负压封闭引流联合前列地尔促进糖尿病足溃疡创面愈合的疗效和机制研究

目的探讨负压封闭引流联合前列地尔促进糖尿病足溃疡创面愈合的疗效及机制。 方法将广州市第一人民医院烧伤科2017年1月至2018年12月收治的43例采用负压封闭引流进行治疗的糖尿病足溃疡患者按随机数字表法分为观察组(n＝23)和对照组(n＝20),2组患者均进行负压封闭引流治疗,在此基础上观察组联合静脉滴注前列地尔。治疗前及治疗第7、14天,分别采集2组患者晨空腹静脉血3 mL;治疗第7、14天,采集患者引流袋中引流液5 mL,离心取上清液,移入已消毒的Eppendorf管中,密封,冻存于－80 ℃低温冰箱,并于患者更换负压材料时取部分肉芽组织,10%甲醛固定,石蜡切片。分别检测观察组及对照组患者治疗前,治疗第7、14天血液中降钙素原和血清白蛋白含量及治疗第7、14天引流液中的一氧化氮、血管内皮生长因子(VEGF)、肉芽组织晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及腐胺含量,数据比较采用t检验和χ²检验。 结果治疗前2组患者降钙素原和血清白蛋白含量比较差异无统计学意义(P值均大于0.05);治疗第7、14天,观察组降钙素原分别为(0.61±0.46)、(0.30±0.28) ng/mL,低于对照组(0.93±0.47)、(0.49±0.29) ng/mL,差异均有统计学意义(t＝－2.21、－2.15,P＝0.03、0.04);观察组血清白蛋白[(27.13±2.13)、(28.78±1.90) g/L],高于对照组[(25.48±2.66)、(25.48±2.66) g/L],差异均有统计学意义(t＝2.17、3.18,P＝0.04、<0.01)。观察组治疗第7、14天引流液中一氧化氮含量分别为(86.30±5.82)、(106.97±6.44) μmol/L,浓度高于对照组[(65.64±5.76)、(84.80±9.19) μmol/L],差异均有统计学意义(t＝11.67、9.25,P值均小于0.01);VEGF含量分别为(123.04±11.76)、(240.15±38.85) pg/mL,浓度高于对照组[(85.09±6.72)、(129.57±17.28) pg/mL],差异均有统计学意义(t＝12.72、11.74,P值均小于0.01);观察组治疗第7、14天,引流液中腐胺浓度为(0.63±0.08)、(0.22±0.08)mg/L,低于对照组[(0.81±0.09)、(0.41±0.08)mg/L],差异均有统计学意义(t＝－6.74、－12.15,P值均小于0.01);取材的肉芽组织中RAGE为37.1±6.76、17.17±5.54,表达低于对照组(52.94±8.72、38.00±5.69),差异均有统计学意义(t＝－6.90、－7.95,P值均小于0.05);观察组治疗的总有效率为95.70%,对照组为60.00%,比较差异有统计学意义(χ²＝9.00,P＝0.029)。 结论负压封闭引流联合前列地尔可以促进糖尿病足溃疡创面愈合,其机制与前列地尔促进血管内皮分泌一氧化氮、VEGF,加速创面腐胺清除,促进创面肉芽生长的同时抑制RAGE表达有关。     

严重电击伤并广泛肌肉坏死患者心肌酶谱、血钾、肾功的变化观察1例

我们收治1例严重电击伤并广泛肌肉坏死并于伤后6 d死亡的患者，其住院期间心肌酶谱明显增高，血钾及其它电解质基本正常，肾功能亦无特别改变，血细菌培养阴性。分析其死亡原因，基本排除肾衰和高钾血症，可能与坏死分解物吸收相关。     

手术清创对湿性坏死性糖尿病足引发进行性低蛋白血症影响

目的探讨手术清创对湿性坏死性糖尿病足引发进行性低蛋白血症的影响。方法整理2010年5月—2013年5月在本院就诊的30例湿性坏死性糖尿病足患者临床资料,对其手术时机、临床表现及血浆白蛋白、血红蛋白含量等实验室检查进行回顾性分析。结果患者入院后短时间内出现进行性低白蛋白血症和贫血,清创（包括截肢术）前后到低谷,3~5 d后开始稳步上升,其中术前第2天血白蛋白和血红蛋白水平与术前第9天比较有显著差异,术后第1天血白蛋白和血红蛋白水平与术后第9天比较有显著差异（P〈0.01）。结论湿性坏死性糖尿病足患者常伴有进行性低蛋白血症,而及时手术彻底清创是防止其进一步恶化的有效治疗。     

