葡萄糖转运体9基因 rs3733591（C>T）的单核苷酸多态性与我国汉族人群原发性痛风发病的相关性研究

目的探讨葡萄糖转运体9（SLC2A9）基因 rs3733591（C>T）的单核苷酸多态性（SNPs）与我国汉族人群痛风发病及血尿酸水平的相关性,并分析其多态性与痛风患者、健康体检者 PBMCs SLC2A9 mRNA 表达的相关性。方法①采用 TaqMan?探针法检测痛风组（297例原发性痛风性关节炎患者）和健康对照组（211名健康体检者） rs3733591（C>T）位点的基因型,χ2检验比较2组基因型及等位基因分布频率,计算比值比（OR）及95%可信区间（95%CI）。②采用实时荧光定量-PCR（RT-qPCR）法检测46例间歇期痛风患者及40名健康对照组 PBMCs SLC2A9 mRNA 的表达水平,非参数检验比较各组变量间的差异,并分析与 rs3733591（C>T）多态性的相关性。结果 rs3733591（C>T）位点的 TT 基因型在痛风组的分布频率显著低于健康对照组（37.7%与48.3%,P=0.017）,携带 TT 基因型的个体罹患痛风的相对风险OR 为0.647（95%CI：0.452~0.925）。而等位基因 T 在痛风组中的分布频率为60.9%,显著低于健康对照组的69.2%（χ2=7.324,P=0.007）,携带等位基因 T 的个体罹患痛风的相对风险 OR 为0.695（95%CI：0.533~0.905）;等位基因 C 在痛风组中的分布频率为39.1%,显著高于健康对照组的30.8%（χ2=1.440,P<0.05）。痛风组中携带 TC 基因型个体的外周血单个核细胞 SLC2A9 mRNA 的表达水平显著高于携带 TT 基因型者,而痛风组及健康对照组携带其他基因型的个体 SLC2A9 mRNA 的表达差异无统计学意义（P>0.05）。有痛风石（30例）痛风患者与无痛风石（190例）痛风患者的基因型及等位基因分布频率差异无统计学意义（P>0.05）。结论本研究提示 SLC2A9基因 rs3733591（C>T）位点的多态性可能与我国汉族人群原发性痛风的易感性相关,而与痛风患者痛风石形成无关;等位基因 C 可能为痛风发病的风险因子,而 TT 基因型及 T 等位基因可能对痛风发病具有保护作用;其多态性可能通过影响 SLC2A9基因的转录表达水平来参与痛风的发病。     

急性痛风性关节炎外周血单个核细胞NOD1及NOD2 mRNA表达的研究

NOD样受体(NOD-like receptors,NLRs)是近年来发现的胞质型模式识别受体(PRRs),通过识别病原相关分子模式(PAMPs)能迅速启动先天性免疫,并能通过信号传导启动适应性免疫,在机体的免疫防御中发挥重要作用.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞端粒保护蛋白TPP1及POT1基因表达的研究

目的 研究端粒保护蛋白TPP1及POT1基因在系统性红斑狼疮(SEE)患者与健康人外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及其与SEE肾损、疾病活动度的相关性.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应检测SEE患者活动组28例、缓解组20例及健康对照组30例PBMCs TPP1、POT1 mRNA表达水平,并且与SEE患者临床指标进行相关性分析.结果 SLE组与健康对照组相比,TPP1及POT1基因表达明显降低(P均<0.01),活动组与缓解组均显著低于健康对照组(P均<0.05);POT1基因在活动组的表达显著低于缓解组(P<0.05);TPP1及POT1基因在肾损组的表达低于无肾损组(P<0.01),在SLE肾损患者中,尿蛋白定量与TPP1及POT1基因的表达水平呈负相关(P<0.05),尿白细胞与POT1基因呈负相关(P<0.05);红细胞沉降率、C反应蛋白、抗核抗体与TPP1、POT1基因的表达及SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分没有相关性;POT1 mRNA的表达与血清IsG、SLEDAI评分呈负相关(P<0.05,P<0.01),与补体C3呈正相关(P<0.01);TPP1 mRNA的表达与血清IgG、SLEDAI评分及C3没有相关性.结论 端粒保护蛋白TPP1和POT1基因在SLE的发病中发挥重要作用,其参与了SLE肾脏损害的病理过程,POT1可作为SEE疾病活动的有效的评判指标.     

