有关组织细胞培养的几个问题

组织细胞培养是现代细胞生物学、分子生物学、医学、肿瘤学、病毒学、免疫学等许多学科广泛运用的一项技术。近年国内许多高等院校、医院、研究机构和生产单位先后设立了组织细胞培养室、实验室,壮大了专业队伍,开展了各项研究,有效地发挥了该项技术的作用。由于专业队伍还比较薄弱,某些实     

撤除粒-巨噬细胞集落刺激因子对TF-1细胞生长的影响

采用MTT实验测定撤除细胞因子后TF—1细胞的增殖活性，经流式细胞仪、透射电镜观察撤除细胞因子对TF—1细胞凋亡的作用及其形态学变化。采用荧光微孔板读数仪测定调亡过程中Caspase—3活性的改变。结果发现，撤除细胞因子后48h，细胞存活率为正常培养时的48．8％；电镜显示TF—1细胞出现了凋亡典型的变化。细胞凋亡率在撤除因子后24h、48h时分别为21．23％和71．36％，TF—1细胞被阻滞在G0／G1期。细胞内Caspase-3活性在撤除因子后12h、36h时明显升高，荧光度分别为6321和17823。结果表明，撤除因子后可导致TF—1细胞凋亡，Caspase-3活化参与了此凋亡过程。另外通过MTT实验观察到一种新型造血刺激因子粒—巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)／白细胞介素3(IL-3)融合蛋白可维持TF-1细胞生长。     

应用中空维纤系统Acusys T-Jr~(TM)中试生产人体肝癌单克隆抗体

近年来,应用杂交瘤技术研制和生产各种有社会效益和经济效益的单克隆抗体已有许多 报道,其中不少产品已作为检测试剂或药剂等出售,在细胞工程技术这个新兴的领域中,这方面工作的前景是不可限量的。     

SHZ－88大鼠乳腺癌细胞系生物学特征

应用流式细胞仪、银染核仁组成区及凝胶电泳等方法进一步观察ＳＨＺ－８８大鼠乳腺癌细胞系的生物学特性。流式细胞仪的增殖指数（ＰＩ）显示，ＳＨＺ－８８细胞明显高于正常大鼠乳腺上皮细胞（Ｐ＜０．０１），反映ＤＮＡ相对含量的ＤＩ也明显高于正常大鼠乳腺上皮细胞（Ｐ＜０．０１）；且癌细胞具有流式ＤＮＡ异倍体性以及两个不同来源的ＤＮＡ干系；ＳＨＺ－８８细胞核内银染核仁组成区（ＡｇＮＯＲｓ）颗粒数为６．０７±２．４６，而正常大鼠乳腺上皮细胞仅为２．２３±０．９４（Ｐ＜０．００１）。葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ－６－ＰＤ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及核苷磷酸化酶（ＮＰ）等同工酶凝胶电泳定性分析均属大鼠型。免疫组化法显示雌激素受体阳性。     

表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185neu/c-erbB-2单克隆抗体及其性质研究

目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。     

掌叶半夏有效提取物单独或与顺铂联合对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用

目的观察中药掌叶半夏有效提取物(PE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及PE对HeLa细胞对顺铂(DDP)敏感性的影响,以期寻找药物治疗宫颈癌更完善的途径。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别用PE、DDP及DDP PE处理细胞;用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果PE及DDP对宫颈癌HeLa细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量PE可加强DDP对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞术检测结果显示PE作用后HeLa细胞呈现出凋亡,且随着作用时间的延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论PE对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,同时能提高HeLa细胞对顺铂的敏感性。     

人体肝癌宿主肝细胞系(QSG—7701)的培养及其与肝癌细胞的比较(研究简报)

 人体肝癌宿主肝细胞的培养,不仅为肝癌细胞、正常肝细胞的比较研究提供了材料,且有可能观察到肝细胞演变为肿瘤细胞的过程及癌变的一些早期特征。     

应用大载体-生物反应罐系统生产抗人B型红细胞单克隆抗体

应用体外细胞大量繁殖系统生产抗人B型红细胞单克隆抗体,结合细胞生长和分泌抗体的特性,设置离线和在线参数等,对细胞增殖状态和生产抗体进行连续控制。一次运转52天,共收获含抗体培液23.25L,血凝效价1:64～1:512,为批量生产以单克隆抗体作为人血型定型试剂提供了条件。