苦瓜水提取物对诱变剂致突变拮抗作用

目的 探讨苦瓜水提取物的抗突变作用.方法 应用彗星实验及Ames实验对苦瓜水提取物进行抗突变研究.结果 彗星试验2.5,5.0,10.0g/(kg·bw)3个剂量组与阳性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),减少环磷酰胺(CP)引起的细胞DNA损伤;Ames试验5 000,1 667,556μg/皿3个剂量组在+/-S9的条件下,均能不同程度地抑制二氨基芴(2-AF)、敌克松(Dexon)引起的TA98、TA100回变菌落数的增加.结论 在本实验条件下,苦瓜水提取物具有明显的抗突变作用.     

小米多肽对小鼠免疫调节作用

目的研究小米多肽对小鼠的免疫调节作用。方法小米多肽分为高、中、低剂量组,分别为250、500、1 000 mg/(kg.d)喂饲小鼠30 d,通过淋巴细胞转化试验、半数溶血值(HC50)、腹腔巨噬细胞吞噬功能、免疫器官指数的测定,研究小米多肽对小鼠免疫调节作用。结果不同剂量的小米多肽有明显的刺激淋巴细胞转化作用;500、1 000 mg/(kg.d)小米多肽剂量组HC50分别为(171.33±8.77)、(175.91±9.22),吞噬率分别为(59.45±5.16)%、(65.7±4.31)%;吞噬指数分别为(0.83±0.11)、(0.88±0.09),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),脾脏指数和胸腺指数均明显增加(P<0.01)。结论小米多肽具有明显的免疫调节作用。     

小米多肽对小鼠抗疲劳作用

目的 研究小米多肽对小鼠的抗疲劳作用.方法 小米多肽分为0.2、0.4、0.8 g/(kg·d)高、中、低剂量组,喂饲小鼠30 d,观察小鼠负重游泳时间,测定肝糖原和血清尿素氮含量.结果 0.4、0.8 g/(kg·d)小米多肽剂量组小鼠负重游泳时间与阴性对照组比较分别增加4.45和10.51 min(P ＜0.01),小鼠运动过程中肝糖原含量分别为(9.83±0.10),( 10.15±0.21) mg/g,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),血清尿素氮的含量明显减少(P＜0.01).结论 小米多肽对小鼠有明显的抗疲劳作用.     

果蝇硒蛋白D-SelK原核表达及多克隆抗体制备

目的:克隆编码果蝇硒蛋白D-SelK结构基因并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗D-SelK的抗体。方法:利用PCR从pGM-T-D-SelK质粒中扩增D-SelK基因,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-D-SelK,以重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,通过变性、电泳纯化D-SelK蛋白,SDS-PAGE和Westem blot方法鉴定目的蛋白的表达;以表达的D-SelK蛋白免疫家兔,制备抗D-SelK的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果:扩增了D-SelK基因,克隆于表达载体pGEX-6p-1中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出目的蛋白,纯化后免疫家兔,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶51 200以上,且具有良好的特异性。结论:已成功构建D-SelK基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗D-SelK抗体,效价及特异性均良好,这为进一步研究功能特异性的D-SelK提供了有效的手段。     

TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

 目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成TAT序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。