胰蛋白酶抑制剂抗血管生成实验研究

近年来已有研究证明,尿胰蛋白酶抑制剂对乳腺癌细胞降解细胞外基质和小鼠Lewis肺癌的转移有明显地抑制作用[1,2].国内已有文献报道,牛肺胰蛋白酶抑制剂对B16黑色素瘤、Lewis肺癌实验性肺转移也有明显地抑制作用[3,4].本文为进一步探讨其作用机制对牛肺胰蛋白酶抑制剂抗血管生成实验研究报道如下.     

用金标免疫层析法对恶性肿瘤患者弓形虫感染的调查

用金标免疫层析法检测临床多种恶性肿瘤1206例,弓形虫抗体阳性率为6.72%(81/1206),健康体检者852例,阳性率为2.82%(24/852),差异有显著性(P<0.01),表明恶性肿瘤患者有继发弓形虫病的高度危险。     

人群弓形虫感染及其检测方法的重要性

弓形虫感染是最常见的一种人畜共患寄生虫病。本文主要从弓形虫病的感染流行情况和实验诊断方法的优缺点进行综述,以期对弓形虫的防治工作有所裨益。     

人甲状腺髓样癌细胞株的研究进展

甲状腺髓样癌是常见的头颈部恶性肿瘤,也是近年来发病率增加最快的恶性肿瘤之一,近年来对其基础研究较为关注。本文复习有关文献,对已建株的人甲状腺髓样癌细胞株(TT细胞株)的特性及研究进展全面总结,以期对临床及药物的研发提供帮助。     

金标法快速检测血清β2-MG在糖尿病和高血压早期肾功能损伤中的应用

目的 探讨金标法快速检测血清β2微球蛋白(β2-MG)在糖尿病及高血压早期肾功能损伤中的应用.方法 收集高血压、糖尿病及体检健康人群的血清 ,用金标法测定β2-MG ,同时用全自动仪器检测β2-MG、血肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN)水平.结果 金标法与自动仪器法检验血中β2-MG阳性率比较 ,差异无统计学意义(P＞0 .05).金标法检测糖尿病组、高血压组β2-M G阳性率分别为23 .72% 、15 .4% ,均明显高于对照组(5 .07% ) ,差异有统计学意义( P＜0 .05 ).β2-M G阳性糖尿病组中血BUN、SCr水平明显低于β2-MG阴性糖尿病组(P＜0 .05).结论 金标法测血清β2-MG与仪器法一致 ,能较早地反应糖尿病和高血压患者肾功能损伤情况 ,适合家庭及床旁肾功能的动态监测.     

再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK 293T细胞中的表达、纯化

目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV (regenerating islet-derived protein IV, Reg IV)。方法 根据NCBI数据库REG4基因序列进行基因优化、合成,将其克隆至pCDNA3.4载体并进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂聚乙烯亚胺（polyethylenimine, PEI）将pCDNA3.4-REG4质粒瞬时转染至HEK 293T细胞（实验组）,同时以pEGFP-C1质粒作为转染对照组,未转染重组质粒的HEK 293T细胞作为空白对照组。荧光显微镜观察转染对照组转染效率,分别收集实验组及空白对照组细胞和细胞培养液上清,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）与免疫印迹试验（Western-Blot,WB）检测Reg IV蛋白表达水...     

抗人β2微球蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的：制备抗人β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）单克隆抗体并对其进行鉴定。方法：用高纯度的β2-MG免疫BALB／C小鼠，按常规技术制备针对β2-MG不同抗原表位的单克隆抗体，并对其进行纯化，测定抗体亚类、抗原表位分析等。结果：筛选出10株抗人β2-MG杂交瘤细胞株，ELISA间接法证实这组单克隆抗体仅与β2微球蛋白反应，而与其他蛋白无交叉反应，IgG亚类鉴定6株为IgGl，2株为IgG2a，1株为IgA，1株为IgM。结论：获得特异性的抗人β2微球蛋白单克隆抗体，为试剂盒的开发研究奠定基础。     

兰州地区不同临床类型恶性肿瘤患者弓形虫抗体IgG的ELISA检测结果分析

本文就运用间接ELISA法对兰州地区372例不同临床类型的恶性肿瘤患者血清中弓形虫IgG抗体进行检测,以932例正常体检组作为对照,对伴发弓形虫病的阳性率进行统计,得出兰州地区不同临床类型恶性肿瘤患者伴发弓形虫的特点及规律,补充了兰州地区此项研究的空白。     

构建靶向毒素血管内皮生长因子抗体-白喉毒素突变体

目的 探讨以血管内皮生长因子（VEGF）抗体为导向,白喉毒素突变体（CRM9）作效应部分,构建靶向毒素VEGF抗体-CRM9,为直接杀伤肿瘤细胞寻找新的药物.方法 应用异型双功能连接剂甲基丙烯酸甲酯丁二烯苯乙烯三元共聚物（MBS）连接兔抗人VEGF多抗和CRM9,制备成新的构建蛋白,Sephacryl S-300分离纯化后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳证明二者的结合情况.对构建蛋白抗体活性采用酶联免疫法检测,生物毒性应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）方法检测.结果 构建蛋白通过分离并电泳后,出现明显增粗的分子量为116 000新条带,位于CRM9和VEGF条带前方.构建的蛋白结合体中抗体活性检测,VEGF抗体与CRM9按1：1制备的蛋白结合体,抗体活性与VEGF抗体对照差异无统计学意义（P＞0.05）,按1：5和1：8两种比例制备的蛋白结合体,抗体活性降低与VEGF抗体对照差异有统计学意义（P＜0.01）.构建的蛋白结合体中CRM9毒性检测,VEGF与CRM9按1：1比例制备蛋白结合体杀伤效果与空白对照组差异有统计学意义（P＜0.01）,与CRM9组差异无统计学意义（P＞0.05）,CRM9组杀伤效果与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 MBS能将VEGF抗体与CRM9连接构建成新的蛋白结合体,结合体中CRM9生物毒性和VEGF抗体活性不变.这将为进一步的免疫毒素抗肿瘤的各项研究奠定了基础.