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1.
目的:研究食管鳞状细胞癌(Esophageal Squamous Cell Cancer,ESCC)中CDH1(cadherin 1)基因的甲基化状态,探讨其与Wnt中心因子β-catenin表达及与食管鳞癌发生的关系.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)及RT-PCR的方法检测91例食管鳞癌中CDH1基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学的方法检测β-catenin蛋白的表达情况,并分析与临床病理参数间的关系.结果:在91例食管鳞癌中,有72例CDH1基因发生了甲基化,甲基化率为79.1%,明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01);癌组织中CDH1基因的高甲基化与肿瘤患者的临床分期相关,与病理分级无关;癌组织中该基因mRNA的阳性表达率42.9%,明显低于癌旁非肿瘤组织(97.8%,P<0.01);癌及癌旁组织中β-catenin蛋白的异质表达率分别为89.0%和24.2%,差异均有统计学意义(P<0.01):癌组织中CDH1基因mRNA表达及β-catenin蛋白的异质表达均与该基因的甲基化状态明显相关(P<0.05).结论:CDH1基因启动子区甲基化在食管鳞癌中频繁发生,该基因的高甲基化状态可能是引起食管鳞癌发生的分子机制之一,并有可能通过Wnt/β-catenin信号传导通路发挥作用.  相似文献   
2.
目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中Smad基因家族不同成员的表达水平及其相关性,并探讨其临床意义。方法:收集河北医科大学第四医院2004至2009年间病理确证的贲门腺癌患者110例,RT-PCR检测贲门腺癌和癌旁组织中Smad2、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA的表达,免疫组织化学方法检测贲门腺癌组织和癌旁组织中p-Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表达并分析其相关性,分析p-Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白表达与贲门腺癌临床病理特征的关系。结果:贲门腺癌组织中Smad2、Smad3和Smad4 mRNA表达水平均显著低于相应癌旁组织[(0.4956±0.1862)vs(0.8611±0.2914),P<0.01;(0.4713±0.1712)vs(0.8314±0.2811),P<0.01;(0.5145±0.1987)vs(0.8954±0.2856),P<0.01],而Smad7 mRNA表达水平显著高于癌旁组织[(0.5114±0.1962)vs(0.2012±0.1006),P<0.01]。贲门腺癌组织p-Smad2/3、Smad4蛋白表达的阳性率显著低于癌旁组织(42.7%vs 93.6%,P<0.01;45.5%vs 95.5%,P<0.01),且与肿瘤TNM分期和组织分化程度密切相关(P<0.05)。贲门腺癌组织Smad7蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(48.2%vs 3.6%,P<0.01),且与肿瘤组织分化程度密切相关(P<0.05)。贲门腺癌中p-Smad2/3与Smad4蛋白的表达呈正相关,但它们均与Smad7蛋白表达无明显的相关性。结论:贲门腺癌组织低表达Smad2、Smad3和Smad4,高表达Smad7,Smad基因的异常表达可能参与贲门腺癌的发生、发展。  相似文献   
3.
目的:检测食管鳞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled related protein 4, SFRP4)的基因甲基化状态,探讨其与食管鳞癌和贲门腺癌发生的关系.方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)及RT-PCR的方法检测49例食管鳞癌及58例贲门腺癌中SFRP4基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学法检测Wnt通路中心因子β-catenin蛋白的表达情况,并分析其与临床病理参数间的关系.结果: 在食管鳞癌及贲门腺癌中,SFRP4基因的甲基化率分别为42.6%(21/49)和72.4%(42/58),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01).在贲门腺癌中SFRP4基因的高甲基化与肿瘤患者的临床分期相关,与病理分级无关;而在食管鳞癌中,该基因的甲基化与各临床病理指标均无关(P>0.05).SFRP4基因在食管鳞癌及贲门腺癌中mRNA阳性表达率分别为69.3%(34/49)和44.8%(26/58),均明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.05),且肿瘤组织中mRNA表达与该基因的甲基化状态明显相关(P<0.01).通路中心因子β-catenin蛋白在食管鳞癌及贲门腺癌中的异质表达率分别为65.3%(32/49)和86.2%(50/58),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01),且其异质表达与SFRP4基因的甲基化状态相关(P<0.05).结论:SFRP4基因的高甲基化状态可能是引起贲门癌及食管癌发生的共同分子机制之一,并有可能通过Wnt/β-catenin信号转导通路发挥作用. 检测SFRP4基因甲基化状态对于贲门腺癌的预后评估有一定参考价值.  相似文献   
4.
