HGF/c-Met信号通路在克唑替尼诱导不同肺癌细胞株凋亡中的作用

 目的: 观察克唑替尼(crizotinib)诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF/c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法: 采用噻唑蓝(MTT)法检测克唑替尼对H1993(c-Met扩增的肺腺癌细胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞)和A549细胞的活力抑制情况;采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率;采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平,同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果: MTT结果表明克唑替尼作用72 h后,H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长,细胞凋亡率呈时间依赖性增加(P<0.05)。Western blot检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中,p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论: 初步证实HGF/c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。     

基于文献研究的原发性痛经灸疗选穴规律探讨

目的：总结应用灸法治疗痛经的选穴规律,为规范与推广灸法治疗痛经提供理论依据。方法：计算机检索中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库和中国中医文献检索系统数据库,对所得文献进行阅读分析,建立经灸法治疗选穴数据库,进行统计分析。结果：灸法治疗痛经主穴选取共出现25个穴位,其中以关元、三阴交出现频次最多,分别为25．56％、14．29％。结论：临床应用灸法治疗痛经应以关元、三阴交为主穴,以达到调理冲任、温经止痛的目的。     

鼻咽癌组织中BMI1和ERK3的表达及其临床意义

目的 探讨鼻咽癌(NPC)组织中BMI1和ERK3的表达、两者的相关性及其在NPC侵袭转移中的作用。方法 检索并下载GEO数据库中NPC测序基因集GSE103611和GSE34573,分析BMI1和ERK3基因表达数据。采用免疫组化MaxVision法检测51例NPC患者组织和18例慢性鼻咽炎组织中BMI1和ERK3的表达情况,结合随访资料分析以上指标的临床意义。结果 BMI1在NPC组织和慢性鼻咽炎组织中的阳性率分别是56.9%和22.2%,ERK3在NPC组织和慢性鼻咽炎组织中的阳性率分别是52.9%和11.1%。BMI1和ERK3在NPC组织中的阳性率均高于慢性鼻咽炎组织(P<0.05),尤其在NPC的N_2～3组中两者呈显著高表达。BMI1与ERK3的表达呈正相关(r_s=0.345,P<0.05)。同时在NPC组织中BMI1和ERK3的表达与T分期、N分期以及总分期有关(P<0.05),与患者性别、初诊血清EBV DNA拷贝数无关(P>0.05)。结论 BMI1/ERK3通路可在NPC的侵袭转移中发挥一定的作用。     

系膜增生性肾小球肾炎患者血小板反应蛋白-1的检测及其临床意义

目的探讨血小板反应蛋白-1(Thrombospondin-1,TSP-1)在人类系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)中的蛋白表达及其在发病中的作用.方法 采用HE、PAS、PASM及免疫组织化学SABC染色法对56例系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)肾活检组织进行观察,并经计算机医学图像分析系统进行分析.结果 参照1982年WHO关于肾小球病理学分类标准,分为轻、中、重度三组,重度系膜组织增生组24h尿蛋白定量、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇均较轻、中度系膜组织增生组明显升高(P均＜0.05);三组内生肌酐清除率无明显差别;有肾间质病变内生肌酐清除率(CCr)为(91.13±42.52) ml/min,无肾间质病变CCr为(122.82±36.59)ml/min差异有统计学意义(P＜0.05),24h尿蛋白定量、尿α-1微球蛋白差异也有统计学意义(P＜0.05).在各组MsPGN切片中TSP-1均有阳性表达,阳性反应主要分布在肾小球系膜区、部分毛细血管襻及肾小管上皮细胞胞浆,随增生程度明显增加(P＜0.05).在无明显病变的肾间质中未见TSP-1表达,随着病变程度加重,TSP-1的表达量显著增加,在炎症浸润及纤维化显著的间质区亦可见表达增强(P＜0.01).光镜观察是否存在肾小球袢内微血栓,MsPGN伴肾小球毛细血管袢内微血栓(MsPGN+ T)组TSP-1蛋白表达明显增强(P＜0.05).结论 MsPGN时病理改变和临床指标24h尿蛋白定量、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇、CCr有一定关系,TSP-1蛋白在肾小球与肾小管表达均显著增高,病理改变有血栓时则更明显,提示该因子在MsPGN发病中有一定的作用.     

多学科诊疗模式下Ⅲ期非小细胞肺癌的疗效评价

目的 评估非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）多学科诊疗模式（Multi-disciplinary treatment,MDT）的治疗价值。方法 回顾性42例的Ⅲ期NSCLC患者,其中MDT组24例,非MDT组18例,对两组患者的无进展生存期（PFS）及总生存期（OS）进行统计分析,从而探讨Ⅲ期NSCLC患者是否在多学科诊疗模式下获益。结果 MDT组与非MDT组患者PFS分别（24.71±1.72）个月和（17.44±2.36）个月,OS分别为（28.75±1.60个月和（24.00±1.45）个月,差异有统计学意义（P<0.05）。对两组患者的淋巴结（N）分期进行生存分析,N≥2时MDT组与非MDT组PFS分别为（25.00±2.39）个月和14.08±2.89个月,OS分别为（28.53±2.13）个月和（22.67±2.02）个月,两组患者的PFS和OS具有统计学差异（P<0.05）;N<2时MDT组与非MDT组的PFS分别为（24.00±1.36个月和24.17±2.52个月,OS分别为（29.29±2.03）个月和...     

