黄芩苷协同头孢唑啉对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究

目的研究黄芩苷对金黄色葡萄球菌(S.a)生物膜(BF)的破坏作用以及与头孢唑啉(CEZ)的协同杀菌效果。方法选取临床分离的编号为17546的S.a构建体外BF模型,试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MICs)和最低杀菌浓度(MBCs),结晶紫染色法半定量BF,连续稀释法活菌计数。结果 BF经黄芩苷作用24h后BF半定量结果显示,黄芩苷组吸光度值为(1.284±0.076),黄芩苷+CEZ组第16h、24h分别为(0.931±0.206)、(0.611±0.738),均少于空白对照组(P<0.01)。黄芩苷+CEZ组第8h、16h、24hBF内的活菌计数分别为(6.906±0.376)×lgCFU/ml、(6.801±0.109)×lgCFU/ml、(6.014±0.340)×lgC-FU/ml,均少于空白对照组(P<0.01)。结论黄芩苷和CLA能破坏S.a已形成的BF,并可增强CEZ对BF内S.a的清除作用。     

黄芩素联合左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的体外作用

目的 探讨黄芩素协同左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的影响,为临床用药提供参考.方法 构建生物膜体外模型;分为空白组、黄芩素组、阳性对照克拉霉素组、左氧氟沙星组、克拉霉素+左氧氟沙星组、黄芩素+左氧氟沙星组;两倍稀释法测定药物的最低抑菌及杀菌浓度;连续稀释法行活菌计数;激光扫描共聚焦显微镜及扫描电镜观察生物膜形态.结果 17 546株金黄色葡萄球菌经培养3d和7d后可形成早期及成熟期的生物被膜;早期活菌计数结果显示,无论是早期或成熟期各组单独作用时与空白组相比差异均无统计学意义,而早期的黄芩素+左氧氟沙星组(7.19±0.12)log10 CFU/ml、克拉霉素+左氧氟沙星组(7.25±0.13)log10 CFU/ml,与空白组(7.88±0.10)log10 CFU/ml或左氧氟沙星(7.81±0.07)log10 CFU/ml单独作用组相比,活菌计数明显减少(P＜0.05);成熟期的黄芩素+左氧氟沙星组(7.29±0.09) log10 CFU/ml、克拉霉素+左氧氟沙星组(7.36±0.11)log10 CFU/ml与空白组(7.89±0.12)log10 CFU/ml或左氧氟沙星(7.87±0.08)log10 CFU/ml单独作用组相比,活菌计数也明显减少(P＜0.05);激光扫描共聚焦显微镜观察发现无论是早期或成熟期药物组合作用组与单独作用组相比,死菌均明显增多.结论 黄芩素对金黄色葡萄球菌生物膜具有破坏作用,与左氧氟沙星联合应用,可显著增强左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌生物膜的杀菌作用.     

黄芩素协同万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌早期生物被膜的研究

目的 通过建立体外耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)早期生物被膜(BF)模型,研究黄芩素对BF的影响及其联合万古霉素(VAN)的协同杀菌效果.方法 选取临床分离并且能够稳定形成BF的MRSA 17546,采用胰蛋白胨大豆肉汤添加0.5％葡萄糖为培养基,复制体外早期BF模型,实验分为空白对照组、阳性对照组[16 mg/L克拉霉素(CLR)组、4 mg/L VAN组、16 mg/L CLR+4 mg/LVAN组]、实验组(32 mg/L黄芩素组、32 mg/L黄芩素+4 mg/L VAN组).试管二倍稀释法测定药物的最低抑菌浓度,连续稀释法进行活菌计数,扫描电镜观察BF的形态结构.结果 早期BF经VAN、CLR及黄芩素作用后BF内活菌数分别为(7.95±0.19)、(8.03±0.23)、(7.95±0.18) log10 cfu/ml,与空白对照组[(7.99±0.25) log10 cfu/m1]相比差异无统计学意义(P＞0.05).16 mg/LCLR+4 mg/LVAN组、32mg/L黄芩素+4 mg/L VAN组活菌数为(7.71±0.25)、(7.29±0.16) log10cfu/ml,低于空白对照组(P＜0.01),且32 mg/L黄芩素+4 mg/L VAN组比16 mg/L CLR+4 mg/L VAN组活菌数进一步减少(P＜0.05).经扫描电镜观察,可见黄芩素组载体上的BF比空白对照组减少,VAN组BF内细菌数未见明显减少,而黄芩素+VAN组BF内的细菌数明显比空白对照组减少.结论 黄芩素能破坏MRSA已形成的早期BF,增强VAN对BF内MRSA的清除作用,且黄芩素破坏BF及其协同杀菌作用强于CLR.     