目的:检测食管鳞癌 (esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)中Ras相关区域家族7(Ras-association domain family 7,RASSF7)的mRNA、蛋白表达情况及甲基化状态,探究RASSF7基因在ESCC发生发展中的作用。方法:分别应用RT - PCR 及甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction ,MSP)的方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine, 5-aza-dC)处理前后的4株食管癌细胞系(TE13、T.Tn、YES-2、Ec109)和69例ESCC组织及其癌旁组织中RASSF7 mRNA表达水平及甲基化状态,应用免疫组织化学方法检测69例ESCC组织及相应癌旁组织中RASSF7的蛋白表达。结果:RASSF7基因在TE13、T.Tn、YES-2细胞系中表达阳性,在Ec109食管癌细胞系中表达缺失,经5-aza-dC处理后,RASSF7在TE13、T.Tn、YES-2中表达下调,在Ec109中表达阳性。5-aza-dC处理前后4株食管癌细胞系中均未检测到RASSF7的甲基化。ESCC组织中RASSF7的mRNA相对表达量(0.63?0.08 vs 0.42?0.20,P<0.01)与蛋白表达阳性率[56(81.2%) vs 37(53.6%),P<0.01]均显著高于相应癌旁组织,且均与患者的淋巴结转移情况及分化程度有关(P<0.05或P<0.01),与TNM分期、年龄和性别无关(均P>0.05)。ESCC组织和相应癌旁组织中均未检测到RASSF7的甲基化。结论:4株食管癌细胞系、肿瘤组织和癌旁组织中RASSF7基因的表达差异与RASSF7本身甲基化状态无关,ESCC组织中RASSF7的高表达可能参与了ESCC的发生及转移。  相似文献   
5.
胃癌中Wnt信号通路的激活及E-cadherin/catenins的异常表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨胃癌中Wnt信号通路与E-cadherin/catenins复合体的关联性及其与胃癌浸润转移的关系,为指导临床治疗与判断预后提供有价值的分子指标。方法应用免疫组织化学SP法检测Wnt2、β-catenin、α-catenin、E-cadherin在胃癌中的表达及流式细胞术测定β-catenin在胃不同组织中的总含量。结果胃癌中β-catenin出现膜表达缺失,浆表达增强,总表达量下降;Wnt2呈强表达,而α-catenin、E-cadherin出现膜表达缺失。β-catenin的异位表达与淋巴结转移及肿瘤浸润深度有关,Wnt2的表达仅与肿瘤的浸润深度有关,α-catenin的异常表达仅与病理分级有关,E-cadherin的异常表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、病理分级、临床分期有关。结论胃癌中Wnt信号通路处于激活状态,E-cadherin/catenins复合体表达也明显异常,并通过影响β-catenin的细胞内分布,与Wnt传导通路产生交互协同作用,共同影响胃癌的发生、侵袭、转移进程。  相似文献   
6.
目的:探讨贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中Smad4(mothers against decapentaplegic homolog4)基因启动子区及第1外显子区的甲基化状态及其与TGF-β1蛋白表达之间的相关性。方法:取110例贲门腺癌组织及相应癌旁组织,分别采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)方法检测Smad4基因的甲基化情况,RT-PCR方法检测Smad4 mRNA水平,免疫组织化学法检测Smad4和TGF-β1的蛋白表达情况。结果:贲门腺癌组织Smad4基因启动子甲基化率为5.5%(6/110),Smad4基因第1外显子5′非翻译区的甲基化率为24.5%(27/110),相应癌旁正常黏膜均未检测到此两个位点的甲基化,癌组Smad4基因甲基化率显著高于癌旁正常组织(P〈0.05),且贲门腺癌中Smad4基因5′非翻译区发生甲基化的比率显并高于启动子区(P〈0.01)。贲门腺癌组织中Smad4 mRNA及蛋白表达显著低于癌旁正常组织(P〈0.05),其甲基化与蛋白表达之间呈负相关。TGF-β1在贲门癌组织中的表达(65.5%)明显高于相应癌旁组织(15.5%)(P〈0.01),且随肿瘤分期的增高和肿瘤分化程度的降低,TGF-β1的阳性表达率明显升高(P〈0.05)。Smad4蛋白和TGF-β1蛋白在贲门腺癌中的表达呈明显的负相关。结论:在贲门腺癌发生发展过程中Smad4基因第1外显子的5′非翻译区比启动子区更易发生高甲基化而导致基因沉默,Smad4甲基化及TGF-β1的过表达可能是贲门腺癌发生的机制之一。  相似文献   
7.
