雪灵芝水提取物对人胃腺癌MGC-803细胞Bcl-2，Bax基因表达的影响

目的研究雪灵芝水提取物对人胃腺癌MGC-803细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法不同浓度的雪灵芝水提取物处理体外培养的MGC-803细胞,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MYr）法检测细胞存活水平;应用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡水平;采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白印迹法（Western Blot）测定人胃腺癌MGC-803细胞的Bcl-2和Bax基因表达情况。结果雪灵芝水提取物作用于人胃腺癌MGC～803细胞后,0．1～0．8mg／mL浓度组细胞存活水平随药物浓度的增大而减小（P〈0．05）;0．8mg／mL浓度组MGC-803细胞G．期比例为（61．23±6．45）％、S期细胞比例为（26．86±3．38）％、细胞凋亡率为（0．07±0,01）％,与对照组相比,P〈0．05;与对照组相比,0．8mg／mL浓度组Bcl-2 mRNA表达降低、Bax mRNA表达增加（P〈0．05）;0．2～0．8mg／mL浓度组Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达增加。结论雪灵芝水提取物在一定浓度范围内可降低MGC-803细胞的存活水平,使细胞发生凋亡,其机制可能为通过下调Bcl-2基因、上调Bax基因表达,促进细胞凋亡发生。     

雪灵芝提取物对H22肝癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探讨雪灵芝水提物（arenaria kansuensis aqueous extract, AKAE）对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法 建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,将小鼠随机分为5组：对照组、环磷酰胺组、AKAE高、中、低剂量组,各组连续给药10 d。断头处死小鼠,称重胸腺和脾脏并计算胸腺、脾脏指数;MTT法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性及CTL细胞杀伤活性;采用双抗体夹心ELISA法检测H22荷瘤小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平。结果 AKAE处理各组小鼠后,AKAE高、中、低剂量组胸腺指数分别为（21.39±14.3）mg/g、（17.52±7.7）mg/g、（30.57±10.2）mg/g;脾脏指数分别为（38.34±12.7）mg/g、（50.38±29.2）mg/g、（61.63±35.2）mg/g,各剂量组与环磷酰胺组比较具有显著差异,AKAE低剂量组与对照组比较差异具有统计学意义（P＝0.013）;AKAE高剂量组脾淋巴细胞增殖刺激指数（SI）与AKAE低剂量组比较差异具有统计学意义（P＝0.019）,而各组CTL杀伤活性无明显差异;AKAE高剂量组IL-2水平较对照组有所升高,而AKAE低剂量组IFN-γ水平明显升高（P＝0.015）。结论 AKAE可以促进H22荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖及Th1型细胞因子的表达。     

粪菌移植与5-氨基水杨酸在小鼠实验性结肠炎中的疗效观察

目的观察粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)与5-氨基水杨酸(5-aminosalicylic acid,5-ASA)在小鼠实验性结肠炎模型中的疗效.方法将40只6周龄左右的♂C57BL/6小鼠,随机分为2组,正常组(8只)和模型组(32只),适应性喂养2 wk后,模型组连续自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)5 d,建立实验性结肠炎模型,于第6天更换为纯净水,A组自由饮用纯净水,适应性喂养3 d后,将模型组随机分为4组,每组8只,分别为:模型对照组、FMT组、5-ASA组、联合组(FMT+5-ASA),FMT组、5-ASA组及联合组于第9、11、13天粪便给予粪菌滤液、5-ASA灌肠液及粪菌滤液与5-ASA的混合液灌肠,其余两组给予生理盐水灌肠.每日进行小鼠的疾病活动指数评分(disease active index,DAI),于第14天处死小鼠,采集血液标本行IL-10检测,测量结肠长度,留取结肠组织行HE染色,并评估组织损伤指数(histological index,HI).结果与模型组相比,5-ASA组与联合组均取得较好的疗效,DAI评分、HI评分较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P0.05),但仍高于空白对照组(P0.05),F M T组的D A I评分、HI评分较前有治疗前有所缓解,但其与模型对照组差异无统计学意义(P0.05);5-ASA组与联合组的I L-10水平高于模型对照组(P0.05),而FMT组的IL-10水平较模型对照组增加,但差异无统计学意义(P0.05).结论 FMT在小鼠结肠炎模型中确实有一定疗效,但仍不如氨基水杨酸制剂,其与氨基水杨酸制剂的联合使用也并没有取得更好的效果,可能与治疗方式、治疗周期等因素有关.     

雪灵芝水提物对人胃癌MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨雪灵芝水溶性提取物(arenaria kansuensis aqueous extract,AKAE)对人胃癌细胞株MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养的MGC-803细胞经不同浓度AKAE处理,采用MTT法检测受试细胞增殖水平;应用流式细胞术检测AKAE处理12 h后各组细胞的细胞周期;Western blot检测不同浓度、不同时间AKAE处理组MGC-803细胞中cyclin D1蛋白表达水平;实时定量 PCR检测各组MGC-803细胞中cyclin D1、p16和p21基因的mRNA相对表达量。结果AKAE对体外培养的MGC-803细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用（P<0.05）,IC₅₀为(0.134±0.005)mg/ml;经AKAE处理12 h,0.8 mg/ml组MGC-803细胞的 G₁期细胞比例高于对照组、S期细胞比例低于对照组（P<0.05）;(0.2～0.8) mg/ml浓度的AKAE处理,对MGC-803细胞中cyclin D1的蛋白及mRNA表达具有明显抑制作用（P<0.05）;AKAE促进MGC-803细胞中p16、p21基因mRNA 表达,0.2 mg/ml处理组p16、p21 mRNA相对表达量分别为对照组的3.3倍和18.5倍。结论雪灵芝水提物(AKAE)对MGC-803细胞增殖具有抑制作用,其机制与G₁期阻滞和对G₁期相关因子表达的影响有关。