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TRAIL诱导肝癌细胞系SMMC-7721的凋亡作用 总被引:1,自引:1,他引:1
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胃癌细胞bcl-2和Caspase3的表达对TRAIL抗瘤作用的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨胃癌细胞bcl-2和Caspase3的表达对TRAIL抗瘤作用的影响。方法 应用细胞培养、P1染色、流式细胞仪检测的方法,观察胃癌细胞SGC-7901、MKN28、AGS、MKN45经TRAIL作用后细胞周期及细胞凋亡率,western blot方法分析4种胃癌细胞中bel-2和Caspase3的表达。结果 TRAIL300ng/ml作用于胃癌细胞24h后,胃癌细胞MKN28、MKN45、AGS和SGC-790I的凋亡率分别为36.05%、20.27%、16.50%和11.80%。Western blot结果显示MKN28细胞Caspase3的表达高于其它细胞,而bel-2的表达在各细胞间并无明显差别。结论 胃癌细胞对TRAIL的敏感性与Caspase3的高表达有关,而与bel-2的表达无关。 相似文献
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5-Aza-CdR增强TRAIL对胃癌细胞的抗瘤活性与caspase-8表达的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨5-Aza-CdR对凋亡诱导分子TRAIL抗胃癌细胞活性的影响.方法采用MTT方法检测TRAIL蛋白的抗癌活性;采用RT-PCR方法检测caspase-8 mRNA的表达.结果 TRAIL 200 ng/ml作用72 h对SGc 7901、Kato 3和AGS胃癌细胞的生长抑制率分别为9.83%、11.94%和4.04%;经5-Aza-CdR处理后,对3株胃癌细胞的抑制率分别提高到38.98%、52.42%和30.72%;用5-Aza-CdR处理后3株胃癌细胞caspase-8 mRNA表达明显增加.结论 5-Aza-CdR能增强胃癌细胞对TRAIL的敏感性,其机制可能与caspase-8的表达上调有关. 相似文献
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导30余种人类肿瘤细胞凋亡,在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景。目的:构建携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体,鉴定其在肝癌细胞株中的表达。方法:以重叠延伸聚合酶链反应(PCR)扩增白细胞介素(IL)-2信号肽和TRAIL膜外区融合片段,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack—CMV,转化含复制缺陷型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌pAdBJ5183,经细菌内同源重组产生重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂质体法转染HEK293细胞包装病毒,感染肝癌细胞株HepG2.荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。结果:成功构建了携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体。病毒感染HepG2细胞48h后,超过95%的细胞中出现绿色荧光。结论:所构建的复制缺陷型重组腺病毒Ad—IL-2-TRAIL可在肝癌细胞中高效表达可溶性TRAIL,为进一步行肿瘤TRAIL基因冶疗提供了实验依据。 相似文献
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目的构建抗KDRscFv复制缺陷型腺病毒载体,为抗KDRscFv抗肿瘤血管生成的体内应用打下实验基础。方法采用重叠延伸PCR方法构建IL-2信号肽及抗KDRscFv融合基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,转染含pAdEasy-1的BJ5183细菌,经细菌内同源重组产生携带抗KDRscFv基因(含信号肽)的重组腺病毒载体pad-抗 KDRscFv,经脂质体法转染293细胞,包装产生携带抗KDRscFv基因的重组腺病毒Ad-抗 KDRscFv。结果构建了表达抗KDRscFv基因的复制缺陷型腺病毒,且该重组腺病毒能在肝癌细胞株HepG2中高效表达。结论成功构建表达抗KDRscFv基因的复制缺陷型腺病毒载体,为进一步研究抗KDR-scFv在肿瘤治疗中的作用研究提供实验基础。 相似文献
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To study the effects of the methylation status of caspuse-8 promoter on the antitunlor activity of TRAIL to the human gastric cancer cells. Methods: The methylation of caspuse-8 was measured with methylation specific PCR (MSP) and the antitomor capability of TRAIL to human gastric cancer cells was determined with MTT. Results: No methylation of caspase-8 in the human gastric cancer cells was found. The sensitivity of 5 lines of gastric cancer cells to the antitumor activity of TRAIL was different. The administration of the demethylation agent 5-Aza-2‘-deoxycytidine (5-Aza-CdR) increased the sensitivity of gastric cancer cells to TRAIL but did not change the methylation status of caspuse-8 promoter in gastric cancer cells. Conclusion: 5-Aza-CdR increases the sensitivity of most of gastric cancer cells to TRAIL butcaspuse-8 is not involved in the antitumor activity of TRAIL. 相似文献
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凋亡相关蛋白在胃癌细胞凋亡中的作用研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 研究核转录因子 (NF) κB、生存素 (survivin)、Bcl 2和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的胃癌细胞凋亡中的作用。方法 应用细胞培养和流式细胞仪检测的方法 ,观察胃癌细胞SGC 790 1、MKN2 8、AGS、MKN45经TRAIL作用后的细胞凋亡率 ,Westernblot方法分析 4种胃癌细胞中NF κB、生存素、Bcl 2和Caspase3的表达。结果 TRAIL 50ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 2 4.0 5% ,7.83 % ,8.0 5%和3 .17%。TRAIL 3 0 0ng/ml作用于胃癌细胞 2 4h后 ,MKN2 8、MKN 45、AGS和SGC 790 1细胞的凋亡率分别为 3 6.0 5% ,2 0 .2 7% ,16.50 %和 11.80 %。Westernblot结果显示 ,SGC 790 1细胞NF κB、生存素的表达高于MKN2 8细胞 (P <0 .0 5) ,与Bcl 2的表达无明显差异。MKN2 8细胞Caspase3的表达高于SGC 790 1细胞 (P <0 .0 5)。结论 TRAIL具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特性 ,肿瘤细胞对TRAIL的耐药现象可能与凋亡抑制因子生存素和NF κB的表达增强以及Caspase3 的表达抑制有关 相似文献
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人端粒保护蛋白1(hPOT1)的主要作用为保护端粒和调节端粒长度。目的:探讨hPOT1在人胃癌细胞中对端粒长度的调节作用及其可能机制。方法:以RNA干扰(RNAi)技术抑制人胃癌细胞株BGC-823中hPOT1的表达.以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞端粒长度,以半定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达。结果:以RNAi技术抑制hPOT1表达后,BGC-823细胞端粒长度明显缩短,反映端粒相对长度的T/S值显著小于亲本BGC-823细胞组和阴性对照组(1.383±0.091对2.758±0.647和3.043±0.548,P〈0.05),亲本细胞组与阴性对照组之间则无明显差异。hPOT1RNAi组细胞hTERTmRNA表达亦明显下调。结论:在人胃癌细胞中,hPOT1能正性调节端粒长度;在hPOT1下调引起端粒缩短的环节中,hTERT表达下降可能起一定作用。 相似文献