常规石蜡组织切片中的常见问题分析及处理

常规石蜡组织切片是HE制片过程中的一个重要环节,在HE制片质量评定得分标准中占50%的分值.制做一张优质的HE切片,组织切片是制片的关键,也是每个病理实验(技术)人员必须熟练掌握的一项基本技能.作者通过大量的实践工作总结和查阅复习文献,现将常规石蜡组织切片中遇到的常见问题加以分析,并提出解决的办法,供广大同仁参考.     

t-复合多肽1基因在原发性肾病综合征患者外周血单个核细胞中的表达

目的:初步探讨t-复合多肽1(TCP-1)基因在原发性肾病综合征(PNS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及临床意义。方法:收集体检20例正常人(A组)和30例PNS患者(B+C组,其中B组为初发PNS患者,未用激素;C组为复诊PNS患者,使用激素2～3个月。各15例)的新鲜外周血液。用RT-PCR检测其外周血PBMC中TCP-1基因的表达。结果:A组分别与B+C组、B组、C组相比,TCP-1基因的表达差异均有显著性(P<0.01);B组与C组中的表达差异无显著性(P>0.05)。结论:TCP-1可能参与了PNS的发生发展过程。     

149例涉及免疫组化检测的病理医疗纠纷分析

目的 分析因免疫组化检测（immunohistochemistry examination,IHC）引发的病理科医疗纠纷案件的特点及原因,并提出改善建议。方法 下载并回顾性分析中国裁判文书网2017—2021年149例涉及IHC的病理医疗纠纷案件。结果 基层医院为主要涉案医院（44.0%）,医方责任案件137例,案件获赔率91.9%。病变部位以女性生殖、淋巴造血和软组织系统为主,病变种类以淋巴瘤、各类肉瘤、交界肿瘤以及少见罕见病为主。各种原因未行IHC检测是引起纠纷的主要原因,IHC指标不全、技术局限、病理医生判读错误等致病理诊断偏差为次要原因。结论 病理科涉及IHC的医疗纠纷防范主要在于提高病理医务工作者的业务水平,提高IHC送检率、会诊率,规范IHC质控。     

抗原修复时间对陈旧性乳腺癌核抗原表达的影响

目的：探索使陈旧性乳腺癌石蜡标本ER、PR、Ki-67在免疫组化检测中获得高表达的抗原修复时间。方法采用Envision二步法，将120例存放＞2年的乳腺癌石蜡组织切片，分别在EDTA（pH9.0）修复液中高压修复5、10、15、20min和水浴修复30min，比较抗原表达差异。结果 ER、PR在修复时间＞15min时阳性率明显提高，Ki-67在高压修复15、20min组阳性率较水浴30min、高压修复5、10min组明显提高。ER、PR、Ki-67在高压修复20min时阳性信号强，阳性率最高，与修复5、10min组差异有显著性（P＜0.05）。结论高压修复20min可显著提高陈旧性乳腺癌石蜡组织ER、PR、Ki-67抗原的检出率。     

9464例消化道恶性肿瘤统计分析

目的：对我院消化道恶性肿瘤进行统计分析,为本地区消化道肿瘤的防治研究提供依据。方法：统计分析我院2000～2009年病理组织学确诊的新增消化道肿瘤病例。结果：10年内新增消化道肿瘤中恶性肿瘤占85.12%,年增长率2.49%～13.84%;男性明显多于女性;大肠恶性肿瘤居首。40岁以上是高发年龄,食道、胃恶性肿瘤高发年龄在40～60岁,大肠恶性肿瘤在60岁以上老年人发病较多。结论：消化道恶性肿瘤逐年上升,存在性别、部位、年龄特征,对高危人群应加强防治工作,尽量早发现、早诊治。     

HE染色两次分化法在病理制片技术中的应用与探索

目的 改变传统的组织切片HE染色方法,为病理诊断提供优质HE染色的组织切片.方法 采用深染重退即延长时间或加温染苏木素,过染伊红,经2次或2次以上分化达到最佳染色效果.结果 细胞核、核染色质颗粒清楚,核膜清晰,均质深蓝染色,核仁明显呈紫红色,黏液、软骨呈紫色,细胞质呈桃红色,血管、结缔组织呈粉红色,肌肉呈红色,红细胞呈朱红色,色彩鲜艳,层次分明,红、蓝对比突出.结论 延长时间或加温染苏木素,过染伊红,经2次或2次以上分化染出的组织切片明显优于传统HE染色方法染出的组织切片,该方法值得在临床病理外检制片中推广使用.     

成人散发性激素耐药性肾病综合征差异基因的筛选

目的:筛选成人散发性激素耐药性肾病综合征(SRNS)与激素敏感性肾病综合征(SSNS)患者间差异表达片段,获取与SRNS激素耐药相关的基因,为认识和阐明SRNS激素耐药的分子机制奠定基础.方法:应用mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术筛选SRNS与SSNS患者外周血单个核细胞(PBMC)差异表达片段.将差异片段测序后与Genbank中人类基因序列进行同源分析.用RT-PCR验证差异片段排除假阳性.结果:获得6条SRNS与SSNS间差异片段,与Genbank中两个LOC基因、MACROD2、MAML2、NCK2和TCP1基因的部分序列高度相似.RT-PCR证实筛选的差异片段非假阳性扩增片段.结论:SRNS与SSNS间存在差异基因.该实验发现的差异基因有望成为SRNS激素耐药机制研究的新方向.     

二次包埋法手工制作病理学教学组织芯片

目的探讨手工制作教学组织芯片方法的可行性。方法利用组织芯片制备系统,通过二次包埋法,手工制作病理教学组织芯片,经HE染色,光镜下检测组织芯片制作质量。采用四川省病理技术专业委员会对石蜡切片HE制片质量评定得分标准对切片进行评分,并与传统教学组织切片比较。结果组织微阵列(TMA)蜡块中的组织芯点排列整齐,与受体蜡块融合紧密;组织芯片切片基本完整,厚薄均匀,经HE染色后组织形态可利用率为94%～100%,切片质量评分优秀率79%,良好率10%。二次包埋法手工制作的教学组织芯2片与传统组织切片制作方法制作的教学组织切片质量无明显差异性(χ=3.073,P0.05)。结论二次包埋法手工制作教学组织芯片方法简便易行,经济实用低消耗,具有高效快速染色均一性好、自身内对照和可比性强的特点,可在病理教学中推广应用。     

50例大肠癌组织中Survivin及其剪接变异体表达的实验研究

目的：探讨大肠癌组织中Survivin及其剪接变异体Survivin—△Ex3、Survi—vin-2BmRNA在大肠癌组织的表达规律。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测50例（高分化20例,中低分化30例）大肠癌组织标本中Survivin及其剪接变异体Survivin—△Ex3、Survivin-2B mRNA表达。结果：Survivin、Survivin-△Ex3及Survivin-2BmRNA在大肠癌中表达阳性率分别为70．0％、34．0％、26．0％,大肠癌高分化组和中低分化组SurvivinmRNA阳性表达率有显著差异;Survivin-△Ex3mRNA阳性表达率有上升趋势,Survivin-2B mRNA阳性表达率有下降趋势。50例大肠癌组织中表达Survivin—△Ex3和（或）Survivin-2B者均有Survivin表达。结论：提示Survivin在大肠癌的发展过程中具有重要作用;Survivin及其剪接变异体Survivin—△Ex3具有抗凋亡作用;Survivin-2B促凋亡,具有保护作用;Survivin基因有望作为大肠癌生物治疗的一个良好分子靶点。