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目的:探讨凋亡:抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用。方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500nmol/L组,bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测)。②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1,于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数:(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。(3)计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmol/L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62.72%和67.43%。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P〈0.01),两药相互作用指数为0.708。锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%。流式细胞仪检测凋亡显示,与各对照组相比,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为43.6%和30.7%,两者联用凋亡率提高到58.6%(p〈0.01)。结论:①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达,并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。 相似文献
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目的 分析血清癌胚抗原(CEA)、D-二聚体(D-D)、清蛋白(ALB)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性,评估其诊断价值.方法 收集NSCLC患者92例,根据病理类型(鳞癌组、腺癌组)、临床分期(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期、Ⅳ期)、卡氏评分(KPS)(非依赖组:KPS 80~100分、半依赖组KPS:50~70分)进行分组,比较各组CEA、D-D、ALB、NLR的差异,并进行统计学分析.结果 NSCLC患者中,腺癌组血清CEA、D-D水平显著高于鳞癌组(P<0.05);Ⅳ期患者血清CEA、D-D、NLR水平显著高于Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期患者,ALB水平显著低于Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ期患者(P<0.05);半依赖组D-D、NLR水平显著高于非依赖组,ALB水平显著低于非依赖患者(P<0.05).Spearman相关显示NSCLC患者病理类型与CEA、D-D水平呈正相关(P<0.05);临床分期与CEA、D-D、NLR水平呈正相关,与ALB水平呈负相关(P<0.05);KPS评分与CEA、D-D、NLR的水平呈负相关,与ALB水平呈正相关(P<0.05).ROC曲线分析显示血清CEA+D-D联合检测较CEA、D-D单独检测对诊断NSCLC患者鳞/腺癌的灵敏度最高,依次为72.50%、58.80%、62.70%;血清CEA+D-D+NLR+ALB联合检测较CEA、D-D、ALB、NLR单独检测对评估NSCLC临床分期的灵敏度(依次为87.00%、68.10%、79.70%、82.60%、79.70%)及特异性(依次为78.30%、78.20%、52.00%、53.60%、69.60%)最高.D-D+NLR+ALB联合检测较D-D、ALB、NLR单独检测对评估身体功能状态的特异性最高,依次为84.50%、72.40%、44.10%、82.80%.结论 血清CEA、D-D、ALB、NLR与NSCLC患者病情密切相关,联合检测可用于患者病理类型、临床分期及身体功能状态的鉴别诊断. 相似文献
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Survivin反义寡核苷酸协同Taxol诱导肺癌细胞株凋亡 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的]研究Survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)单独或联合Taxol对肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达,细胞凋亡,生长抑制率的影响.[方法]Survivin ASODN经脂质体介导转染人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,用RT-PCR法、Western blot法检测Survivin表达;Survivin ASODN单独、联合Taxol作用NCI-H446细胞后,用MTT法检测细胞生长抑制率,台盼兰拒染实验检测细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算两药相互作用指数(CDI).[结果]Survivin ASODN转染NCI-H446细胞后,Survivin mRNA表达和蛋白表达明显下调,其中SurvivinASODN 500nM作用72h时Survivin mRNA抑制率达62.72%,效果最佳;Survivin ASODN单独或联合Taxol作用NCI-H446细胞后发现Survivin ASODN联合Taxol作用的效果明显优于两药单独应用(P<0.01).其联用时细胞凋亡率达73.3%,而单用时分别为43.6%和23.8%.其联用时细胞生长抑制率达80.1%,而单用时抑制率分别为50.4%和30.5%(P均<0.01).两药联用组细胞死亡率达69.9%,高于两药单用时的41.4%和24.8%(P均<0.01);CDI值为0.43,表明两药具有显著协同作用.[结论]Survivin ASODN能够抑制肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达并诱导肺癌细胞凋亡;Survivin ASODN能够增加Taxol的敏感性. 相似文献
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非小细胞肺癌外周血Lunx mRNA检测及其对微转移诊断和预后判断的意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达,探讨其诊断NSCLC微转移、评估预后和化疗疗效的价值。方法:荧光定量PCR法测定66例NSCLC患者和40例良性肺疾病患者外周血Lunx mRNA表达。肺癌组患者随访1~40个月,了解Lunx mRNA表达与生存期的关系,并对其中50例Ⅲ~Ⅳ期NSCLC患者化疗2周期后进行疗效评价以了解其与Lunx基因表达的关系。结果:肺癌患者外周血Lunx mRNA阳性率为57.6%,中位拷贝数为48 copies/ml;良性肺疾病中则无表达。Ⅲ、Ⅳ期肺癌患者外周血Lunx mRNA阳性率(59.3%,88.9%)均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(18.8%)(P<0.01),Lunx mRNA阳性表达的患者总体生存期明显低于阴性表达者(P<0.01),但其表达与化疗疗效则无明显关系(P>0.05)。结论:外周血Lunx mRNA表达对判断肺癌患者预后具有较大的价值。 相似文献
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纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值 总被引:21,自引:0,他引:21
目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标 相似文献
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纤维支气管镜诊治支气管异物24例临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨纤维支气管镜(纤支镜)在支气管异物诊断及治疗中的作用。方法:对24例经纤支镜确诊和治疗的支气管异物患者的临床资料进行回顾性分析。结果:主要临床表现为咳嗽、咳黄痰、发热、咯血、喘息,体格检查有呼吸音减低、吸气相干啰音及湿啰音;院外误诊为肺癌4例,肺炎4例,肺结核2例,支气管哮喘1例,结核性胸膜炎1例;右侧异物17例,左侧7例;动物性异物14例,植物性异物6例;均经纤支镜取出。结论:支气管异物临床上容易误诊,纤支镜在支气管异物的诊断和治疗中具有重要的意义。 相似文献
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目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)的血液系统改变。方法:20例以血液系统病变为首诊的SLE患,分析其临床表现、体征及外周血象、骨髓象改变。结果:20例患中贫血16例,白细胞减少10例,血小板减少12例,骨髓细胞学检查示:缺铁性贫血(IDA)2例,再生障碍性贫血(AA)1例,溶血性贫血(HA)3例,环形铁粒幼细胞性贫血1例,原发性血小板减少性紫癜(ITP)2例,余骨髓象为非特异性改变。结论:以血液系统改变为首发或突出症状的SLE患,早期临床症状不典型,故对于年轻女性,若伴有骨髓象示ITP、AIHA或血细胞减少而骨髓细胞形态无异常,应进行免疫学筛选及随访,警惕SLE可能。 相似文献