肝癌生物样本库的标准化建立与信息化管理

目的 建立一个小型的拥有标准化操作流程和信息化管理功能的肝癌生物样本库。方法 根据纳排标准,在患者签署知情同意书基础上,收集2012年8月—2020年12月就诊于华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科的肝癌患者血液、组织和粪便样本,并按照全血、血清、冻存组织、石蜡包埋组织和粪便等不同样本的标准流程进行出入库管理,同时采集患者临床信息及其随访信息。通过随机抽取不同年份的肝癌及癌旁冷冻组织样本,检测总RNA的浓度和完整性,确保样本库冷冻样本保存质量。结果 101个自然月共收集4190例肝癌手术患者样本,其中包括41 718份冷冻组织样本、18 950份石蜡包埋组织样本、24 389份全血样本、20 060份血清样本和5392份粪便样本。所收集肝癌患者的年龄范围是13～88岁,男性占比85.1%,乙型肝炎和肝硬化的比例分别是83.3%和73.5%。根据样本的收集、处理、保存、应用及信息化管理,制定出一份标准的操作流程(SOP)和一套电子数据采集系统(EDC)。从样本库随机抽取的18份冷冻组织样本中,其中16份样本RNA质量较高,可满足后续实验需求。结论建立了标准化和信息化的肝癌生物样本库...     

社区小儿轻症肺炎的家庭护理指导

冬李是小儿肺炎的高发季节,世界卫生组织将小儿肺炎列为全球重要儿科疾病之一.本文就小儿轻症肺炎门诊治疗的患儿如何进行有效的家庭护理进行指导.     

旁路信号通路激活介导的EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib继发耐药的研究

目的:本研究旨在探讨肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)及转化生长因子α(TGF-α)是否以旁路激活的方式诱导EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib的耐药,并进一步探讨旁路信号激活在alectinib耐药中的作用。方法:用不同浓度的alectinib、克唑替尼(crizotinib)、17-DMAG或(和)HGF(50μg/L)、EGF(100μg/L)、TGF-α(100μg/L)处理EML4-ALK阳性肺癌细胞株H3122,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,应用Western blot技术检测细胞中ALK、c-Met、EGFR及相应磷酸化蛋白的表达,观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK水平。结果:Alectinib作用72 h后,H3122细胞株的活力随着alectinib药物浓度的增加而逐渐下降,呈剂量依赖性。HGF、EGF和TGF-α诱导后,alectinib抑制H3122细胞的生长曲线往右移,HGF、EGF和TGF-α处理能够降低alectinib对肺癌细胞活力的抑制作用。0.05μmol/L alectinib作用H3122细胞株48 h后的凋亡率为(20.12±1.36)%,而alectinib联合HGF、EGF和TGF-α后的凋亡率分别为(7.85±1.03)%、(5.60±0.79)%和(4.58±1.00)%,显著低于alectinib单药处理(P0.05)。Alectinib单药成功抑制p-ALK及其下游信号通路,HGF明显增加细胞中p-Met及其下游p-AKT、p-ERK的蛋白水平,EGF和TGF-α明显增加细胞中p-EGFR及其下游p-AKT、p-ERK的表达,alectinib抑制p-ALK,但不能抑制HGF、EGF和TGF-α诱导的pAKT和p-ERK的蛋白表达。此外,联合应用crizotinib和17-DMAG可以抑制因HGF和EGFR配体而导致的H3122耐药细胞的活力。结论:HGF、EGF和TGF-α可通过旁路激活的方式诱导EML4-ALK阳性肺癌细胞H3122对alectinib耐药,其机制可能与HGF激活c-Met磷酸化、EGF和TGF-α激活EGFR磷酸化有关。     

系膜增生性肾小球肾炎患者Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子检测及临床意义

目的:探讨Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)在系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)中的表达及其病理作用。方法:采用HE、PAS、PASM、Masson及免疫组织化学SABC染色法,对MsPGN56例患者肾活检组织标本进行观察,经计算机医学图像分析系统进行分析。结果:(1)24h尿蛋白定量、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇重度系膜增生组均较轻、中度系膜增生组明显升高(均P<0.05);3组间内生肌酐清除率差异无统计学意义。(2)肾小管间质病变与肾功能的关系:无小管间质病变组24h尿蛋白定量、尿α-1微球蛋白、Ccr分别为:1.91±1.12g,296.47±191.25mg/L,122.82±36.59,有小管间质病变组分别为:3.48±1.63g,582.08±291.32mg/L,91.13±42.52,两组3项指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)PAI-1免疫组织化学染色:正常对照组肾小球、肾近曲小管上皮细胞仅呈微弱阳性反应。重度系膜增生组肾小球系膜区PAI-1表达较轻度、中度系膜增生组明显增强(P<0.05),肾小管间质PAI-1表达也明显增强(P<0.05),轻度与中度系膜增生组PAI-1在肾小球系膜区、肾小管间质的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :MsPGN病理改变和24h尿蛋白定量、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇有一定关系,PAI-1在肾小球与肾间质表达均显著增高,有微血栓存在时则更明显,提示PAI-1在MsPGN发病中具有重要的病理作用。     

大剂量百草枯中毒2例抢救体会

近年来，由于误服、自服或投毒导致百草枯中毒的发生率较高，如不及时积极综合治疗。病死率高。我们近期抢救百草枯中毒所致急性肾功衰竭2例，采用血液透析加血液灌流配合大剂量激素综合治疗，取得较好疗效。