精子DNA碎片对IVF-ET/ICSI患者妊娠结局的影响及其机制

目的 探讨精子DNA碎片对IVF-ET/ICSI患者妊娠结局的影响及其产生机制。方法 选取在生殖医学中心行IVF-ET/ICSI助孕的61周期不孕不育症夫妇,根据精子DFI值分别纳入对照组(DFI<25%,n=35)和观察组(DFI≥25%,n=26)。收集取卵(OPU)日精液标本,行精液常规分析、Western Blot检测精子Bcl-2及Caspase-3表达水平。分析精子DFI与精液常规参数、Bcl-2及Caspase-3表达的相关性,观察两组IVF-ET/ICSI妊娠结局。结果 两组优化处理前精子浓度、优化处理后精液参数(浓度、活力及PR)、2PN受精率、2PN卵裂率及囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,观察组优化处理前精子活力、PR、Bcl-2均下降、Caspase-3上升,差异有统计学意义(P<0.05);观察组可移植胚胎率、优质胚胎率、着床率、临床妊娠率、分娩率及活产率均下降,早期流产率上升,差异有统计学意义(P<0.05)。精子DFI和优化处理前精子活力、Bcl-2表达均呈负相关(分别r=-0.285、-0.672,P&l...     

GyrB基因在诺卡菌菌种鉴定中的应用研究

目的 分析研究gyrB基因对于诺卡菌种水平的鉴定能力。方法 采用特异性引物对14种41株诺卡菌的gyrB基因进行扩增,并对其产物进行测序。从GenBank数据库中下载21株诺卡菌gyrB基因序列,对序列用DNAStar软件计算其相似性。利用Mega 6.06软件,采用邻接法和最大似然法构建诺卡菌菌种系统发育进化树。结果 以gyrB基因构建的系统发育进化树中,不同诺卡菌种能准确地分离成独立的分支,且亲缘关系较近的近缘种也能得到有效分离。诺卡菌种gyrB基因种内相似性为94.2%~100%,种间相似性约为79.2%~97.6%,平均相似性为86.9%。结论 gyrB基因序列分析是一种快速、准确、特异性较高的鉴定方法,能将诺卡菌属的鉴定至种的水平,对于鉴定诺卡菌属近缘种gyrB基因比16S rDNA更具优越性。     

16S rDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的价值研究

目的评价16S rDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的应用价值。方法对 13种49株诺卡菌(43株标准株和6株临床株)16S rDNA序列片段进行PCR扩增,将扩增片段进行纯化后测序,从GenBank上下载32株诺卡菌(包括星形诺卡菌,少食诺卡菌,短链诺卡菌等)及3株棒状杆菌(Corynebacterium,C.),3株弗兰克氏菌属(Frankia,F.),3株分支杆菌(Mycobacterium,M.),3株链霉菌(Streptomyces,S.)的16S rDNA序列。对所测得的诺卡菌序列及GenBank所报道的诺卡菌序列用DNASTAR程序分析处理,计算种内及种间相似性,用Mega6.06构建诺卡菌菌种系统进化树。结果在81条受试诺卡菌16S rDNA序列中,16S rDNA能将诺卡菌大致可分为11群,除了不能将亚种分离外,诺卡菌其他种属均能得到很好的分离。诺卡菌16S rDNA种内及亚种内相似性为99.1% ~ 100%;种间相似性在95.7% ~ 98.8%之间。结论16S rDNA序列分析是一种快速,简单,特异性较好的诺卡菌菌种鉴定方法,能将诺卡菌鉴定至种的水平。     

16S rDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的价值研究北大核心CSCD

目的 评价16SrDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的应用价值。方法 对13种49株诺卡菌（43株标准株和6株临床株）16SrDNA序列片段进行PCR扩增,将扩增片段进行纯化后测序,从GenBank上下载32株诺卡菌（包括星形诺卡菌,少食诺卡菌,短链诺卡菌等）及3株棒状杆菌（Corynebacterium,C.）,3株弗兰克氏菌属（Frankia,F.）,3株分支杆菌（Mycobacterium,M.）,3株链霉菌（Streptomyces,S.）的16SrDNA序列。对所测得的诺卡菌序列及GenBank所报道的诺卡菌序列用DNASTAR程序分析处理,计算种内及种间相似性,用Mega6.06构建诺卡菌菌种系统进化树。结果 在81条受试诺卡菌16SrDNA序列中,16SrDNA能将诺卡菌大致可分为11群,除了不能将亚种分离外,诺卡菌其他种属均能得到很好的分离。诺卡菌16SrDNA种内及亚种内相似性为99.1%~100%;种间相似性在95.7%~98.8%之间。结论 16SrDNA序列分析是一种快速,简单,特异性较好的诺卡菌菌种鉴定方法,能将诺卡菌鉴定至种的水平。