BMSCs分泌的miR-125b通过外泌体途径对体外成骨分化的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)分泌的miR-125b是否通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。方法 提取BMSCs原代,通过流式细胞仪进行其表面抗原(CD45、CD90)的鉴定来确定纯度,分别进行成骨诱导,茜素红染色检测成骨效果;成脂诱导,油红染色检测成脂效果。检测P3代上清液外泌体标志性蛋白CD9、CD63的表达量,电镜下观察确定外泌体提取成功。成骨诱导后的第0、7、14、21天进行qRT-PCR测定外泌体内miR-125b及细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、Runx2的mRNA的表达量。BMSCs侵染miR-125b模拟物及模拟物阴性对照剂,miR-125b抑制剂及其抑制物阴性对照剂,转染后验证转染效率。转染后五组(前四组+生理盐水空白对照组)细胞上清液外泌体提取,提取后与BMSCs共培养,继续成骨诱导48 h, qPCR及蛋白质免疫印迹(Western Blot)分别测定BMSCs细胞ALP、Runx2、miR-125b的表达量。结果 (1)成功分离的BMSCs向成...     

坏死性凋亡与骨质疏松症机制研究

骨质疏松症（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ,ＯＰ）是一种与增龄相关的全身代谢性骨骼疾病,典型特征为骨量减少伴骨组织微结构破坏, 使骨的脆性增加、易发生骨折等危险,对患者的生活质量产生严重的影响。坏死性凋亡（ｎｅｃｒｏｐｔｏｓｉｓ）是一种非半胱天冬酶 （ｃａｓｐａｓｅ）依赖性的程序性细胞死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）形式,具有与坏死相似的形态学特征,其发生机制与受体相 互作用蛋白激酶１（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ １,ＲＩＰＫ１）、受体相互作用蛋白激酶３（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ３, ＲＩＰＫ３）及下游的混合谱系激酶结构域样蛋白（ｍｉｘｅｄ ｌｉｎｅａｇｅ ｋｉｎａｓｅ ｄｏｍａｉｎ?ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＬＫＬ）的级联激活密切相关。随着对 ＯＰ 发病机制探索的不断深入,已有研究证实坏死性凋亡可通过影响成骨细胞、破骨细胞和骨细胞的活性和功能等生物学过 程,参与多种原因导致的ＯＰ 的发生和发展。本文着重阐述坏死性凋亡在ＯＰ 中的研究进展,旨在为防治ＯＰ 提供新的见解。     

基础到临床：miRNA调控Wnt信号通路影响骨质疏松症的现状

骨质疏松症(OP)是由于骨量减少及骨微观结构破坏引起的一类全球常见的代谢性骨病。微小RNA(miRNA)是一类不编码蛋白质的内源性小RNA分子，可以通过多种机制影响其他基因的表达。Wnt信号通路是一条在生物进化中高度保守的通路，影响着干细胞更新、细胞的增殖与分化等。miRNA可通过调控Wnt信号通路进一步调节整个成骨细胞谱系的定向分化，在OP发病及治疗过程中起关键作用。文章详细分析miRNA通过Wnt信号通路对OP的调节机制，深入了解miRNA在OP中的作用，针对其临床转化运用作出展望，以求进一步探索miRNA通过调控Wnt信号通路治疗OP的可行性。文章主要就多种miRNA通过Wnt信号通路对OP的影响的分子机制进行综述。