转基因成分定量分析技术的研究进展

农业转基因生物是指利用基因工程技术改变基因组构成,用于农业生产或者农产品加工的动植物、微生物及其产品[1].自转基因生物面世以来,其食用安全性-直是人们关注的焦点,各相关国际组织和国家对转基因生物食用安全性认识方面存在着较大的分歧,而转基因生物本身也存在着各种潜在的风险,如潜在的毒性、致敏性、抗营养因子及非期望效应等.     

深圳市300例MSM人群HIV/梅毒感染状况及行为学特征

目的了解深圳市部分男男同性性行为人群（MSM）艾滋病病毒（HIV）、梅毒感染状况,以及艾滋病相关危险行为,为预防控制性病、艾滋病传播提供依据。方法采用同伴推动抽样（RDS）法,收集2010年1月至2010年4月深圳市男男同性恋人群样本300例,并对该样本人群进行问卷调查,同时对该样本进行HIV和梅毒的实验室检测。结果300例研究对象中,HIV感染率为7.0%,梅毒感染率为12.0%,HIV梅毒合并感染率为2.9%;最近一次与男性发生性行为时安全套的使用率为65.3%,与女性发生性行为时安全套的使用率为48.9%。结论深圳市MSM人群HIV、梅毒感染率较高,危险性行为普遍存在,安全套使用率低,应加强对该人群艾滋病性病相关的宣传教育及干预工作,控制HIV的传播。     

基于电子鼻的添加香精类掺假植物油的检测研究

目的尝试通过电子鼻来鉴别添加香精类掺假植物油。方法以添加香精的掺假植物油与正常市售植物油为样品,进行电子鼻检测,并对所获得数据进行主成分分析（PCA）和线性判别分析（LDA）。结果线性判别分析（LDA）对添加各种香精的掺假植物油与正常油之间都有较好的区分效果,并优于PCA方法。结论电子鼻技术可以作为鉴别添加香精类掺假植物油的一种有效手段。     

卫生应急知识技能竞赛的组织实施和方法探析

目的以深圳市疾控系统卫生应急基本知识、基本技能和基本操作(简称"三基")竞赛为例,探讨疾控系统卫生应急"三基"知识技能竞赛的组织和实施方法。方法通过竞赛的组织和实施,从竞赛成绩分布、试卷质量、成绩与专业的相关性、三次考试成绩的变化等方面分析竞赛的成效和存在的问题。结果 360人参加备赛复习,其中160人参赛,占52.6%;形成一套包含3 894道题目的复习题库;理论考试试题及整卷区分度>0.4,整卷的难度系数在0.55～0.67之间,题型难易搭配合理,难度适中,但实操考试有待优化;预防医学专业的成绩较其他专业显著占优;竞赛理论考试成绩较两次模拟考试成绩明显提高,体现出竞赛的成效。结论竞赛的组织实施达到了整体提高工作人员"三基"水平的预期目的,为疾控系统组织和实施类似的培训和竞赛提供了一套可借鉴的模式。     

地沟油拉曼光谱特征形态

目的 寻找鉴别地沟油与食用植物油的拉曼光谱特征谱带.方法 比较和分析地沟油与食用植物油拉曼光谱的形态及差异.结果 在532 nm光源普通及扩展光谱中,精炼地沟油呈现平滑包状拉曼谱带,各种类型及来源不同的地沟油普遍具有与之形态相似的拉曼谱带,而各种食用植物油无一具有这一形态的拉曼谱带.通过导数扩展光谱可以有效分离精炼地沟油与食用植物油之间原本严重重叠的谱峰,而通过导数普通光谱可以测量和描述掺杂植物油中地沟油的掺入量.结论 平滑包状拉曼谱带是普遍见于地沟油的指纹图谱.该指纹图谱可为鉴别地沟油与植物油,以及检测油脂样品中地沟油的掺入量提供丰富的信息及适用的标志.     

地沟油标准物质候选物研制

目的 为制备“地沟油”标准物质候选物探讨和选择适当原料、工艺路线和质控指标。方法 选择“地沟油”目前最常用和最易得的原料、最有可能采用的精炼工艺路线,以外观、气滋味、色泽、水分及挥发物、酸价为质控指标,制备“地沟油”标准物质候选物。结果 选择餐厨废弃油脂为原料,通过蒸馏脱臭-碱炼脱酸-吸附脱色制备“地沟油”标准物质候选物,各批次候选物的色泽（1”,R）在4.0~5.1,水分及挥发物在0.02%~0.05%,酸价在5.60 ~6.30 mg/g。结论 利用该候选物可制备“地沟油”特定内源性成分和外源性成分标准物质或测试参比样品,可全面寻找其中特定的内源性和外源性标志物,验证选定标志物的特异性、灵敏度和检出限。     

