基于PCR-RFLP及Sanger测序法检测抗高血压药物相关基因CACNA1C多态性

目的:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和Sanger测序法针对抗高血压药物相关基因CACNA1C rs2239128进行基因分型,对比并验证2种检测方法的一致性。方法:样本来自2018年6月-2019年7月于吉林市中心医院特需医疗中心住院的高血压患者和体检中心非高血压人群共203例。采用PCR-RFLP法和Sanger测序法检测纳入对象的CACNA1C rs2239128基因型分布情况。比较2种方法的检测结果。结果:PCR-RFLP法CACNA1C rs2239128位点CC、CT、TT基因型频率分别为45.82%、44.33%、9.85%;T、C等位基因频率分别为32.02%和67.98%。Sanger测序法CACNA1C rs2239128位点CC、CT、TT基因型频率分别为46.04%、44.44%、9.52%;T、C等位基因频率分别为31.74%和68.26%。2种方法所得结果无统计学差异。结论:PCR-RFLP与Sange测序法所测得基因分型结果具有较高的一致性。     

应对“老龄社会”——老年人家庭护理要点

老龄社会是指一个地区的老年人口占总人口达到或超过一定的比例的人口结构模型。根据我国的统计数据再结合联合国的传统标准：一个地区60岁以上老人达到总人口的10％,新标准是65岁老人占总人口的7％,即该地区视为进入老龄化社会,那么我国早在2000年就已经步人了老龄化社会,人口老龄化己成为21世纪不可逆转的世界性趋势,也是社会进步的表现。整个社会对老年人护理也越来越重视。护理技术应该随着时代的进步去适应这个变化,     

基于双重PCR技术的鹿茸及其伪品DNA指纹特征和鉴定

目的：分析鹿茸线粒体细胞色素b （Cytb）和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因特异性,建立双重PCR技术鉴别鹿茸真伪的分子指纹特征。方法：利用碱变性法提取梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸和新西兰鹿茸的基因组DNA,应用引物设计软件Premier 5.0针对Cytb和COⅠ分别设计特异性引物（分别为Cytb1、2和COⅠ1、2、3）,采用单一及双重引物分别进行PCR扩增,筛选特异性强的引物,确定最佳PCR反应条件。结果：采用碱变性法提取的鹿茸基因组DNA片段长度为23 000bp,DNA纯度即A （260）/A （280）为1.80±0.02;应用单一引物进行PCR扩增无法鉴定鹿茸的真伪,而引物Cytb 1和COⅠ1组合后,解链温度为58℃时,梅花鹿茸（吉林、安徽）、马鹿茸均能扩增出395和525bp大小的2个片段,而驯鹿茸和新西兰鹿茸均未能扩增出相应片段;采用该提取方法及最优化的PCR反应条件,对市售样品进行检测,检测结果与实际情况完全一致。结论：双重PCR技术可从分子水平鉴别鹿茸的真伪,该方法特异性高、实用性强,且简便快捷,在鹿茸真伪鉴别方面具有较高的应用价值。