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目的探讨ITGB1基因过表达对人乳腺上皮MCF10A细胞迁移和侵袭的影响。方法构建重组质粒p BABEpuro-myc-ITGB1,在人胚肾上皮细胞系293T细胞中包装反转录病毒,转染人乳腺上皮MCF10A细胞系,构建ITGB1基因过表达的稳定细胞系;实验设空白对照组(MCF10A)、阴性对照组(MCF10A-vector)和ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1);经嘌呤霉素筛选后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ITGB1 mRNA及蛋白的表达;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞株迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法进一步检测上皮间质转换(EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK、p-FAK和FAK蛋白的表达。结果成功构建ITGB1基因稳定过表达人乳腺上皮MCF10A细胞系;ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1)与空白对照组(MCF10A)和阴性对照组(MCF10A-vector)细胞相比,迁移能力(P0.05)和侵袭能力(P0.01)显著增强;EMT相关蛋白E-cadherin显著下调(P0.05),vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK,p-FAK蛋白显著上调(P0.05)。结论在人乳腺上皮MCF10A细胞中,过表达ITGB1基因诱导细胞EMT并促进其迁移和侵袭。 相似文献
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目的探讨血浆中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)的定量检测在乙型肝炎(乙肝)中的临床意义。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定60例慢性乙肝患者(乙肝患者组)和41例正常人(正常对照组)血浆中色氨酸和犬尿氨酸含量,并对两组数据进行比较。结果正常对照组Trp含量为(76.99±10.88)μmol/L,Kyn含量为(2.16±0.32)μmol/L,Kyn/Trp为0.028±0.003;乙肝患者组Trp含量为(68.04±8.52)μmol/L,Kyn含量为(2.18±0.26)μmol/L,Kyn/Trp为0.032±0.004。乙肝患者组血浆Trp含量明显低于正常对照组(P<0.01),Kyn/Trp明显高于正常对照组(P<0.01),两组Kyn含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性乙肝患者色氨酸代谢发生异常,检测患者血浆中Trp和Kyn有重要的临床意义。 相似文献
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目的：构建低氧诱导的乳腺癌癌相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts,CAF）能量代谢重塑（energy metabolism reprogramming,EMR）细胞模型,为其后续分子机制和生物学功能研究奠定基础。方法：以成对的永生化的乳腺癌癌旁组织来源正常成纤维细胞（normal fibroblasts,NF）和CAF为处理对象,根据[O2]不同,NF和CAF细胞各分为常氧处理组和低氧处理组。不同氧浓度分别处理NF和CAF细胞0、1、3、6、12 h和24 h。葡萄糖消耗实验和乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平;线粒体活性检测实验评估细胞氧化磷酸化（oxidative phosphorylation,OP）活性;Western blot实验检测细胞能量代谢相关蛋白包括单羧酸转运子4（monocarboxylate transporters 4,MCT4）、细胞色素氧化酶Ⅳ亚基（cytochrome oxidase Ⅳ subunit,COX Ⅳ）和低氧诱导因子1α亚基（hypoxia inducible factor 1α subunit,HIF1α）的蛋白表达量。结果：低氧与CAF细胞EMR呈剂量效应和时间效应关系,1%[O2]作用24 h为最佳低氧处理条件。与NF常氧组相比,低氧处理（1%[O2]作用24 h）使CAF葡萄糖吸收和乳酸产生能力分别增强2倍和3.1倍,明显抑制其氧化磷酸化活性,使CAF细胞中MCT4和HIF1α蛋白表达量分别上升3.1倍和3.9倍及COX Ⅳ下调90%。结论：低氧（1%[O2]作用24 h）使CAF具有典型的EMR表型。本研究成功构建低氧诱导的乳腺癌CAF细胞EMR模型。 相似文献
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目的：探究肝硬化相关血清学指标与肝硬化Child-Pugh分级之间的关系和临床意义。方法：收集重庆医科大学附属第二医院感染科2016年7月至2017年4月间肝硬化患者血清235例,其中Child-Pugh A组55例,B组90例,C组90例,以及同期健康体检人群35例,分别检测肝功能、肝纤维化、血小板计数等指标并分析其特征。结果：透明质酸（hyaluronic acid,HA）、层粘连蛋白（laminin,LN）、Ⅲ型胶原蛋白（type Ⅲ collagen,PC-Ⅲ）、Ⅳ型胶原蛋白（type Ⅳ collagen,Ⅳ-C）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酰氨基转移酶（alanyl aminotransferase,ALT）及天门冬氨酸氨基转移酶与血小板计数比（aspartate aminotransferase to platelet ratio index,APRI）指数之间差异均具有统计学意义（P<0.05）。HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN和AST指标对预测肝硬化的曲线下面积（AUC）分别为0.910、0.804、0.833、0.753、0.730。HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C与Child-Pugh分级呈高度正相关（r>0.7,P<0.01）,APRI与分级呈显著性正相关（0.4相似文献
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