CA125酶促化学发光免疫分析方法的建立

CA125是细胞表面的一种高分子糖蛋白。对卵巢癌患者血清中CA125浓度进行测量,结果显示80％的上皮癌患者血清中的CA125含量有所升高,而健康女性中CA125升高比例只有不到1％,所以利用CA125浓度值来判断卵巢癌的发生具有重要的临床意义。酶促化学发光免疫分析方法继承了酶联免疫分析的特点,又普遍具有高灵敏度、快速检测等优点,已被医院大量使用。利用双抗体夹心法建立CA125酶促化学发光免疫分析方法具有重要意义。     

青蒿素提取技术研究进展

青蒿素是利用我国特有的植物资源黄花蒿研制成功的一种全新的抗疟有效单体。它的发现成为世界抗疟药史上继奎宁之后的又一个重要里程碑。由于其结构独特,抗疟机理特别,对抗氯喹的恶性疟和脑性疟有特效,且有高效低毒的特点,而被WHO称     

番茄红素的提取与合成工艺研究进展

番茄红素 (lycopene)是成熟番茄的主要色素 ,是一种不含氧的类胡萝卜素。1873年 Hartsen首次从浆果薯蓣 Tamuscommunis L.中分离出这种红色晶体 [1 ]。 1913年 Schunk发现这种物质和胡萝卜素的不同 ,将其首次命名为 lycopene,使用至今。长期以来 ,番茄红素一直作为一种普通的植物色素 ,并未引起太多的关注。近些年来 ,由于番茄红素在防治癌症 ,特别是前列腺癌、胃癌、皮肤癌、宫颈癌等方面的功效不断被发现和证实 ,才引起了人们的广泛关注。近年的研究证实 ,番茄红素不仅分布在番茄中 ,还存在于西瓜、南瓜、李子、柿子、胡椒果、桃、木瓜…     

HE4两种融合蛋白的基因构建和原核表达

目的:构建人附睾蛋白4(HE4)的原核表达系统,纯化重组蛋白并检测其活性。方法:提取卵巢透明癌细胞总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,分别构建pGEX-4T-1-HE4和PET26b-HE4两种原核表达系统。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,最后采用SDS-PAGE和HE4商品化免疫分析试剂盒对表达产物进行鉴定。结果:成功构建了两种HE4融合蛋白的重组表达质粒,表达产物经SDS-PAGE鉴定,分别在相对分子量约38 000处和12 000处见到表达条带,并可与HE4单克隆抗体特异性结合。结论:采用原核表达方法获得了HE4的两种融合蛋白,为下一步开发免疫分析诊断试剂奠定了基础。     

番茄红素的提取与合成工艺研究进展

番茄红素 (lycopene)是成熟番茄的主要色素 ,是一种不含氧的类胡萝卜素。1873年 Hartsen首次从浆果薯蓣 Tamuscommunis L.中分离出这种红色晶体 [1 ]。 1913年 Schunk发现这种物质和胡萝卜素的不同 ,将其首次命名为 lycopene,使用至今。长期以来 ,番茄红素一直作为一种普通的植物色素 ,并未引起太多的关注。近些年来 ,由于番茄红素在防治癌症 ,特别是前列腺癌、胃癌、皮肤癌、宫颈癌等方面的功效不断被发现和证实 ,才引起了人们的广泛关注。近年的研究证实 ,番茄红素不仅分布在番茄中 ,还存在于西瓜、南瓜、李子、柿子、胡椒果、桃、木瓜…     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法.方法 采用两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,采用辣根过氧化物酶/鲁米诺/过硼酸钠体系,建立了测定人血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法,并进行了方法学鉴定.用该法测定80例正常人血清,确定正常参考值范围;测定临床病理样品27例,与Beckman全自动化学发光试剂测定值进行相关性分析.结果 本方法测定范围0.3 ～ 100μg/L,分析灵敏度0.16μg/L;37℃反应时间30min;回收率76.8％ ～ 111.1％;高浓度cTnI血清样品经系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.999;批内、批间变异系数分别为3.90％～6.71％,7.66％～10.34％;与心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白C(TnC)、骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(sKTnI)、骨骼肌肌钙蛋白T(sKTnT)、人心肌脂肪酸结合蛋白(h-FABP)、人心肌肌酸激酶(CK-MB)、人心肌肌红蛋白、C-反应蛋白(CRP)均无交叉;确定临床正常参考值小于0.304μg/L;与Beckman全自动化学发光试剂比较,两者测定值线性相关系数为0.925.结论 该方法反应时间短、特异性强、重复性好,具有应用及推广价值.     

内镜下逆行胰胆管造影治疗儿童胆总管结石并发急性胰腺炎一例(附内镜下视频)

目的探讨内镜下逆行胰胆管造影(ERCP)在儿童胆总管结石并发急性胰腺炎中的应用价值。方法回顾性分析郑州大学附属儿童医院收治的1例胆总管结石并发急性胰腺炎患儿的诊断与治疗经过, 分析ERCP在儿童胆管结石诊治中的作用。结果患儿, 男, 13岁11个月, 因间断腹痛、呕吐1个月, 加重2 h就诊, 确诊为胆总管结石并发急性腹腺炎接受ERCP治疗。球囊扩张十二指肠乳头扩约肌, 应用取石网篮取石, 取出胆总管结石及大量泥沙样结石。术后置入鼻胆引流管一根, 于术后1周改为内支架引流, 患儿病情好转。结论 ERCP治疗儿童胆总管结石并发急性胰腺炎可快速缓解临床症状, 改善实验室检查指标。     

青蒿素提取技术研究进展

青蒿素是利用我国特有的植物资源黄花蒿研制成功的一种全新的抗疟有效单体。它的发现成为世界抗疟药史上继奎宁之后的又一个重要里程碑。由于其结构独特，抗疟机理特别，对抗氯喹的恶性疟和脑性疟有特效，且有高效低毒的特点，而被WHO称为“世界上目前唯一有效的疟疾治疗药物”。本着重针对青蒿素天然产物提取方法研究做一综述。     

抗肌红蛋白单克隆抗体的制备与鉴定及其初步应用

目的 制备和鉴定抗肌红蛋白(Mb)单克隆抗体,为人肌红蛋白检测试剂的研制奠定基础.方法 用人肌红蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,用ELISA方法筛选,有限稀释法进行克隆化培养阳性杂交瘤细胞株.ELISA法测定小鼠腹水滴度,CLIA法对抗体进行配对实验与特异性鉴定.结果 筛选培养出9株分泌抗肌红蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水滴度为1∶5×104 ～ 1∶2×105.通过配对实验,有5株抗体6种组合可以成功配对.这5株抗体的亲和常数为6.46×108 ～ 3.68×109 L/mol.用5株抗体所建立的6种化学免疫分析方法与人Hb交叉反应率为7.434×103％ ～2.904×10-2％,与人ALB交叉反应率为4.980×10-7％ ～3.830×10-5％.用Mb17B6与Mb21E8两株抗体建立的CLIA标准曲线的线性系数为0.997,灵敏度为6.02ng/mL.结论 成功制备了可以应用于免疫分析的抗肌红蛋白单克隆抗体.