新生儿甲基丙二酸血症生化筛查与基因筛查结果分析

目的对比分析济南地区甲基丙二酸血症(MMA)生化筛查与基因筛查的发病率及基因变异情况, 调查济南地区人群中MMA相关致病基因的携带情况。方法回顾性研究。统计2011年5月至2022年5月济南市新生儿疾病筛查中心通过串联质谱筛查确诊MMA的患儿, 并对基因检测结果进行分析总结。收集6 800例新生儿的足跟血滤纸干血斑完成新生儿基因筛查, 其中4 800例用高通量测序+目标区域捕获技术检测MMAA、MMAB、MMACHC及MMUT基因, 2 000例采用超多重聚合酶链反应+目标基因位点捕获技术检测MMA相关8个基因174个目标基因位点。分析MMA的热点突变及相关基因携带率。结果共367 452名新生儿完成串联质谱筛查, 筛查确诊MMA患儿103例(男56例, 女47例), MMA生物化学筛查的发病率为1∶3 567。其中76例获得基因确诊, 检出4种MMA相关基因(MMACHC、MMUT、MMAA、MMADHC)变异。6 800例新生儿完成了新生儿基因筛查, 共3例患儿确诊MMA, 318例患儿携带甲基丙二酸的致病变异, 总携带率为4.68%, 其中MMACHC基因变异的携带率为3.09%...     

串联质谱筛查新生儿遗传代谢疾病中氨基酸浓度波动性及其影响因素分析

目的研究串联质谱技术应用于新生儿遗传代谢病筛查中检测多种氨基酸浓度的稳定性,以及影响其浓度波动的原因。方法采用串联质谱技术,对2013年7月-2016年6月济南市新生儿疾病筛查中心54613例新生儿进行多种氨基酸、有机酸和脂肪酸代谢性疾病筛查,统计氨基酸浓度的变异系数及其浓度每月变化趋势,并初步分析氨基酸浓度随季节性波动的原因。结果在检测的所有11项氨基酸中,精氨酸(ARg)、蛋氨酸(Met)的变异系数分别为28.45%和14.53%,明显高于其他氨基酸的变化(<10%)。精氨酸和蛋氨酸的浓度变化具有季节规律性,夏季浓度低,冬季浓度高,与环境温度和湿度变化呈现反比例关系。结论串联质谱技术应用于新生儿疾病筛查,所检测的精氨酸和蛋氨酸稳定性较差,在递送及储存环节中易受环境温度和湿度的影响。针对其浓度随季节波动的特性,在不同的季节分别统计相应的临床参考范围,有利于建立合适的截断值设定标准。     

基于线粒体功能障碍探讨气虚的生物学基础

病证结合诊疗模式逐渐成为中医诊疗的特色,可提高治疗效果。在生理功能方面,线粒体功能与中医气的推动、气化、防御、温煦作用颇为类似;在病理机制方面,心气虚、脾气虚、肺气虚及其他脏腑气虚均表现出不同程度或不同类型的线粒体功能障碍;在治疗方面,从气虚论治可促进心力衰竭、功能性消化不良、运动性疲劳等不同系统疾病过程中受损线粒体功能的恢复。由此认为,中医气虚与线粒体功能障碍关系密切。为进一步探寻气虚证的生物学基础,本文梳理总结对气虚证患者或动物模型体液或组织的代谢组学及蛋白质组学分析以及补气药的生物信息学分析的相关文献,归纳出气虚证的生物学基础可能是线粒体相关物质和/或能量代谢产物/蛋白及其相关调控通路失调,具体表现在线粒体膜蛋白酶系、线粒体呼吸链复合物及三羧酸循环中间产物的表达异常。从线粒体功能障碍角度探讨中医气虚的生物学基础,将中医辨证与现代医学辨病有机结合,量化中医证型,可以为中医证候的科学化、标准化、规范化提供有力依据。     

基于数据挖掘的周平安教授肺纤维化组方用药规律研究

目的 利用数据挖掘方法探究周平安教授治疗肺纤维化的组方用药规律和经验方。方法 筛选整理周平安教授治疗肺纤维化医案,分别利用Clementine 12.0和SPSS 21.0软件对高频药物进行性味归经分析、关联规则及聚类分析。结果 (1)药物及性味归经分析总结出清热药、补虚药、止咳化痰平喘药位居前三,性温平、味甘苦辛、入肺经药物使用频次较高;(2)关联规则提取出常用药对及药物组合为生黄芪、金银花、穿山龙、石韦、当归中两药或多种药的组合;(3)聚类分析得出四个常用药物组合,其中之一便是周教授经验方“肺痹汤”的基本药物组成。结论 周平安教授临床治疗肺纤维化用药平和,所用核心药物组合恰为经验方肺痹汤的组成,与前期理论相吻合。     