郭炜  董稚明  郭艳丽  邝钢  杨植彬  单保恩 《肿瘤》2011,31(4):332-338
目的:探讨转化生长因子β受体Ⅰ型(transforming growth factor-beta receptor type 1 gene,TGFBR1)Int7G24A和*6A单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与中国北方人群贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)遗传易感性的关系。方法:分别采用PCR-RFLP和PCR的方法检测468例GCA患者和584例健康对照人群中TGFBR1基因第7内含子Int7G24A和第1外显子*6ASNPs分布情况,同时对110例GCA患者术后切除肿瘤组织采用免疫组织化学方法检测TGFBR1蛋白的表达情况,并与其基因型进行相关性分析。结果:TGFBR1基因Int7G24A SNPs位点的基因型和等位基因型频率在GCA组和对照组间的分布差异有统计学意义(P<0.05),A等位基因携带者患GCA的风险是G等位基因的1.34倍[经性别、年龄和上消化管肿瘤家族史校正后的比值比(odds ratio,OR)=1.34,95%可信区间(confidence interval,CI)=1.03~1.87],与GG基因型相比,携带AA基因型可显著增加GCA的发病风险(校正后的OR=2.17,95%CI=1.15~3.72)。当按肿瘤分期进行分层分析时发现,与GG基因型相比,携带GA和AA基因型可显著增加Ⅲ期和Ⅳ期GCA的发病风险(校正后的OR=1.41,95%CI=1.05~1.98)。TGFBR1基因*6ASNPs位点的基因型及等位基因型频率在GCA患者组和对照组之间,其分布差异均无统计学意义(P>0.05)。GCA组织中TGFBR1蛋白的阳性表达率为27.3%,显著低于癌旁正常组织的100%(P<0.01),TGFBR1蛋白在GCA中的表达与TGFBR1基因Int7G24A和*6A位点的基因型之间无明显相关性(P>0.05)。结论:TGFBR1基因Int7G24A位点A等位基因可能是我国北方人群GCA的遗传易感基因,携带A等位基因的个体可增加GCA的发病风险。  相似文献   
8.
目的:探讨人贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-7(insulin-likegrowth factor binding protein 7,IGFBP7)基因启动子区及第1外显子区甲基化状态及其与IGFBP7蛋白表达之间的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2009年4月至2011年12月间收治的85例GCA患者癌组织标本和67例癌旁组织标本。采用甲基化特异性聚合酶链式反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法、RT-PCR及免疫组织化学法检测IGFBP7基因在GCA组织及癌旁组织中的甲基化情况、IGFBP7 mRNA及蛋白的表达。结果:GCA组织中IGFBP7基因启动子区甲基化率为52.9%(45/85),第1外显子5’非翻译区的甲基化率为35.3%(30/85),相应癌旁组织IGFBP7基因启动子区及第1外显子5’非翻译区的甲基化率分别为35.8%(24/67)和19.4%(13/67);癌组织IGFBP7基因启动子区及第1外显子5’非翻译区的甲基化率明显高于癌旁组织(P<0.05),且GCA组织中IGFBP7基因启动子区甲基化率显著高于第1外显子区(P<0.05)。GCA组织中IGFBP7 mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织(P<0.05),且与其启动子区甲基化状态呈负相关。结论:GCA组织中IGFBP7基因启动子区比第1外显子区更易发生甲基化而导致IGFBP7表达缺失,IGFBP7基因启动子区异常高甲基化可能是GCA发生的机制之一。  相似文献   
9.
郭炜  董稚明  郭艳丽  杨植彬  邝钢 《肿瘤》2012,32(4):275-280
目的:探讨贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中WWOX( WW domain-containing oxidoreductase)基因启动子区及第1外显子区的甲基化状态及其对表达的影响,并分析贲门腺癌中WWOX与Smad4(mothers against decapentaplegic homolog 4)蛋白表达之间的关系.方法:分别应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及其相应癌旁组织中WWOX基因的甲基化和蛋白的表达情况:应用免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及其相应癌旁组织中Smad4蛋白的表达.结果:贲门腺癌组织中WWOX基因启动子区(- 382~- 41 bp)及第1外显子区(- 27~+344 bp)的甲基化率[26.4% (33/125)和23.2% (29/125)]显著高于其相应的癌旁常组织(0%和0%)(P<0.01),并与贲门腺癌TNM分期和上消化系统肿瘤家族史有关(P<0.05).贲门腺癌组织中WWOX蛋白的表达阳性率显著低于相应癌旁组织(P<0.01),WWOX蛋白的表达与WWOX启动子区和第1外显子区甲基化状态之间呈负相关(r=-0.216,r=-0.255,P<0.05).贲门腺癌组织中Smad4蛋白表达的阳性率(47.2%)显著低于相应癌旁组织(94.4%)(P<0.01),且与WWOX在贲门腺癌中的表达呈明显的正相关(r=0.622,P<0.01).结论:WWOX基因启动子区及第1外显子区的高甲基化导致的基因表达下调可能在贲门腺癌中发挥重要作用.  相似文献   
10.
流式细胞光度术(Flow Cytometry)是一种快速定量分析细胞核酸含量的新技术,近年来已广泛用于肿瘤研究。单细胞悬液制备方法是应用该技术的重要环节。文献报道多采用新鲜肿瘤组织制备单细胞悬液。因此,不能结合恶性肿瘤病人  相似文献   
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