丙戊酸诱导白血病U937细胞凋亡机理的实验研究

目的从分子水平探索丙戊酸(VPA)诱导白血病U937细胞凋亡的机制,为临床治疗提供理论依据。方法将U937细胞分为1mmol/LVPA作用组、1mmol/LVPA 1μmol/LzVAD-fmk作用组和空白对照组,作用72h后进行Annixin-ⅴ及PI双重染色,在流式细胞仪上检测细胞凋亡;采用流式细胞仪检测处理前后各组细胞Bcl-2、Bax和Bcl-xl的平均荧光指数(MFI)以及胱冬肽酶(caspase)3、8和9的含量。结果1mmol/LVPA诱导U937凋亡率为(75.78±4.20)%(P<0.01);多cas-pase抑制剂zVAD-fmk可全部抑制U937凋亡,凋亡率为(2.89±0.36)%(P<0.01)。细胞内Bcl-2、Bax和Bcl-xl的MFI无明显变化。VPA作用后U937中caspase3由(14.09±1.19)%上升至(32.30±2.47)%,caspase8由(4.58±1.41)%上升至(86.47±3.26)%(P均<0.01),caspase9变化不显著。结论VPA通过激活caspase3和caspase8诱导U937凋亡;VPA诱导U937凋亡并非通过改变细胞中Bcl-2等的含量实现。     

T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏Th1/Th2平衡的影响

【目的】 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏淋巴细胞Th1/Th2平衡&#65380;T-bet及GATA-3 mRNA表达的影响&#65377; 【方法】 将C57BL/6小鼠32只随机分为4组,每组8只,分别为正常对照组(A组)&#65380;哮喘模型组(B组)&#65380;空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)&#65377;卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模&#65377;空质粒组和T-bet质粒干预组OVA激发24 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒&#65380;重组T-bet质粒,对照组用生理盐水代替OVA&#65377;最后一次滴鼻激发48 h后处死小鼠,流式细胞仪检测各组实验小鼠的脾脏淋巴细胞的Th1/Th2, RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞的T-bet及GATA-3mRNA表达&#65377; 【结果】 哮喘小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒后:①流式细胞仪检测发现,脾脏Th1百分率较哮喘模型组显著升高[(2.29 ± 1.55)% vs. (1.93 ± 1.14)%,P﹤0.05],Th2百分率显著降低[(0.93 ± 0.64)% vs. (1.63 ± 0.59)%];②RT-PCR检测发现脾脏淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著增加(0.53 ± 0.027 vs. 0.28 ± 0.035,P﹤0.05), GATA-3 mRNA表达水平显著降低(0.24 ± 0.022 vs. 0.58 ± 0.038,P﹤0.05)&#65377;而pcDNA3空质粒干预后与哮喘模型组比较无显著差异&#65377;【结论】 气道内转导pcDNA3-T-bet质粒后,可显著上调哮喘小鼠体内T-betmRNA表达,下调GATA-3 mRNA表达,有效改善哮喘小鼠体内Th1/Th2比例失衡,从而抑制哮喘小鼠的气道炎症,为哮喘的T-bet基因治疗提供依据&#65377;     

女性阴道宫颈尖锐湿疣的综合护理临床分析

目的 分析、研究女性阴道-宫颈尖锐湿疣的临床护理.方法 选取某医院2017年2月至2019年2月采用ALA-PDT联合电离子治疗阴道-宫颈尖锐湿疣的患者72例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各36例,对照组予以常规护理,观察组予以综合护理,探究阴道-宫颈尖锐湿疣患者的护理效果.结果 对照组疣体清除率、复发率为83...     

丙戊酸联合HA14-1诱导Bcl-2高表达的白血病细胞株BALL-1凋亡

目的观察体内外丙戊酸(VPA)和HA14-1联合应用对Bcl-2高表达的白血病细胞的杀伤效能及对外周血象的影响。方法(1)将BALL-1分为空白对照组1、mmol/L VPA组5、mmol/L VPA组、15 mmol/L VPA组,作用72 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡结果;(2)将BALL-1分为对照组、VPA组、HA14-1组、VPA+HA14-1组,作用后流式细胞法检测各组凋亡率;(3)每组6只NOD/SCID鼠在每只鼠接种1×107/0.2 ml BALL-1后24 h按如下分组进行实验:①对照组;②HA14-1组,经尾静脉注射灭菌HA14-1 25 mg.kg-1.d-1,共7天;③VPA组,注射灭菌VPA 250 mg.kg-1.d-1,共7天;④HA14-1+VPA组,注射灭菌HA14-1 25 mg.kg-1.d-1,4小时后再注射灭菌VPA 250 mg.kg-1.d-1,共7天。记录各组小鼠的存活时间。(4)将普通小白鼠共24只按(3)方法进行分组,比较几组普通小鼠的生存率、存活时间,及外周血细胞计数。结果(1)VPA15 mmol/L作用72 h BALL-1凋亡率为(24.8±2.8)%,与其它3组比较P<0.01;另3组之间比较P>0.05。(2)HA14-1组、VPA组凋亡率分别为(4.6±0.1)%(、4.8±0.5)%,与对照组比较,P>0.05。HA14-1+VPA组凋亡率高达(76.5±6.9)%,与另3组比较P<0.01。(3)HA14-1+VPA组小鼠生存天数为(87.5±4.5)天,显著长于其他3组,而其他3组之间无差异。(4)HA14-1单独作用组和HA14-1与VPA联合作用组表现为白细胞与血小板轻微而短期下降,而小鼠的生存率、存活时间无显著性差异。结论HA14-1与VPA联合用药,可克服Bcl-2高表达造成的对VPA的抗性。     

哮喘患儿外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞检测及其意义

目的:探讨哮喘患儿急性发作期及缓解期Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞亚群平衡的变化情况。方法:采用荧光标记抗体,应用三色荧光流式细胞仪技术,从单细胞水平对急性发作期哮喘患儿(20例)、缓解期哮喘患儿(18例)及同龄正常健康儿(对照组20例)外周血CD4+、CD8+细胞内分泌IFN-γ、IL-4进行检测。结果:哮喘患儿外周血细胞内分泌IL-4(+)的CD4+(Th2)、CD8+(Tc2)百分率较正常对照组升高,且哮喘急性发作期高于缓解期;分泌IFN-γ(+)的CD4+(Th1)、CD8+(Tc1)百分率较正常对照组降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。结论:哮喘患儿外周血Th2、Tc2百分率升高,Th1、Tc1百分率降低,Th1/Th2、Tc1/Tc2比值降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。     

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

 【目的】 研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】 本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况，同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量，并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析，了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】 哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组，其中哮喘发作组显著低于缓解组（P<0．05）；转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组，其中哮喘发作组又显著低于缓解组（P<0．05）； Th2细胞百分率显著高于正常对照组，哮喘发作组又显著高于缓解组（P<0．05）。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．731），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．685）；GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关（r＝-0．692），与Th2细胞比率呈正相关（r＝0．717）；T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关（r＝0．793），与Th2细胞比率呈负相关（r＝-0．639），与Th1/Th2比值呈正相关（r＝0．801）。【结论】 哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调，与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关，可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。