孕哺期补硒对仔鼠大脑海马突触形成的影响

目的研究孕哺期补硒对子代小鼠大脑海马发育的影响。方法从母鼠受孕第1天起通过在饮水中补充亚硒酸钠(低、高剂量组分别为400、1 600μg/L),同时设立对照组。至仔鼠出生21 d后,取仔鼠大脑海马,运用高尔基染色观察仔鼠海马树突棘密度的变化,采用RT-PCR检测突触可塑性相关基因PSD95、Drebrin和SYN的mRNA的表达,Western-blot检测Drebrin蛋白的表达。结果对照组、补硒组母鼠及仔鼠饮食正常,毛发发育正常、有光泽,精神状态良好,对声、光等一般刺激反应灵敏,各组间未表现出明显差异;各组均未发生流产、死胎、死产以及仔鼠夭折等现象。各组间仔鼠数和仔鼠体重均无统计学差异(均P0.05)。对照组、补硒组仔鼠海马区树突棘形态规则,排列整齐且密集。孕哺期补硒后,低硒组和高硒组DG区和CA1区高尔基染色树突棘计数、Drebrin基因mRNA表达均高于对照组(均P0.05),低硒组和高硒组间差异均无统计学意义(均P0.05)。3组间Drebrin蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。结论孕哺期母鼠补硒能够促进仔鼠海马突触的形成,具体机制有待进一步研究。     

抗环斑病毒转基因番木瓜55-1的PCR检测

目的建立对抗环斑病毒转基因番木瓜55-1进行品系鉴定的检测方法。方法采用改良十六烷基-三甲基-溴化铵(CTAB)法及试剂盒方法进行番木瓜基因组DNA提取,根据番木瓜管家Papain基因和抗环斑病毒转基因番木瓜55-1品系的外源结构基因(35S-GUS)和调控基因(NOS-35S)序列设计合成特异性检测引物,采用PCR技术对抗环斑病毒转基因番木瓜55-1进行品系鉴定。结果内源Papain基因PCR扩增结果表明,改良CTAB法及试剂盒方法都可用于番木瓜种籽及果肉的DNA提取。实验中合成的引物及建立的PCR反应体系、反应参数能特异性地扩增转基因番木瓜55-1的外源基因35S-GUS序列和NOS-35S序列。该方法的绝对检测低限为8.15×10^-2ng,相对检测低限为0.14%。结论本检测方法有较高的稳定性,能有效地对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定,该方法的检测灵敏度可完全满足转基因食品标识管理定性检测的需要。     

植物原油与地沟油拉曼光谱谱图的分析研究

目的建立一种简便、快速、准确的鉴别植物原油与地沟油的检测方法。方法以10个品种(大豆、葵花籽、玉米、茶籽、花生、菜籽、橄榄等原油以及初榨棕榈油、初榨棕仁油、初榨芝麻油)的106份正常植物原油和11批次的精炼地沟油为样品,通过扫描样品的拉曼光谱,比对谱图的形态特征,谱图一阶导数处理和数据分析等,确立结果判定的方法和程序。并通过对234份勾兑样品的检测,初步评估新建方法的准确性。结果精炼地沟油和正常植物原油相比,其拉曼光谱呈现出拉曼强度高(达到105数量级)、平滑包状的特点,而后者除玉米原油和初榨芝麻油外,拉曼强度较低(仅在104数量级),均无平滑包状的特点,且油脂固有成分对应的各种谱带清晰可见。精炼地沟油的一阶导数图谱中2 839 cm-1的峰高值均为负值,正常植物原油均为正值。确定的植物原油一阶导数图谱中2 944和2 839 cm-12峰强度比值的下限值最高为-0.851,最低为-3.015。运用新建方法对勾兑样品(5%、10%、20%地沟油勾兑植物原油)进行判定,10%勾兑样品的正确检出率达到了80%以上;20%勾兑浓度的地沟油勾兑样品检测的准确率达到了100%。结论地沟油拉曼光谱图与植物原油拉曼光谱图有显著不同,可作为鉴别地沟油的参考依据。     

转基因成分实时荧光PCR定量分析数学方程的理论研究

目的：根据TaqMan荧光探针实时荧光PCR的技术原理，建立实时荧光PCR循环次数与荧光强度问的动力学方程、样品中转基因成分含量与Xo及Cr的定量关系和定量分析数学方程。方法：采用数学推导和理论测算的方法，研究数学方程中各参数的意义、影响因素、变化特点和规律。结果：转基因成分含量的定义、定量分析模式、样品DNA提取效率、PCR扩增效率、反应管中初始模板数、荧光分子形成效率、荧光测量阈值、PCR测量的系统和偶然误差，是导致定量关系发生偏离及测定灵敏度发生变化的重要原因。结论：数学方程中各项参数可用于评估定量关系的偏离程度及变化趋势，还可作为选择、优化定量分析条件和校正、降低定量方法系统误差的技术指标。