Toll样受体2和Toll样受体4及其信号通路在原发性痛风性关节炎发病机制中作用的研究

目的 探讨Toll样受体(TLR)2、TLR4及其信号通路在痛风炎症反应中的作用.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测痛风性关节炎急性组32例、痛风性关节炎非急性组20例及健康对照组(健康体检者)32名外周血单个核细胞(PBMCs)TLR2 mRNA、TLR4 mRNA水平,Western-blot检测上述3组各8例PBMCs核蛋白核因子-κB p65,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组血浆白细胞介素(IL)-1β含量;并将上述各指标水平与痛风患者及健康体检者血尿酸水平进行相关性分析.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验.结果 TLR4 mRNA、核因子-κB D65、血浆IL-1β及血尿酸水平在痛风性关节炎急性组[(5.0+1.2)、(7.11+0.18)、(283_+83)pg/ml、(585_+123)μmol/L]和非急性组[(2.3±O.4)、(0.63±0.06)、(134±29)pg/ml,(493±107)μmol/L]均显著高于健康对照组[(1.1± 0.6)、(0.52±0.12)、(97±17)pg/ml,(326±65)μmol/L](P均<0.01),痛风性关节炎急性组高于非急性组(P均<0.01);TLR2 mRNA在3组的表达差异无统计学意义(P>0.05).痛风患者TLR4 mRNA和IL-1B水平与血浆尿酸水平呈正相关(rs=0.876,0.779;P均<0.05),而TLR2 mRNA和IL-1β水平与血浆尿酸水平无相关性(P均>0.05).健康体检者TLR4、TLR2 mRNA与血尿酸、IL-1B水平均无相关性(P均>0.05).结论 原发性痛风性关节炎可通过胞膜型模式识别受体激活固有性免疫应答,TLR4-核因子-κB-IL-1β信号通路参与了痛风免疫及炎症反应调节,痛风患者体内尿酸盐晶体与TLR4及其信号通路激活有关.

Abstract：

objective The roles of TLRs and their signal pathway in gouty arthritis(GA)were explored.Methods TLR2 and TLR4 mRNA was measured using real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-PCR)in PBMCs,IL-1β level was detected using ELISA in plasma,and NF-κB p65 protein level in PBMCs was measured using Western blot.Level of TLR2 mRNA,ILR4 mRNA,IL-1β,NF-κB p65protein was compared among acute GA,non-acute GA and healthy controls.Correlation between TLR2mRNA,TLR4 mRNA and serum uric acid,IL-1β level in GA patients was analyzed.One-way ANOVA was used to analyze data between multiple groups and q-test was used for two-two comparison.Spearman's analysis was applied for correlation analysis.Resuits The expression of TLR4 mRNA,NF-KB p65 protein,IL-1β arid serum uric acid level in patients with acute GA [(5.0±1.2), (7.11±0.18), (283±83)pg/ml,[585±123)μmol/L] was significantly increased compared to non-acute GA[(2.3±0.4),(0.63±0.06),(134±29)pg/ml,(493±107)μmol/Lj and healthy controls(1.1±0.6),(0.52±0.12),(97±17)pg/ml,(326±65)μmol/L](P<0.01,respectively).Significant diffefence was also observed between non-acute GA patients and healthy controls(P<0.05,respectively).The level of TLRR4 mRNA was positively correlated with uric acid and IL-1β level in GA patients(rs=0.876,0.779;P<0.05,respectively).Conclusion Innate immunity are activated by membrane-type pattern recognition receptors in primary GA.TLR4-NFκB p65-IL-1β signat transduction may participate in the inflammatory mechanisms of gout.Urate crystals in patients with gout may:be involved in the activation of TLR4 and its signal pathway.     

系统性红斑狼疮伴血液系统损害的临床研究

目的观察系统性红斑狼疮（SLE）血液系统损害的特征,探讨其临床意义。方法 145例确诊的SLE患者被纳入研究,分为贫血组、免疫性血小板减少性紫癜（ITP）组、白细胞减少组、对照组（无血液系统改变的SLE）四组。所有患者均接受常规血液学及免疫学检查,部分患者行骨髓检查。结果 113例（77.9%）SLE患者有血液学异常,贫血88例（60.7%）,贫血的主要类型有慢性疾病性贫血（ACD）37例（42.0%）、缺铁性贫血（IDA）29例（33.0%）、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）15例（17.0%）、其他7例（8.0%）;白细胞减少46例（31.7%）,〈3.0×109/L14例;血小板减少57例（39.3%）;无血液学异常32例（22.1%）。SLE并发AIHA的肾损伤发生率及SLE疾病活动指数（SLEDAI）较对照组高（P〈0.05）;AIHA组dsDNA、AnuA抗体、抗心磷脂抗体（ACL）的阳性率较对照组高（P〈0.05）,而C3明显降低（P〈0.05）。42例患者行骨髓检查,36例增生活跃,6例增生低下;5例有骨髓细胞形态异常。结论 SLE并发血液系统损害多见,以贫血最为常见,其可能不仅与ACL等抗体诱导的外周成熟红细胞破坏有关,还与铁代谢紊乱导致的骨髓红系造血细胞功能异常有关;AIHA可能是SLE出现肾损害的危险因素,并可作为疾病活动的评判指标;血小板减少与巨核细胞成熟障碍有关。骨髓造血细胞受累亦可能是SLE并发血细胞损害的原因。     

