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目的:构建受AFP顺式作用元件调控的超抗原表达载体,将SEA(D227A)特异性的表达于AFP阳性肝癌细胞膜表面。方法:PCR扩增AFP基因启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)。将上述片断插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,构建AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体(pLXSN SEA(D227A)—linker—CD80tm)。通过脂质体介导,以表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系,用RT—PCR和间接免疫荧光染色,检测SEA的表达。结果:成功地将AFP基因的启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)克隆到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,酶切鉴定和DNA序列分析无误,RT—PCR和间接免疫荧光法检测证实,SEA(D227A)能在AFP阳性的肝癌细胞膜特异性表达。结论:AFP顺式作用元件修饰的超抗原表达载体的构建,为下一步用其强化肝癌的免疫治疗奠定了基础。 相似文献
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大肠癌是胃肠道常见的恶性肿瘤,对晚期大肠癌,手术无法达到彻底切除的目的。我们自1997年1月~2000年12月应用内镜下微波加注射抗癌药治疗晚期大肠癌14例,现报告如下。1 临床资料1.1 一般资料 本组14例,男9例,女5例;年龄21~69岁,平均48岁。结肠造瘘术后者8例,拒绝手术者4例,直肠阴道瘘者2例。病变部位:直肠乙状结肠移行部癌2例,高位直肠癌5例,低位直肠癌7例。内镜表现:肿块型10例,溃疡型2例,浸润型2例,肿物表面均表现为凹凸不平,有的呈分叶状,粘膜表面充血、水肿、糜烂,有的覆污秽苔,质地脆,触之易出血。 相似文献
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临床上将直径>2.0cm的息肉称为大息肉,直径>3.0cm息肉为巨大息肉。我们应用热电极在内镜下行电烙样加热,使息肉层层脱落、萎缩至完全消失,对防治大息肉切除术并发出血,有较好疗效,报告如下。1.资料和方法:经肠镜检查发现息肉直径2~3.5cm者56例共64颗,其中大息肉56颗,巨大息肉8颗。随机分为两组:治疗组采用热电极电烙样加热法,即热电极的柱状探头对息肉的表面四周加热,不直接加热息肉的根蒂部,共30例35颗(巨大息肉5颗)。其中男18例,女12例,年龄8~76岁,平均40岁;单发26例,多发4例… 相似文献
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目的给肝癌细胞转入超抗原分子葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)的编码基因,使其表达这种毒素分子,以增强肝癌细胞的免疫原性,达到增强肝癌细胞诱导免疫排斥反应的目的.方法构建SEA编码基因的逆转录真核表达载体,转染病毒包装细胞系PA317后,行滴度测定.以高滴度克隆培养上清转导肝癌细胞株HHCC,筛选获得阳性表达株.然后利用外周血混合淋巴细胞进行杀伤实验.结果成功的构建了SEA的逆转录真核表达载体pLXSN-SEA,转导肝癌细胞后,获得表达SEA分子的阳性克隆HHCC-SEA.培养上清中SEA含量在pg的水平.外周血混合淋巴细胞杀伤实验结果显示,T淋巴细胞对转导后肝癌细胞的杀伤率可达45.6%.高于对HHCC 20.7%的杀伤率,T细胞对转导后肝癌细胞杀伤反应的Km值为5.18×104,而HHCC组的Km值为2.92 × 105,与前者的差别有统计学意义.结论肝癌细胞在转入SEA分子的编码基因后,表达出微量的SEA蛋白,却具有较强的免疫激活能力.即表达SEA的肝癌细胞在很低的浓度下,激活的T细胞即可对其达到最大杀伤反应速度,对T细胞的激活能力远远高于HHCC. 相似文献
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1990年3月至1993年11月,我院共收治有机磷中毒59例,均以东度著减抢救成功。我们体会:正确判断“南吉化”是抢救成功的关键。现报告如F。l临床资料1.】一般情况本组对25例,女34例;年龄1~60岁,“I’均2;l岁。中毒程度:轻度24例,中度24例,重度11例。按毒物毒性可分为:高毒性(16O5氧化乐果、甲胺磷、1059、8901、磷胶合并16OS)23例,中毒件(敌敌畏、乐果、猪瘟净)18例,低毒件(杀灭威、敌百虫)18例。1.2‘自营化”指证l·2·l血压与体温重度中毒病例常有血压下降,应用东连碱均可使血压回升,“塔吉化”时常高厂正常水十… 相似文献
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黑色素瘤抗原-n(MAGE-n)基因是本实验室从肝癌细胞系中克隆得到的MAGE家族新成员,该基因与已报道的MAGE家族基因不同,但与MAGE-A家族基因具有同源性,与MAGE-6、MAGE-3同源性最高。我们分别检测了MAGE-n在不同组织、细胞中的表达和分布情况,结果发现:在正常肝组织、肝硬化组织及其它非肿瘤组织中未检测到MAGE-n的表达,而在肝细胞癌、胃癌等恶性肿瘤组织中表达率较高,且在其他不同肿瘤中的表达水平有差异。后续研究筛选鉴定出了HLA-A2限制性CTL表位,体内外实验均显示出良好的抗肝癌免疫效应。MAGE-n的这种表达模式和免疫特性与MAGE家族其他基因相同,提示其可作为肿瘤免疫治疗,尤其是肝癌免疫治疗的靶分子,为肝癌的免疫治疗研究提供新的策略。现就MAGE-n的研究进展作以下综述。 相似文献