细胞周期调节因子在原发和复发鼻咽癌的表达

【目的】探讨细胞周期调节因子在鼻咽癌复发中的作用。【方法】采用LsAB法同时检测69例患者原发和复发鼻咽癌组织中p53、MDM2、p21ras和p21WAF1蛋白的表达。【结果】复发癌与原发癌相比阳性表达率方面,p53蛋白(78%和80%)或MDM2蛋白(84%和83%)很相近,p21ras蛋白(73%和93%)或p21WAF1蛋白(52%和84%)明显下降;高表达率方面,p53蛋白(42%和51%)很相近,MDM2蛋白(57%和32%)明显升高,p21ras蛋白(16%和65%)或p21WAF1蛋白(17%和46%)明显下降。其中,MDM2蛋白表达水平在复发癌明显升高主要见于复发间期<34个月患者组（P<0.05),p21ras蛋白和p21WAF1蛋白表达水平在复发癌明显下降见于复发间期<34个月和≥34个月患者组（均<0.02以下)。【结论】原发鼻咽癌临床治愈后,p53蛋白和MDM2蛋白过度表达以及p21WAF1蛋白低表达或不表达可能仍然对鼻咽癌的复发起重要作用;MDM2蛋白表达水平显著升高和p21WAF1蛋白表达水平显著下降可能进一步加促鼻咽癌的复发过程。     

细胞周期凋节因子在原发和复发鼻咽癌的表达

[目的]探讨细胞周期调节因子在鼻咽癌复发中的作用。[方法]采用LsAB法同时检测69例患者原发和复发鼻咽癌组织中p53、MDM2、p21^ras和p21^WAF1蛋白的表达。[结果]复发癌与原发癌相比：阳性表达率方面,p53蛋白（78％和80％）或MDM2蛋白（84％或83％）很相近,p21^ras蛋白（73％和93％）或p21^WAF1蛋白（52％和84％）明显下降;高表达率方面,p53蛋白（42％和51％）很相近,MDM2蛋白（57％和32％）明显升高,p21^ras蛋白（16％和65％）或p21^WAF1蛋白（17％和46％）明显下降。其中,MDM2蛋白表达在复发癌明显升高主要见于复发间期＜34个月患者组（P＜0.05）,p21^ras蛋白和p21^WAF1蛋白表达水平在复发癌明显下降见于复发间期＜34个月和≥34个月患者组（均＜0.02以下）。[结论]原发鼻咽癌临床治愈后,p53蛋白和MDM2蛋白过度表达以及p21^WAF1蛋白低表达或不表达可能仍然对鼻咽癌的复发起重要作用;MDM2蛋白表达水平显著升高和p21^WAF1蛋白表达水平显著下降可能进一步加促鼻咽癌的复发过程。     

胃癌7号染色体长臂的杂合性缺失分析

目的:检测胃癌患者7号染色体长臂微卫星位点的杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),以初步确定7号染色体长臂上与胃癌相关基因连锁最密切的微卫星多态位点及LOH的临床意义.方法:在70例原发性胃癌中应用多重PCR技术扩增覆盖整个7号染色体长臂的9个微卫星位点(平均遗传距离为10cm),聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,用GeneScan、Genotyper软件进行分析.结果:9个微卫星位点的LOH均可发生于原发性胃癌,总的LOH频率为34.3%(24/70),其中D7S486和D7S798位点的LOH频率较高,分别为24.0%(12/50)和19.2%(5/26);总的LOH频率随临床分期而显著增高(P=0.046),D7S486位点的LOH频率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(P=0.015).结论:在7号染色体长臂D7S486和D7S798位点附近,可能存在与胃癌发展相关的抑癌基因.     

肺癌患者外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定

目的 探索体外扩增成熟树突状细胞(dendritic cell，DC)的方法，并进一步鉴定Dc的形态及表型，为开展肿瘤临床生物治疗奠定基础。方法 取肺癌患者外周血，经淋巴细胞分离液分离得到DC前体细胞，加入生长因子DCGF诱导DC生成，并加入自体肿瘤相关抗原刺激。收集细胞用透射电镜观察，并用流式细胞仪测定细胞表型。结果 应用该法扩增细胞可以得到大量成熟DC。电镜观察DC具有典型的形态。流式细胞仪细胞表型测定CD80为81．8％，HLA—DR为98．3％，CD86为69．8%，CDla为19．7％，CD14为66．9．1％，CD80和HLA-DR较未成熟DC的表达明显增加。结论 肺癌患者外周血体外培养可成功地获得成熟的DC，进一步为肿瘤临床生物治疗奠定了基础。     