HaCaT细胞诱导兔骨髓间充质干细胞表达角蛋白的初步研究

目的:探讨在体外培养的条件下HaCaT细胞诱导兔骨髓间充质干细胞(MSCs)表达角蛋白的可能性。方法:体外分离培养MSCs,流式细胞术检测CD34、CD45和CD44蛋白的表达以鉴定MSCs细胞。传代后与HaCaT共培养。分别在共培养3、7天后,密度梯度离心法分离MSCs和HaCaT,免疫细胞化学方法检测角蛋白Pan-cytokeratin(Pan-CK)、CK19的表达。结果:流式细胞术检测体外培养的MSCs CD34、CD45阴性,CD44阳性,表明MSCs培养成功。MSCs与HaCaT共培养3天、7天后,免疫细胞化学检测结果显示Pan-CK和CK19均为阳性。共培养7天的MSCs Pan-CK阳性率明显高于共培养3天的MSCs[分别为(29.1±8.3)%、(13.5±3.7)%,t=13.35,P0.05],共培养7天的MSCs CK19阳性率与共培养3天的MSCs相比无统计学差异[分别为(3.3±0.8)%、(3.1±0.5)%,t=1.37,P0.05]。结论:与HaCaT细胞共培养可诱导兔骨髓间充质干细胞向表皮细胞及表皮干细胞分化。     

不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞（human skin fibroblasts,HSF）增殖、迁移、凋亡的影响。方法将体外HSF
分为腐胺组和对照组,以含腐胺浓度分别为0.5、1、5、10、50、100、500、1000 μg/ml完全培养基培养细胞设为腐胺组,不添加腐胺
设为对照组。经对照组及不同浓度腐胺组处理的HSF培养24 h后,再以四唑化合物电子耦联显色法（MTS法）测定细胞增殖能
力（用吸光度值表示）,Transwell迁移实验测定细胞的迁移能力,流式细胞技术（Flow Cytometry, FCM）Annexin V/PI标记法测
定细胞凋亡率。结果（1）细胞增殖能力（MTS）测定结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml 腐胺组HSF的吸光度值较对照组升高（P<
0.01）,并且1 μg/ml时达峰值（0.754±0.024）;500、1000 μg/ml腐胺组HSF吸光度值较对照组降低（P<0.01）;50、100 μg/ml腐胺
组HSF的吸光度值与对照组无明显差异（P>0.05）;（2）Transwell迁移实验结果显示,1 μg/ml腐胺组穿过微孔膜的细胞数目较对
照组显著增加（P<0.01）,且达到峰值309±21;50 μg/ml及以上浓度腐胺组HSF穿过微孔膜的数目较对照组减少（P<0.05）;0.5、
5、10 μg/ml腐胺组HSF穿过微孔膜的细胞数目与对照组比较无明显差异（P>0.05）;（3）流式细胞凋亡结果显示,0.5、1、5、10 μg/ml
腐胺组HSF凋亡率较对照组显著降低（P<0.05）,而且在1 μg/ml时细胞凋亡率达最低值（11.10±0.79）%;100 μg/ml及以上浓度
腐胺组细胞凋亡率较对照组显著升高（P<0.01）,而且随着浓度增加凋亡率逐渐升高;50 μg/ml腐胺组与对照组比较细胞凋亡率
无明显差异（P>0.05）。结论微量腐胺可维持细胞正常的迁移能力,显著提高HSF的细胞增殖能力,而较高浓度的腐胺能显著
抑制HSF迁移与增殖,并诱导细胞发生凋亡,提示不同浓度的腐胺会对创面愈合起到完全不同的作用。
     

成功救治1例50% TBSA新生儿特重烧伤所获启示

1病例患儿,男性,胎龄39周,自然分娩,体重3300 g。出生后第三天因洗澡时不慎烫伤胸腹部、背部、臀部、会阴、双下肢等处,总体表面积(TBSA)50%,深Ⅱ度。2009年11月12日由外地转来,经由两个妇儿医疗中心后转入本科。入院时患儿烦躁不安,四肢湿冷。生命体征如下:T:     

增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c—fos mRNA、c-jun mRNA及MMP1、TIMP1表达的研究

目的 探讨增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA、c-jun mRNA及基质金属蛋白酶MMP1、基质金属蛋白酶抑制剂TIMP1与瘢痕增生之间的关系.方法 临床上收集32例深度烧伤后瘢痕标本,其中烧伤后4～10个月增生性瘢痕标本18例,烧伤后2～4年内萎缩性瘢痕标本14例.采用RT-PCR方法对上述瘢痕组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA进行半定量检测;采用免疫组化方法检测基质金属蛋白酶1（MMP1）、基质金属蛋白酶1抑制剂（TIMP1）表达情况,并利用图象分析方法进行结果分析.结果 增生性瘢痕中c-fos mRNA表达增高,与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA表达有差异（P＜0.01）;c-jun mRNA表达在两组中表达无差异（P＞0.05）.基质金属蛋白酶1抑制剂（TIMP1）在增生性瘢痕中TIMP1表达减少,统计学上低于萎缩性瘢痕TIMP1表达（P＜0.01）;基质金属蛋白酶1（MMP1）在增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中表达无差异（P＞0.05）.结论 增生性瘢痕中c-fos基因mRNA表达增高,有利于刺激MMP1对细胞外基质（ECM）的降解,对减轻瘢痕的增生有一定作用;增生性瘢痕中TIMP1表达降低,通过减少对MMP1的拮抗作用而达到减轻瘢痕增生的作用.     

