血细胞分析及相关参数对登革热早期诊断的意义

目的分析登革热初诊患者的血象及探讨早期诊断指标。方法采用贝克曼库尔特DxH 800血细胞分析仪,对广医附一院2014年10月疑似登革热初诊患者的血象进行分析,收集血常规结果及中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞每项参数的平均值和平均值的标准差,运用SPSS软件对其进行统计学分析,探讨具有早期诊断意义的指标。结果登革热阳性组与登革热阴性组比较,白细胞、血小板、淋巴细胞参数、单核细胞参数具有显著性差异,MoV、MoV-SD、LYV、LYV-SD诊断登革热的正确度均较高(AUC均大于0.8)。结论绝大部分初诊登革热患者MoV、MoV-SD、LYV、LYV-SD显著增高,对登革热的早期诊断及防止漏诊误诊具有重要意义。     

Roche Modular PPI全自动生化分析仪测定Glu的性能评价

目的评价罗氏Modular PPI全自动生化分析仪测定Glu的基本工作性能。方法对同一批号正常水平、病理水平质控血清在同一天内随标本平行测定20次,计算批内不精密鹿每天各测定1次,测定20天,计算批间不精密度。根据卫生部2010年室间质评的数据及批内、批间不精密度,计算出扩展不准确度。通过对高浓度样品按一定比例稀释,测定样品中Glu的含量,验证厂家的线性范围。结果正常水平、病理水平质控血清批内不精密度分别为0．49％、0．24％;批间不精密度分别为0．58％、0．27％;不准确度分别为±3．1％、±2．2％。线性范围为0～32mmol／L。结论通过对不精密度、不准确度和线性范围实验观察,认为罗氏Modular PPI全自动生化分析仪Glu测定的性能可以满足临床化学实验室的要求。     

白假丝酵母菌吡咯类药物相关耐药基因的突变和表达

目的：了解白假丝酵母菌吡咯类药物相关耐药基因的突变和表达情况。方法采用裂解法提取白假丝酵母菌 DNA,扩增 ERG11基因后测序,选取3种吡咯类药物（氟康唑、酮康唑、咪康唑）均耐药的全耐药菌株DNA 片段进行 TA 克隆;利用荧光定量 PCR 技术对 CDR1、CDR2、MDR1基因表达的 mRNA 进行相对定量,比较耐药株与敏感株表达水平的差异。结果37株耐吡咯类白假丝酵母菌中,ERG11存在41个碱基突变位点,其中20个同义突变,21个错义突变,发现新变异：N12I、Y13F、S16F、V36F、V51L、G129E、T123I、E194K、K344N、E517G、V234A;CDR1基因2－ΔΔCt值敏感株为1．09±0．27,耐药株为1．46±0．24,两者比较差异有统计学意义（P ＜0．05）;敏感株与耐药株间 CDR2和 MDR1基因的表达水平比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论白假丝酵母菌耐药机制较为复杂,可能与 ERG11某些位点突变导致的氨基酸变异和 CDR1高表达有关,CDR2和 MDR1表达与耐药关系有待进一步研究。     

保妇康栓对宫颈癌细胞SiHa体外增殖和凋亡的影响

目的研究中药保妇康栓含药血清在细胞水平对宫颈癌SiHa细胞体外增殖及凋亡的影响,探讨保妇康栓抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制。方法中药保妇康栓含药血清培养液作用于SiHa细胞24、48、72h,并设立阴性及阳性(西药含药血清)对照组,采用CCK8及流式细胞分析技术进行细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡检测。结果保妇康栓对宫颈癌SiHa细胞增殖具有抑制作用,24h抑制作用最强。与阴性对照组比较,保妇康栓组SiHa细胞中G0/G1期细胞显著增多,S期细胞显著减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论保妇康栓的作用可能是通过阻断细胞从G0/G1期向S期分化,从而抑制宫颈癌SiHa细胞增殖并诱导凋亡来抑制肿瘤生长。     

手术患者208例血液回收与回输

目的:探讨手术患者血液回收与回输的回收率及回输自体血后凝血功能、电解质与全血细胞等指标的变化.方法:采用美国autologATM自体血液回输机对术野出血及术中创面引流血液进行回收处理后,再回输给患者,并对患者输血前后的凝血功能、电解质与全血细胞进行分析.结果:不同手术血液平均回收量和平均回收率存在差异(P＜0.05),其中神经外科的血液平均回收量和平均回收率最高,分别为(680.3±95.8)mL和76.4%;手术患者回输自体血后,血浆凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间延长的发生率为61.1%,Na+、Cl-、K+异常率为23.1%,不同手术间差异均无显著性(P＞0.05);白细胞升高和血小板下降者分别为26.4%和23.6%,不同手术间差异有显著性(P＜0.05).结论:各种手术血液平均回收量和平均回收率存在差异,回输自体血后凝血功能、电解质与全血细胞等指标可出现异常改变,提高回收血液的质量能减少输入回收血液产生的不良反应.     

耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG基因家族突变研究及唑类药物抑菌分析

目的研究耐氟康唑阴道白色念珠菌ERG11、ERG3和ERG5基因突变,及分离株对酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑的抑菌分析。 方法收集221株经质谱仪鉴定为白色念珠菌的菌株,微量肉汤稀释法进行氟康唑、酮康唑、克霉唑、硝酸咪康唑药敏试验,得出四种药物对白色念珠菌最小抑菌浓度（MIC）值;根据CLSI M27-A3筛选出氟康唑非敏感白色念珠菌,提取DNA后扩增ERG11、ERG3与ERG5基因,进行双向测序,与GenBank中的标准菌株基因序列（SC5314和AF069752）进行BLAST比对分析。 结果白色念珠菌对氟康唑耐药率为9.05%;对白色念珠菌MIC值进行比较,酮康唑的MIC值均低于克霉唑和硝酸咪康唑,差异有统计学意义（P＜0.05）。克霉唑与硝酸咪康唑比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。ERG11、ERG3、ERG5分别发现18、17、12种错义突变。 结论酮康唑对白色念珠菌抑菌率总体比克霉唑、硝酸咪康唑强。耐氟康唑白色念珠菌ERG11、ERG3、ERG5基因出现若干错义突变位点,某些位点突变导致氨基酸变异可能与耐药产生有关。     

不同检测系统泌乳素测定结果的偏倚评估与可比性研究

目的:通过对泌乳素(PRL)在不同检测系统的测定进行方法比对和偏倚评估,探讨不同检测系统间PRL测定结果的可比性,为不同实验室检验结果的互认和实验室认可提供实验数据.方法:参考NCCIS的EP9-A2文件,取拜耳、德普不同水平的质控物,以及35例不同浓度的患者新鲜血清,在4个不同的化学发光免疫检测系统(拜耳ACS180、拜耳CENTAUR、强生ECI、德普immulite-1000仪器及其配套的校准物、质控物和试剂)上进行PRL检测,以澳大利亚室间质量评价标准为标准,判断不同检测系统测定结果的可比性.结果:经配伍组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清PRL测定结果在各检测系统的组间差异均有显著性(P＜0.01);各检测系统 PRL测定结果的信度系数均接近1;各检测系统间的相关系数均＞0.975.以强生ECI系统作为目标检测系统,对其他检测系统作临床可接受性能评价,拜耳ACS180、拜耳CENTAUR、德普immulite-1000检测系统临床均可接受.结论:4个检测系统测定PRL结果的精密度符合临床要求,临床可接受性能评价具有可比性.当用两个以上的检测系统检测同一检验项目时,应进行方法比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性.     

生殖道白色念珠菌耐吡咯类药物的基因表达

目的了解生殖道白色念珠菌耐吡咯类药物基因的表达情况。方法收集真菌性阴道炎患者分泌物标本93份,分离白色念珠菌后用纸片扩散法进行药敏试验,裂解法提取白色念珠菌的吡咯类药物耐药株和敏感株的总RNA,逆转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR技术检测白色念珠菌多药耐药基因CDRl、CDR2、MDRl的表达情况。结果共培养出59株白色念珠菌,18株热带念珠菌,10株克柔念珠菌,6株光滑念珠菌;白念珠菌中37株对氟康唑、酮康唑、咪康唑不同程度耐药,耐药率分别为16.7%、18.3%、51.7%;白念珠菌耐药株CDR1基因的2~(-△△Ct)为1.46±0.24,敏感株为1.09±0.27,两组比较,差异有统计学意义(t=-4.22,P=0.001);CDR2及MDRl基因的表达差异均无统计学意义(P=0.170,P=0.800)。结论白色念珠菌耐药机制较为复杂,可能与CDR1高表达有关,CDR2和MDR1表达与耐药性的关系有待进一步研究。     

黄连对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列基因表达影响

目的研究不同浓度黄连浸液对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列（ALS）基因mRNA表达量的影响。 方法采用阴道白色念珠菌耐药株为研究对象,经甲基四氮盐（XTT）减低法筛选形成生物膜的白色念珠菌。在不同浓度黄连浸液干预下,通过RT-PCR检测生物膜黏附阶段ALS3/ALS4基因表达,观察黄连对白色念珠菌生物膜形成相关基因表达的抑制作用。 结果当黄连浸液浓度为125 mg/L时,对白色念珠菌生物膜的形成阶段和成熟阶段的抑制率分别为88.6%和82.9%;黄连浸液干预下生物膜状态白色念珠菌黏附相关基因ALS3/ALS4的mRNA表达与药物浓度成负相关;当黄连浸液浓度大于4.023 mg/L时,黄连浸液干预下ALS3/ALS4的mRNA表达相对量与阴性对照比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论黄连可以抑制白色念珠菌黏附相关基因ALS3 /ALS4的mRNA水平表达且呈剂量依赖关系。     

荧光定量PCR检测Kif2a在男性精液中的表达

目的:了解男性精液Kif2a基因的表达情况并探讨其对男性不育的影响.方法:收集精液标本70例并对其进行除杂处理,提取精液细胞总RNA,测定其浓度后逆转录为cDNA,荧光定量PCR检测Kif2a mRNA表达量.根据WHO第5版人类精液检验与处理实验室手册中精液各参数(精子存活率、精子活力和精子密度)的参考范围对样本进行筛选分组(正常组和异常组).结果:精子存活率及精子活力正常组的Kif2a mRNA表达量均是其异常组的7.54倍,差异有统计学意义(P<0.05);精子密度组正常组Kif2a mRNA表达量与异常组的表达量差异无统计学意义(P>0.05).结论:Kif2a表达低下的精母细胞可能因为精子细胞纺锤体未能形成,造成精子活力与活率低下,对受孕产生影响.