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目的构建人跨膜蛋白39A基因(TMEM39A)的原核表达载体,优化表达条件并获得可溶性表达的TMEM39A。方法以HEK293细胞的总RNA为模板,反转录PCR扩增TMEM39A,构建其原核表达载体pGEX-6P-1-TMEM39A,并在不同温度、IPTG浓度、A_(600nm)值及时间条件进行诱导表达,然后利用上述获得的最佳诱导条件进行大量表达,分析其可溶性和抗原性。结果重组表达载体pGEX-6P-1-TMEM39A与GenBank中的TMEM39A(登录号:BC021277.2)的核苷酸序列同源性为99.9%,氨基酸序列同源性为100%。重组蛋白GST-TMEM39A在69和60 ku处出现两条特异性条带,采用单因素方法对不同温度、IPTG浓度、A_(600nm)值及时间进行分析得出GST-TMEM39A的最佳诱导条件为25℃、A_(600nm)值为0.6~0.8、IPTG浓度为0.1 mmol/L诱导9 h;在此基础上进行大量表达,并以可溶性形式获得了TMEM39A与GST蛋白的融合表达。结论成功构建了TMEM39A的原核表达载体,确定了GST-TMEM39A的最佳表达条件并实现其的可溶性表达,为后续纯化TMEM39A、制备抗体开展功能研究奠定物质基础,并为深入探讨TMEM39A与许多疾病或病毒的关系提供科学依据。 相似文献
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李生军 《中华临床医学杂志》2005,6(8):132-133
随着我国基本医疗保险制度改革的不断深化,有关基本医疗保险用药管理的政策也越趋完善。国家有关医疗保险用药管理办法的出台和《国家基本医疗保险药品目录》的公布,在政策上、操作上各地进一步细化医疗保险药品给付政策,以及进一步完善日常管理措施奠定基础。然而,由于各种因素所致,与医疗保险制度改革息息相关的医疗卫生体制改革及药品生产流通方面的政策并未完全同步到位。 相似文献
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李生军 《中国现代临床医学》2008,7(9)
医疗保险基金风险可分为筹资风险、支付风险和投资风险,其中,基金支付风险是决定医疗保险基金平衡最主要的影响因素,是三大风险中最为重要、最难控制的风险。 相似文献
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病毒样颗粒是由结构蛋白组装而成,形态结构与天然病毒高度相似的一种多聚蛋白纳米结构,但不包含任何遗传物质,因此是一种理想的疫苗形式.大肠杆菌表达系统因具有良好的安全性、生产周期短、易于放大培养等优点,被广泛应用于基因工程药物的生产,在病毒样颗粒疫苗应用上具有良好前景.本文综述了利用大肠杆菌系统表达的病毒样颗粒及其组装、表... 相似文献
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李生军 《中华临床医学杂志》2008,9(2):106-107
医保改革经过医保经办机构、定点医疗机构、参保人员的共同努力,逐步走向成熟,现仍存在一些问题需要进一步得到完善和解决。 相似文献
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目的观察胶原酶联合臭氧治疗腰椎间盘突出症的疗效,总结护理要点。方法对200例不同程度的腰椎间盘突出症患者进行椎旁穿刺,注入胶原酶及臭氧联合溶解治疗,行心理护理、术前指导、术中配合、术后护理及出院指导。术后结合影像学检查和临床症状缓解情况评估疗效。结果 200例腰椎间盘突出症患者行胶原酶联合臭氧治疗,术后平均随访时间16个月,有效率为93.4%,患者术前、术后心理健康、平稳,术后无并发症发生,病情好转出院。结论胶原酶联合臭氧治疗腰椎间盘突出症,方法简便、安全有效,正确的护理措施能提高手术疗效。 相似文献
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