热休克蛋白65对小鼠溃疡性结肠炎的作用机制研究*

目的 探讨热休克蛋白65（HSP65）对小鼠溃疡性结肠炎（UC）的作用及机制。方法 选择C57BL/6小鼠,应用葡聚糖硫酸钠法复制UC模型。6只正常小鼠为正常对照组（A组）,48只UC小鼠随机分成模型对照组（B组）、低剂量组（C组）、中剂量组（D组）及高剂量组（E组）,每组12只。A组和B组小鼠灌胃给予磷酸盐缓冲液（PBS）,C组、D组、E组小鼠分别灌胃给予HSP65,剂量分别是0.5、2.5及5.0?mg/kg体重。隔天灌胃1次,共7次,末次灌胃2?d后,麻醉处死小鼠。计算小鼠疾病活动指数（DAI）。取小鼠结肠中段组织,HE染色镜检并计算组织病理评分。取小鼠血液、脾脏和肠系膜淋巴结,分离有核细胞后采用流式细胞术检测调节性T细胞（Treg）活化情况。结果 HSP65蛋白治疗UC小鼠14?d,B、C、D及E组小鼠的DAI分别为（3.66±0.39）、（3.07±0.15）、（1.50±0.43）和（0.83±0.31）,C组、D组、E组小鼠DAI变化趋势有差异（P?<0.05）;C组、D组和E组小鼠结肠组织病理评分均低于B组小鼠（P?<0.05）;E组小鼠结肠组织病理评分低于C组和D组（P?<0.05）,D组小鼠结肠组织病理评分低于C组（P?<0.05）;与未治疗的B组比较,C组、D组、E组小鼠肠系膜淋巴结中的Treg细胞比例均高于B组（P?<0.05）。结论 HSP65蛋白可以缓解小鼠溃疡性结肠炎,其机制可能是通过激活小鼠肠系膜淋巴结中的静止Treg细胞,使得活化Treg细胞比例增加,再通过活化Treg细胞发挥抑制肠道炎症反应作用。     

钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用

目的：构建问号钩端螺旋体（简称钩体）黄疸出血群赖型赖株groEL基因原核重组表达系统,了解重组表达的GroEL蛋白（rGroEL）对金地鼠的免疫保护作用。 方法：采用高保真PCR扩增问号钩体赖株groEL基因并测序,常规方法构建groEL基因原核表达系统。采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rGroEL表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL。观察rGroEL免疫金地鼠对问号钩体赖株感染的保护率。采用MAT法检测免疫动物血清与我国流行问号钩体血清群交叉凝集效价。 结果：所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列与GenBank中相应基因完全相同。所构建的groEL基因原核表达系统能表达可溶性rGroEL。100和200 μg rGroEL对金地鼠的免疫保护率分别为50.0%和75.0%。rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各问号钩体血清群。 结论：GroEL蛋白是问号钩体属特异性保护性抗原,可用于制备通用性钩体基因工程疫苗。     

microRNA调控基因表达作用及其对病原微生物致病性的影响

微小RNA(microRNA或miRNA)是近年来新发现的一类小RNA分子.自1993年Lee等用经典的定位克隆方法在线虫(Celegans)体内发现首个microRNA( Lin-4)以来,迄今已发现约16772个microRNA(miRBase数据库17版,http://microrna.sanger.ac.uk/sequences),成为目前已知最大的基因表达调控家族.microRNA广泛存在于脊椎动物、果蝇、线虫、植物、细菌甚至病毒中,在进化上具有保守性,但在序列、结构、表达和功能上具有多样性.     

饮食加调理,让大便更通畅

便秘,可能是让很多现代人苦恼但又难以言说的问题.人们常常用"便秘脸"来调侃,说的就是一个人心情糟糕得像便秘了很久而不得解一样.由此可见,便秘看起来像小事一件,但真的非常影响人的心情和状态. 那我们是怎么定义"便秘"的呢?大便次数较以往减少了,以前一周排便4次,现在一周只能排上一两次;排便周期延长了,以前是一天排1次,现在要三五天才排1次;或周期不延长但是粪便干结而涩,怎么也无法排出;或是便意频频,但排泄不通畅,意犹未尽,这些情况都属于便秘.偶尔便秘个一两次,对我们的日常生活没有太大的影响,但是长期便秘就会产生很多我们意想不到的危害了.