新生儿筛查确诊苯丙氨酸羟化酶缺乏症患者基因变异及长期随访分析

目的:了解苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因变异的特点，观察PAH缺乏症新生儿的长期治疗效果及随访情况。方法:收集1996至2021年198例济南地区新生儿筛查确诊PAH缺乏症患者的临床资料及治疗随访结果，总结其中完善基因检测的55例及济南周边地区转诊的213例患者的基因分析结果。采用定制Panel检测基因变异，定期监测血苯丙氨酸浓度及患者身高、体重等体格发育指标，采用0～6岁儿童神经心理发育量表和学习成绩评估智力发育，颅脑磁共振成像检测评估患者脑损伤情况。结果:PAH基因以c.728G>A、c.158G>A、c.721C>T、c.1068C>A、c.611A>G变异多见；c.158G>A变异的基因型主要为复合杂合变异，以轻度高苯丙氨酸血症为主。随访期间，168例PAH缺乏症患者的体格发育均正常，无矮小及营养不良。33例学龄期前接受智能发育评估的患者中，2例智能发育落后，初始治疗年龄均超过6月龄。9例平均年龄为（17.13±2.42）岁的患者完成颅脑磁共振成像检查，结果正常1例，异常8例（以T2WI上双侧侧脑室旁小斑片状或片状高信号灶多见），智能发育均正常...     

串联质谱法筛查新生儿溶酶体贮积症酶活性切值的建立

目的：建立串联质谱法检测6种溶酶体贮积症（LSD）相关酶活性切值的计算方法。方法：采用串联质谱法对26 689名新生儿及7例临床确诊患儿进行6种LSD（糖原贮积症Ⅱ型、法布里病、黏多糖贮积症Ⅰ型、克拉伯病、尼曼-皮克病A/B和戈谢病）相关酶活性检测,将每批次酸性β葡糖脑苷脂酶、酸性鞘磷脂酶、β半乳糖脑苷脂、α-L-艾杜糖苷酸酶、酸性α葡糖苷酶活性中位数的20%以及α半乳糖苷酶活性中位数的30%作为切值。对酶活性结果小于切值70%的标本进行基因诊断。结果：7例临床确诊患儿的酶活性均低于相应切值,提示本研究建立的切值计算方法有效。26 689名新生儿筛查LSD可疑阳性142例（0.53%）,其中β半乳糖脑苷脂缺乏25例、α-L-艾杜糖苷酸酶缺乏1例、α半乳糖苷酶缺乏19例、酸性α葡糖苷酶缺乏97例。确诊LSD患儿8例,其中糖原贮积症Ⅱ型3例、克拉伯病3例、法布里病2例,阳性预测值约为5.6%。6种LSD酶活性切值在3—8月份时均呈下降趋势,在9—12月份时均呈上升趋势,不同月份之间差异有统计学意义（P<0.05）。结论：本研究建立的串联质谱法筛查LSD相关酶活性切值计算方法有效,其中...     

超高效液相色谱-串联质谱血液代谢物检测在甲基丙二酸血症筛查与监测中的应用北大核心CSCD

目的探讨超高效液相色谱-串联质谱法(二阶筛查串联质谱法)在甲基丙二酸血症(methylmalonic acidemia,MMA)筛查与患儿随访检测中的应用价值,并分析与传统串联质谱法、尿气相色谱质谱法检测MMA各指标的相关性。方法收集济南市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心2021年2月至2022年1月49490名新生儿干血滤纸片,初筛丙酰肉碱(propionycarnitine,C3),及其与乙酰肉碱(acetylcarnitine,C2)比值C3/C2任一指标异常的样本进行二阶筛查;分析定期随访治疗的MMA患儿二阶筛查串联质谱法、传统串联质谱法及尿气相色谱质谱法检测各指标浓度变化及其相关性。结果49490名新生儿传统串联质谱法MMA筛查阳性500例,筛查阳性率1.01%(500/49490),基因检测确诊16例;进入二阶筛查串联质谱检测流程样本827例,阳性31例,筛查阳性率0.06%(31/49490),基因检测确诊16例,与传统串联质谱法确诊样本相符。二阶筛查串联质谱法与血清同型半胱氨酸、传统串联质谱法及尿气相色谱质谱法检测各指标均存在正相关性(P<0.05)。结论MMA二阶筛查串联质谱法筛查阳性率明显低于传统串联质谱法,其与传统串联质谱法、尿气相色谱质谱法联合检测,可有效提高MMA筛查诊断效率,并可用于患儿疗效观测,开展更有针对性的治疗。