痛风患者血脂水平分析

目的：分析痛风患者血脂水平特征,探讨痛风患者血脂异常的可能原因及心血管系统疾病高发生率的机制。方法：测定41例痛风患者（痛风组：急性发作期组28例,发作间歇期组13例）与40例健康体检者对照组血总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A（apoA）、载脂蛋白B（apoB）、脂蛋白（a）[Lp（a）]、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）和超敏C-反应蛋白（hs-CRP）浓度,并分析hs-CRP水平与血脂浓度的相关性。结果：与对照组相比,痛风组血浆中TC、LDL-C、apoB、Lp（a）和ox-LDL浓度均显著增高（P〈0.05）;痛风急性发作期患者hs-CRP浓度显著高于对照组（P〈0.01）,HDL-C浓度则显著低于对照组和痛风缓解期组（P〈0.05）;痛风急性发作期患者HDL-C浓度与hs-CRP呈显著负相关（r=-0.452,P〈0.05）。结论：痛风患者体内致动脉粥样硬化性血脂谱特征的血脂发生显著变化,急性发作期患者血脂谱的变化可能与体内炎性反应及氧化应激有关。     

血浆瘦素在原发性痛风性关节炎及高尿酸血症患者的表达及临床意义

目的:检测血浆瘦素(leptin,LEP)在原发性痛风性关节炎患者(gouty arthritis,GA)、高尿酸血症者(hyperuricemia,HA)及健康体检者(normal control,NC)的表达水平,从而探讨LEP在GA和HA发病机制中可能的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测GA组(84例)、HA组(38例)和NC组(43例)血浆LEP含量,比较其差异性,分析血浆LEP与GA及HA组临床及实验室指标的相关性。结果:LEP在三组表达差异有统计学意义(F=17.78,P<0.05),进一步两两分析(LSD法)发现LEP在GA组的表达显著高于HA组[(436.55±246.65)pg/mL vs(306.25±173.16)pg/mL,P<0.05]和NC组[(436.55±246.65)pg/mL vs(199.68±185.54)pg/mL,P<0.05],HA组显著高于NC组[(306.25±173.16)pg/mL vs(199.68±185.54)pg/mL,P<0.05]。相关分析发现痛风患者LEP水平与体重指数(BMI)、极低密度脂蛋白(VLDL)、肌酐(Cr)均呈显著正相关(r=0.31,r=0.28,r=0.25;P均<0.05),而与血尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血糖(GLU)、中性粒细胞绝对值(GR)、淋巴细胞绝对值(LY)、血沉(SR)、C反应蛋白(CRP)均无明显相关性(P均>0.05)。高尿酸血症者LEP水平与GLU呈显著正相关(r=0.42,P<0.05),与UA、TG、HDL、LDL、VLDL均无明显相关性(P均>0.05)。结论:LEP的高表达可能参与了原发性痛风性关节炎及高尿酸血症的发生发展。LEP可能主要在痛风的脂代谢障碍及肾功能损害中发挥作用,可能参与高尿酸血症的糖代谢过程。     

可溶性载体2家族成员9基因的单核苷酸多态性与我国川东北地区汉族人群原发性痛风发病的相关性研究

目的 探讨SLC2A9(rs10489070)的单核苷酸多态性与我国川东北地区汉族人群痛风发病及血尿酸水平的相关性.方法 采用Taqman(R)探针法检测痛风组(151例原发性痛风患者)和对照组(176名健康体检者)rs10489070(C＞G)位点基因型,分析基因型及等位基因在2组的分布频率,并比较不同基因型实验室指标及临床资料的差异.统计学处理采用t检验x2检验和(或)Fisher精确概率法.结果 rs10489070( C＞G)位点在所有研究对象的基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡.CC型在痛风组的分布频率显著高于对照组(78.8％和68.8％,P＜0.05),而CG型则低于对照组(19.9％和30.1％,P＜0.05);等位基因C和G在2组的分布差异无统计学意义(P＞0.05).有痛风石(14例)与无痛风石(97例)痛风患者基因型分布频率差异有统计学意义(P＜0 05),CG基因型在有痛风石者的分布频率显著低于无痛风石患者(0和22.7％,P＜0.05).携带CC基因型患者血尿酸及血糖水平均高于未携带CC基因型患者,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SLC2A9 rs 10489070(C ＞G)的多态性可能与我国川东北地区汉族人群原发性痛风的易感性相关,携带CC基因型个体更易患痛风,CG基因型则可能对痛风的发病及痛风患者痛风石的形成具有保护作用.