p53 c-erbB-2 VEGF蛋白表达对非小细胞肺癌辅助化疗的临床预测

目的:探讨p53、c-erbB-2、VEGF蛋白表达对非小细胞肺癌预后和辅助化疗的临床预测作用。方法:应用免疫组化LSAB方法检测18例根治术后行含铂类辅助化疗的Ⅲa期非小细胞肺癌石蜡切片中p53、c-erbB-2、VEGF蛋白的表达情况,选同期单独手术的15例Ⅲa期患者作对照,分析三项指标在单纯手术组和术后化疗组中的表达以及联合检测三项指标对预后和辅助化疗的预测作用。结果:1)p53、c-erbB-2蛋白表达阳性率分别为54.72%和47.17%,两组中阳性者和阴性者的生存率差异具有显著性(P<0.05)。2)VEGF蛋白表达阳性率54.72%,在单纯手术组中阳性者和阴性者生存率的差异具有显著性(P<0.05),在术后化疗组中二者的差异无显著性(P>0.05)。3)在单纯手术组中,将p53、c-erbB-2、VEGF3项指标分为3项全阳性、3项全阴性、3项中任1～2项阳性3组,3组生存率的差异具有显著性(P<0.05)。4)在术后化疗组中,将p53、c-erbB-2两项指标分为2项全阳性、2项全阴性、其中任1项阳性3组,3组生存率的差异具有显著性(P<0.05)。5)COX多因素分析,提示组织学类型、p53、c-erbB-2是影响术后化疗效果的独立指标。结论:p53、c-erbB-2、VEGF蛋白表达是预后较差的指标之一,预测p53、c-erbB-2蛋白表达阳性者较阴性者对化疗不敏感,将p53、c-erbB-2、VEGF三项指标以及p5     

细胞周期的调控与肿瘤的发生

细胞周期相关基因及产物组成复杂的分子网络,调控着细胞周期的演进,确保细胞有序地增生与凋亡.当调控细胞周期的分子网络成员发生异常改变时,细胞周期失控,导致细胞不协调地增生,DNA受损等异常细胞不能凋亡,肿瘤发生成为可能.由此可见,细胞周期的失控和肿瘤的发生紧密关联.本文就细胞周期的调控及肿瘤发生两方面作一概述.1 细胞周期的调控已有研究显示,细胞周期主要受控于下述三个系统.1.1 细胞周期因子和细胞周期因子依赖性激酶复合物(cyclins/CDKs).正常细胞由cyclins和CDKs所形成的复合物     

鼻咽癌p53 p21 WAF1和MDM2蛋白异常表达的临床意义

目的：探讨p53、p21^WAF1、MDM2蛋白在原发鼻咽癌（NPC）异常表达的临床意义。方法：采用LSAB法检测69例原发NPC组织中p53、p21^WAF1和MDM2蛋白的表达状况。结果：1）p53、p21^WAF1和MDM2蛋白在原发NPC组织的阳性表达率分别为79．7％、84．1％、和82．6％；高表达率分别为50．7％、46．4％和31．9％。2）p53蛋白的高表达率随TNM分期的升高而增多，P＝0．042。3）p53或MDM2蛋白高表达者的复发间期显著短于相应蛋白低表达／阴性者，分别P＝0．038和P＝0．002。4）p53和MDM2蛋白同时高表达者、MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，分别P＜0．001；p21^WAF1蛋白高表达同时p53蛋白低表达／阴性者、p53和MDM2蛋白同时低表达／阴性者的复发间期显著长于对照组，分别P＝0．002和P＝0．014。5）p53和MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，P＜0．001；p53和MDM2蛋白低表达阴性同时p21^WAF1蛋白高表达者的复发间期明显长于对照组，P＝0．002。结论：p53或MDM2蛋白高表达提示有促进NPC复发的作用，p21^WAF1蛋白高表达提示有抑制NPC复发的作用。单独检测p53或MDM2蛋白在原发NPC组织的表达情况可以和为预测NPC复发倾向和临床预后的参考指标；如同时检测p53、MDM2和p21^WAF1蛋白的两项或三项指标，预测意义更理想。     

β-catenin/Tcf复合体、cyclinD1、c-myc在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨Wnt/β-catenin通路中β-catenin/Tcf复合体和下游主要靶基因cyclinD1、c-myc在不同分化程度鼻咽癌中的表达,进而阐明Wnt/β-catenin通路在鼻咽癌分化中的作用。方法转染野生型和突变型Tcf荧光素酶报告质粒,检测β-catenin/Tcf复合体在高低分化鼻咽癌细胞株中的含量;采用免疫组化方法检测79例不同分化类型的鼻咽癌组织中cyclinD1、c-myc的表达。结果通过检测转染后荧光素酶活性发现β-catenin/Tcf复合体在低分化鼻咽癌细胞株（CNE-2和HONE-1）中的表达是高分化鼻咽癌细胞株（CNE-1）的80.12-123.6倍。在角化性鳞癌与分化型非角化癌、分化型非角化癌与未分化型非角化癌中,cyclinDl表达有统计学差异（均P〈0.05）。c-myc的表达在未分化型非角化癌和分化型非角化癌之间比较,同样有统计学差异（P〈0.01）。结论低分化鼻咽癌细胞比高分化鼻咽癌细胞有更高水平的核内β-catenin/Tcf复合体c、yclinD1和c-myc的表达,说明前者的Wnt/β-catenin通路比后者明显地处于更高的活化状态中,提示Wnt/β-catenin通路可能在抑制鼻咽癌细胞的分化中起重要作用。