血清肌红蛋白两点一步法ELISA的建立和初步临床应用

血清肌红蛋白两点一步法ＥＬＩＳＡ的建立和初步临床应用朱鼎宏，曾瑞云，郑佐娅，王红，陶义训肌红蛋白（Ｍｂ）是一种含亚铁血红素的低分子色素蛋白，心肌内含量丰富，当心肌受损时，可迅速从受损细胞释放至血液中［１］，因此检测血清Ｍｂ能协助诊断急性心肌梗塞（Ａｃ...     

应用ELISA和滴金免疫测定法检测血清肌红蛋白

从人心肌提取肌红蛋白（ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ，Ｍｂ）抗原，制备抗Ｍｂ血清和单克隆抗体，在此基础上建立了检测血清Ｍｂ的ＥＬＩＳＡ和滴金免疫测定法（ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＤＩＧＦＡ）。ＥＬＩＳＡ法检测范围２５～８００ｎｇ／ｍｌ。批内ＣＶ＜５％，批间ＣＶ＜７％。健康男、女献血员各３２例和７４例老年人，血清Ｍｂ测定结果，参考值上限分别为５５．４０、５０．６７和６５．７５ｎｇ／ｍｌ。１５例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清Ｍｂ含量均大于１３０ｎｇ／ｍｌ．滴金免疫测定法可在５ｍｉｎ内完成检测，Ｍｂ含量＞１００ｎｇ／ｍｌ为阳性。７例ＡＭＩ患者检测结果均为阳性。两种方法结合应用对ＡＭＩ的早期诊断及疗效观察极有价值。     

单克隆抗体两点一步法ELISA检测血清肌钙蛋白T

应用自制的抗ＴｎＴ单抗Ｂ６标记生物素与已包被链霉亲和素的聚苯乙烯微孔板结合,配以抗ＴｎＴ单抗Ｅ９制备的辣根过氧化物酶结合物,建立了检测ＴｎＴ的一步法ＥＬＩＳＡ。检测灵敏度为１ｎｇ／ｍｌ。与国外同类试剂的测定结果相关性良好。相对阳性率７６４％,相对特异性９３％。     

抗人肌红蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定

用纯化的人肌红蛋白（Ｍｂ）抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠通过细胞杂交技术。获得１０株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株．其中３株分泌ＩｇＧ_１亚类抗体，２株为ＩｇＧ_（２ａ），５株为ＩｇＧ_（２ｂ）．间接ＥＬＩＳＡ法证明单抗腹水与Ｍｂ起特异性反应，与人血红蛋白（Ｈｂ）．人白蛋白（Ａｌｂ）无交叉反应．免疫印迹检测结果表明，６株单抗腹水能特异性识别分子量１７ＫＤ的Ｍｂ，抗Ｍｂ单克隆抗体的制备，对于急性心肌梗塞早期诊断很有应用价值．     

一种简便的心肌肌钙蛋白T提纯方法

介绍一种简便的牛心肌肌钙蛋白T提取方法。所得肌钙蛋白T经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和EIA鉴定。为进一步建立血清肌钙蛋白T免疫测定方法创造了条件。