黄芩苷及联合左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌早期生物膜的体外影响

目的 探讨黄芩苷及联合左氧氟沙星(LFX)对金黄色葡萄球菌(S.a)生物被膜(BF)的影响.方法 以临床分离S.a菌株17546为实验菌株,构建生物膜体外模型;分为空白组、黄芩苷组、LFX组、黄芩苷+LFX组;二倍稀释法测定药物的最低抑菌及杀菌浓度;连续稀释法行活菌计数;激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)及扫描电镜(SEM)观察BF形态.结果 S.a17546培养3d后可形成早期的BF.药物作用12h后BF内活菌计数示:LFX、黄芩苷单独作用与空白组相比,差异无显著性(P＞0.05);但与空白组、LFX单独作用组相比,黄芩苷+LFX组活菌计数均明显减少(P＜0.05).CLSM示黄芩苷+LFX组与空白组、LFX单独作用组相比,死菌明显增多.SEM示黄芩苷+LFX组与空白组、LFX单独作用组相比菌数及胞外基质均显著减少.结论 黄芩苷在体外对S.a BF具有破坏作用,与LFX联合应用,可显著增强LFX对BF的杀菌作用.     

黄芩素对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用的体外研究

目的研究黄芩素(Baicalein)对金黄色葡萄球菌(S.a)早期、成熟生物膜(biofilm,BF)的抑制作用。方法以编号为17546金黄色葡萄球菌为实验菌株,构建体外BF模型。分为空白对照组、实验组(黄芩素组),二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);荧光显微镜观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数。结果建模3 d,荧光显微镜发现黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组形成BF明显少于空白对照组,载体表面活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.00±0.27、4.24±0.31、5.26±0.45,均少于空白对照组活菌计数5.69±0.18(P<0.05);建模7 d荧光显微镜观察,黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组仅见少许散在生物膜,BF结构较空白对照组明显稀薄,其BF内细菌活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.04±0.12、4.69±0.41、5.63±0.10亦均少于空白对照组活菌计数6.08±0.10(P<0.05)。结论黄芩素在体外可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成。     

黄芩苷协同头孢唑啉对金黄色葡萄球菌生物膜的体外研究

目的 研究黄芩苷对金黄色葡萄球菌（S.a）生物膜（BF）的破坏作用以及与头孢唑啉（CEZ）的协同杀菌效果。方法选取临床分离的编号为17546的S.a构建体外BF模型,试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度（MICs）和最低杀菌浓度（MBCs）,结晶紫染色法半定量BF,连续稀释法活茵计数。结果BF经黄芩苷作用24h后BF半定量结果显示,黄芩苷组吸光度值为（1．284±0．076）,黄芩苷＋CEZ组第16h、24h分别为（0．931±0．206）、（0．611±0．738）,均少于空白对照组（P〈0．01）。黄芩苷＋CEZ组第8h、16h、24hBF内的活菌计数分别为（6．906±0．376）×lgCFU／ml、（6．801±0．109）×lgCFU／ml、（6．014±0.340）×lgC-FU／ml．均少于空白对照组（P〈0．01）。结论黄芩苷和CLA能破坏S.a已形成的BF,并可增强CEZ对BF内S.a的清除作用。     

黄芩苷对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用的体外研究

目的 研究黄芩苷对金黄色葡萄球菌早期、成熟生物膜(BF)的抑制作用.方法 以编号为17546金黄色葡萄球菌为试验菌株,构建体外BF模型,分为空白对照组、试验组(黄芩苷组),两倍稀释法测定最低抑菌浓度;荧光显微镜观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数.结果 建模3d,荧光显微镜发现黄芩苷终浓度分别为1024、512、256 μg/ml的试验组形成BF明显少于空白对照组,载体表面活菌计数分别为(5.05±0.27)、5.17±0.31)、(5.27±0.55)log10CFU/ml,均少于空白对照组(P＜0.05);建模7d荧光显微镜观察,黄芩苷终浓度分别为1024、512、256 μg/ml的试验组仅见少许散在生物膜,BF结构较空白对照组明显稀薄,其BF内细菌活菌计数分别为(5.19±0.30)、(5.24±0.04)、(5.33±0.22)log10CFU/ml,亦均少于空白对照组(P＜0.05).结论 黄芩苷在体外可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成.