NT-3基因修饰骨髓间充质干细胞移植对七氟醚诱导老龄小鼠认知功能障碍的保护作用

目的 探究NT-3基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对七氟醚诱导老龄小鼠认知功能障碍的保护作用及机制。方法 分离培养小鼠BMSCs,病毒转染建立NT-3基因修饰的BMSCs, Western blot检测BMSCs NT-3蛋白表达,CCK-8检测BMSCs增殖能力,免疫荧光染色方法检测BMSCs神经元标志物NeuN表达。将40只12月龄C57BL/6老年小鼠随机分为对照组、七氟醚组、骨髓间充质干细胞组和NT-3基因修饰骨髓间充质干细胞组,每组10只。TUNEL实验检测小鼠海马组织细胞凋亡;免疫荧光检测小鼠海马组织神经元标志物TH; Morris水迷宫实验检测小鼠学习和记忆能力;Western blot检测小鼠海马组织β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达水平。结果 成功建立NT-3基因修饰的BMSCs, NT-3基因修饰增加BMSCs增殖能力,上调BMSCs NeuN表达。NT-3基因修饰骨髓间充质干细胞移植抑制七氟醚麻醉的小鼠海马组织细胞凋亡,促进小鼠海马组织神经元存活,增加小鼠学习和记忆能力,上调小鼠脑组织β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达水平。结论 NT...     

急性感染性糖尿病足湿性坏疽不同创面处理方式的临床比较

目的针对急性感染性糖尿病足湿性坏疽创面临床上常采用的手术治疗和非手术治疗方式的临床疗效进行分析探讨,为急性感染性糖尿病足湿性坏疽创面的临床处理提供指导意见。 方法回顾性地分析广州市第一人民医院烧伤科2014年1月至2017年3月收治的急性感染性糖尿病足湿性坏疽创面患者共63例,根据临床实际情况对糖尿病足湿性坏疽创面分别采用手术治疗方式[包括清创手术和清创手术＋负压创面治疗(NPWT),设为手术治疗组,共44例]和非手术治疗方式(包括超声清创和常规换药),设为非手术治疗组,共19例。通过分析创面处理前后血糖值变化、创周炎症反应情况、肉芽组织生长情况以及总体截肢率,评价糖尿病足湿性坏疽创面不同临床处理方式的临床疗效。数据比较采用配对资料t检验、Radit分析法和χ²检验。 结果手术治疗组和非手术治疗组在治疗前后均有明显的血糖值降低,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。在创周炎症反应和肉芽组织生成方面,手术治疗组在炎症反应控制方面95%CI为0.808～1.149,在肉芽组织生成方面95%CI为0.792～1.133,均明显好于非手术治疗组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。同时对手术治疗组内的清创手术和清创手术＋NPWT两种治疗方式行进一步Radit分析,结果提示两种治疗方式在肉芽组织生成方面,95%CI为0.2466～0.6466,差异无统计学意义(P>0.05)。手术治疗组截肢率为9%,非手术治疗组截肢率为37%,提示手术治疗可以明显降低截肢率,差异有统计学意义(χ²＝5.30,P<0.05)。 结论对于急性感染性糖尿病足湿性坏疽创面,应积极行清创手术治疗或辅以NPWT,尽量清除坏死组织,积极控制感染,促进肉芽组织生长,这对糖尿病足湿性坏疽保肢治疗有重要意义。     

单侧完全性唇腭裂植骨术与正畸联合治疗12例分析

目的:探讨单侧完全性唇腭裂患者牙槽突裂隙植骨术联合正畸治疗的方法和牙移动特点.方法:12例单侧完全性唇腭裂患者(男7例,女5例),年龄8～12岁(平均10岁),裂隙旁存在未萌出的尖牙或侧切牙,采取自体髂骨骨质植入裂隙处,术后3个月,进行正畸治疗,排齐整平牙列,牵引裂隙旁的尖牙或侧切牙萌出并进入植骨区.植骨术前、术后以及正畸治疗前后,拍摄X线片观察比较.结果:植骨后3个月以及正畸主动矫治结束后,植入骨无明显吸收,被牵引未萌牙纳入牙弓,牙髓活力正常,所有患者的咬合关系良好,达到个性化的理想咬合.结论:牙槽突裂隙植骨术和正畸治疗术是唇腭裂综合序列治疗的重要组成部分,两者的联合应用能达到良好稳定的治疗效果.