低分子肝素生物活性测定方法的比较研究

目的:对低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)生物活性即抗活化10因子(抗-FXa)和抗活化2因子(抗-FⅡa)测定的不同方法进行比较与研究,建立国家标准。方法:(1)比较量反应平行线与标准曲线2种分析方法在发色底物的分光光度法即利用发色底物对 FXa 或 FⅡa 特异的405 nm 显色反应测定抗-FXa 或抗-FⅡa 效价的差异。(2)比较发色底物的分光光度法与血液凝固法(观察兔全血或兔血浆的凝结时间)测定 LMWH 的抗凝血酶(抗-FⅡa)效价的异同。结果:量反应平行线法比标准曲线法测定结果可靠、准确、精确;发色底物分光光度法与血液凝固法的实验结果相似,其差异无统计学意义(P>0.05),并且具有良好相关性(r=0.997 P<0.01和 r=0.976 P<0.01)。结论:对 LMWH 的抗-FXa 和抗-FⅡa 效价测定采用发色底物的分光光度法;并以量反应平行线法进行分析。     

人胰岛素及其类似物国家标准增修订概况

本文介绍了《中国药典》2020年版（三部）人胰岛素及其类似物国家标准增修订概况。包括标准起草过程的基本原则和技术考量，并就关键项目在中国药典、欧洲药典和美国药典的协调性方面进行了分析，旨在为本领域内相关研发和质控人员更好地理解和使用人胰岛素及其类似物药典标准提供参考。     

两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较

目的 比较两种不同剂型的重组人生长激素在体生物活性.方法 以摘除脑垂体的雄性大鼠为动物模型,rhGH国家标准品为对照,应用量反应平行线原理,6 d总量的高剂量10.7 IU/k g、低剂量2.7 IU/kg,按体重增加法和胫骨骨骺板增宽法分别测定rhGH注射液(T1～T4)和注射用rhGH(T5～T11)的生物活性,并比较两种剂型的比活性.结果 rhGH注射液比活性比注射用rhGH的比活性高(P＜0.01).结论 rhGH注射液比注射用rhGH的比活性高.     

两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较

目的比较两种不同剂型的重组人生长激素在体生物活性。方法以摘除脑垂体的雄性大鼠为动物模型,rhGH国家标准品为对照,应用量反应平行线原理,6 d总量的高剂量10.7 IU/kg、低剂量2.7 IU/kg,按体重增加法和胫骨骨骺板增宽法分别测定rhGH注射液(T1~T4)和注射用rhGH(T5~T11)的生物活性,并比较两种剂型的比活性。结果rhGH注射液比活性比注射用rhGH的比活性高(P<0.01)。结论rhGH注射液比注射用rhGH的比活性高。     

脊髓肽MP-2的Fmoc法固相合成、HPLC纯化及其活性检测

目的：用固相法合成脊髓肽MP02并验证其生物活性。方法：采用Fmoc固相法对脊髓肽MP02进行仪器自动合成，通过正交实验对反应条件进行了优化，肽-树脂复合物酸裂解后获得小肽粗品。用高效液相色谱法对所得粗品纯化制备，并利用LC—Ms色谱仪确定目标产物，最后对纯品的生物活性进行检测。结果：通过正交实验优化PSSM08多肽合成仪合成MP02的反应条件，粗品得率达到82％，HPLC峰归一化法检测纯度为62．9％，中压柱制备后纯品纯度达到96．7％。纯品对S180肿瘤细胞进行抑瘤试验，证明MP-20．25mg&#183;kg-1对S180有明显抑制作用，抑瘤率50．4％，且毒性低，不影响动物的发育生长。结论：合成实验证明，Fmoc固相合成法合成脊髓肽MP-2，操作条件温和且粗品得率较高，质谱检定主峰为目标峰后中压柱进行制备，分离操作简单，可以进行小批量生产；活性试验证明MP-2具有抑制肿瘤S180生长的效果，为进一步进行药效学验证提供了初探基础。     

时间分辨荧光免疫分析法测定人胰岛素生物学活性

目的:利用时间分辨荧光免疫分析系统建立人胰岛素基于转基因细胞的生物学活性检测方法。方法:以CHO-INSRB1284转基因细胞2.5×10~5个·mL^-1作为靶细胞,以400 pmol·mL^-1作为初始浓度对人胰岛素进行3倍系列稀释,随后药物与靶细胞作用20 min,通过时间分辨荧光免疫分析系统,进行生物学活性检测,对该方法进行关键参数的优化,并依据2020年版《中华人民共和国药典》四部通则9401和ICH指导原则Q2(R1)、Q6B进行验证。结果:人胰岛素在本方法中存在良好的量效关系,符合四参数方程：y=(A-D)/[1+(x/C)B]+D。本方法专属性强,5个效价水平(64%、80%、100%、125%及156%)的相对生物学活性(n=8)的几何平均值分别为(55.8±2.06)%、(82.1±5.52)%、(94.4±5.46)%、(121.4±5.94)%、(154.4±8.37)%,相对偏倚及其90%置信区间分别为-12.8%(-16.3%,-9.9%)、2.6%(-4.4%,9.5%)、-5.6%(-11.2%,-0.3%)、-2...     

