制备为冰冻血小板制品,1周后复苏留样,分别检测血小板计数（PLT,MPV,PCT,PDW）、血小板粘附性、血小板P选择蛋白、PF3A、PF4、pH值、血块收缩试验（血浆法）。结果采集后6h和72h制备的冰冻单采血小板,两者相比差异无统计学意义（t〈0．01,P〉0．05）。单采血小板在不同保存条件下,PF3A均保持了良好的PF3活性,单采血小板在常规或冰冻保存条件下,PF4及P选择蛋白的表达均明显增加,采集后6h和72h制备的冰冻单采血小板相比,差异无统计学意义（t〈0．01,P〉0．05）;单采血小板在常规保存3d内,粘附功能和血块收缩试验没有明显变化,而冰冻保存的单采血小板这两项指标呈明显减退现象,血小板的活力下降明显。结论以美国产Trima血细胞分离机配套全密闭7d保存袋采集的单采血小板,分别于采集后6h和72h制备的冰冻血小板制品,两者的体外指标分析结果相比差异无显著性,且都能有效的改善和控制急性大出血患者的出血倾向,用于抢救急性大出血患者疗效是可靠的。     

凝血酶和PARs激动肽诱导单核细胞分泌IL-6作用的研究

目的 白细胞介素(interleukin,IL)-6通过凝血酶及蛋白酶激活受体(proteinase activated receptor,PARs)的激动肽分别激发高度纯化后的单核细胞,分析人单核细胞分泌IL-6的诱发因素,为IL-6的临床试验提供参考.方法用凝血酶及PARs的激动肽分别激发高度纯化后的单核细胞16...     

人单核细胞表达蛋白酶激活受体

目的：使用高纯化的人外周血单核细胞研究蛋白酶激活受体（protease activated receptors,PARs）在单核细胞上的表达。方法：采用密度梯度离心法和磁激活细胞分选法分离人外周血单核细胞,采用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析单核细胞PARs表达情况。结果：流式细胞分析示人外周血单核细胞表达PAR-1、PAR-3、PAR-4蛋白质,但不表达PAR-2蛋白质;RT-PCR示单核细胞表达PAR-1和PAR-3,但不表达PAR-2和PAR-4 mRNA。结论：单核细胞表达PARs,为进一步研究PARs在单核细胞上的功能提供依据。