海狗油w-3脂肪酸的研究进展及作用机制

70年代丹麦医生J．Dyerberg在格陵兰岛进行的流行病学研究中，比较了格陵兰岛爱斯基摩人和丹麦爱斯基摩人的情况，发现前者蛋白质和胆固醇摄入量高于后者两倍，脂肪摄入量相同，但患动脉粥样硬化、血栓等心脑血管疾病、癌症、免疫性疾病很少，其血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平低于后者，血清高密度脂蛋白(HDL)水平高于后者，比较后发现是长期食用海狗肉与油及鱼等海洋动物的结果。经过近30年的科学研究已证明海狗皮下脂     

血清胸腺因子对放化疗保护作用的实验研究

目的:观察血清胸腺因子在对抗辐射和抗化疗副作用方面的作用。方法:抗辐射实验:KM小鼠,共6组,除空白组外,其它小鼠接受钴(Co)60照射后,模型组皮下(S.C.)注射0.1 ml生理盐水,FTS低、中、高剂量组分别S.C.注射FTS 0.025、0.25、2.5mg.kg-1,每天一次,连续7 d;阳性药组于实验d 1一次性口服灌胃尼尔雌醇2.5 mg.kg-1,检测免疫活性;对分别接受Co60的600或700拉德辐射小鼠,记录30 d内存活率。抗化疗副作用实验:对肝癌H22细胞的荷瘤小鼠,当日腹腔注射环磷酰胺100mg.kg-1,同时各组给药,每天一次,连续19 d,记录20 d内小鼠存活率。结果:小鼠经辐射后,与模型组比较,FTS各剂量组白细胞总数、对碳粒的吞噬速率和吞噬指数、胸腺系数显著提高(P<0.05);脾脏系数比尼尔雌醇组的脾脏系数略高(P>0.05);对700拉德的辐射小鼠,与模型组比,FTS 0.25 mg.kg-1组30 d内存活率显著增加(P<0.05)、平均存活天数明显延长(P<0.01),与阳性药组一致。荷瘤小鼠接受环磷酰胺化疗,皮下注射FTS给予荷瘤小鼠经化疗后的20 d内存活率增加。结论:血清胸腺因子具有抗辐射、抗化疗副作用,前景广阔。     

血清胸腺因子9肽对人结肠癌HT-29的抑瘤作用

目的：观察血清胸腺因子9肽对人结肠癌HT-29移植瘤的抑制作用。方法：裸鼠皮下接种人结肠癌HT-29细胞,瘤块生长至体积约100mm~3后,分为血清胸腺因子9肽高、中、低剂量组（分别为1.25、0.625、0312mg/kg）、环磷酰胺阳性对照组（30mg/kg）和生理盐水空白对照组,每组10只,血清胸腺因子9肽各剂量组和空白对照组裸鼠每天皮下给受试物1次,连续28d。阳性对照组腹腔注射给药,每周2次,连续4周。每周称量体质量、测量瘤块长径和短径2次。于末次给药后24h处死动物,称取体质量、测量瘤块长径和短径,计算体积后,剥离肿瘤称瘤质量,计算相对肿瘤增殖率和抑瘤率。实验重复3次。结果：血清胸腺因子9肽高、中、低剂量组相对肿瘤体积与空白对照组比较均显著减小（P〈0.01或P〈0.05）,其相对肿瘤增殖率分别为50%±20%、62%±20%和77%±35%;血清胸腺因子9肽高、中、低剂量组瘤质量与空白对照组比较均明显减轻（P均〈0.01）,抑瘤率分别为45%±3%、35%±1%、27%±3%;给药前后血清胸腺因子9肽各剂量组裸鼠体质量与空白对照组比较变化不显著（P〉0.05）。结论：血清胸腺因子9肽对人结肠癌HT-29移植瘤具有明显抑制作用。     

重组人生长激素体内生物活性测定中美药典方法对比研究

目的： 对重组人生长激素（rhGH）中国药典与美国药典的体内生物活性测定方法进行试验比较与梳理分析。方法： 按照《中国药典》2015年版四部通则1219和《美国药典》40版通则126的rhGH去垂体大鼠体内生物测定法,分别测定3批rhGH生物活性。结果与结论： 应用二种方法测定3批rhGH原料生物效价的结果相近。通过分析比较两种测定方法的结果及各个环节,可以得出结论,中国药典与美国药典的rhGH体内生物活性测定方法基本相同。