NEW ANTIMICROBIAL SENSITIVITY TESTS OF BIOFILM OF STREPTOCOCCUS MUTANS IN ARTIFICIAL MOUTH MODEL

To develop a new antimicrobial sensitivity test model for oral products in vitro.Methods A biofllm artificial mouth model for antimicrobial sensitivity tests was established by modifying the LKB chromatography chamber. Using sodium fluoride and Tea polyphenol as antimicrobial agent and Streptococcus mutans as target, sensitivity tests were studied. Results The modeling biofilm assay resulted in a MIC of l. 28mg/ml for fluoride against S. mutans, which was 32 times the MlC for broth maco-dilution method. The differential resistance of bacteria bioflim to antimicrobial agent relative to planktonic cells was also demonstrated. Conclusion The biofilm artificial mouth model may be useful in oral products test.     

变异链球菌luxS基因对多糖基质代谢的影响

目的:利用变异链球菌luxS基因敲除的突变株,研究该基因缺陷对于生物膜多糖基质的影响。方法:通过向生物膜培养悬液中加入与细菌直径相近的磁性小珠,利用这些小珠由于生物膜约束而在磁场中位移受限的原理,采用生物膜定量分析仪,定量比较luxS突变株与野生株在利用外源性碳水化合物合成生物膜多糖基质能力方面的差异。采用SPSS 10.0软件包对实验数据,进行Dunnet双侧t检验。结果:变异链球菌luxS基因突变株与野生株均可利用碳水化合物合成胞外多糖基质,且外源性糖的加入可显著促进生物膜的形成。在加入1%蔗糖时,2菌株生物膜均在1h内迅速形成,而两者之间无显著差异。在加入1%葡萄糖时,两菌株的生物膜形成速度均有所加快,突变株的改变则更为明显。结论:luxS基因参与调节细菌对多糖基质代谢的过程,而其对于生物膜形成的影响也更多是通过调节多糖基质代谢实现的。     

激光扫描共聚焦显微镜观察碱性环境对粪肠球菌生物膜的影响

目的:比较不同碱性条件对生物膜状态粪肠球菌的影响。方法:制备粪肠球菌生物膜,分别用pH值为7、9和11的TSB培养液作用2 h后,用激光扫描共聚焦显微镜观察粪肠球菌生物膜的变化。结果:pH值由7升到9时,生物膜内、中、外各层活菌比例虽有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05);当pH值11时,各层活菌比例虽然均较pH值为7和9时明显减少(P<0.05),但仍有大量活菌存在。结论:粪肠球菌对碱性环境具有强的耐受性,pH值为7～9时,对生物膜状态粪肠球菌无明显影响。     

变异链球菌LuxS缺陷株甲基循环通路的恢复构建

目的:以变异链球菌LuxS缺陷株为模型,构建其密度感应缺陷的甲基循环恢复株。方法:以LuxS为阳性表达对照,通过在变异链球菌LuxS缺陷株中异源表达SahH,实现其代谢通路的恢复构建。通过Western 印迹、反转录PCR和信号分子AI-2分泌检测,验证目的蛋白的表达。采用SAS8.0软件包对数据进行统计学分析。结果:Western 印迹检测2种蛋白在大肠杆菌中均得到正确表达,验证了克隆载体的正常表达能力;反转录PCR验证了变异链球菌LuxS缺陷株中luxS及sahH mRNA的存在;发光实验证实LuxS阳性表达对照株AI-2的分泌能力恢复。结论:成功构建变异链球菌LuxS缺陷的代谢恢复株,为探讨LuxS的调控机制提供了分子生物学工具及实验对照。     

根管充填糊剂对根管常见混合细菌的体外抑制作用

目的：评价3种根管充填材料在体外根充模型中对根管常见混合细菌的抑制作用。方法收集因正畸治疗而新鲜拔除的下颌双尖牙48颗,常规制备根管,随机分为4组（每组12颗）。实验组分为3组,分别用AH-Plus糊剂、Vitapex糊剂和氧化锌丁香油糊剂加牙胶尖作根管充填,对照组不作充填。根充后行冷热循环处理。使用国际参考菌株变异链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、殊异韦永氏菌、牙龈卟啉菌和核梭杆菌。将等体积混合制备成的混合菌液封入根管。孵育后截取根上1/3、根中1/3、根尖1/3,进行细菌采样、培养,观察细菌菌落数。利用ANOVA （P=0.05）软件,分析各组间的差异。结果所有的样本均培养出细菌。粪肠球菌在根管的所有部位均有较高的检出率。根管残留细菌总数比较,在根上1/3 Vitapex糊剂抑菌作用优于AH-Plus,而在根尖1/3 AH-Plus糊剂抑菌作用优于Vitapex。结论根尖1/3处的抑菌作用而言,AH-Plus糊剂优于Vitapex糊剂和传统的氧化锌丁香油糊剂,更具临床意义。     

粘性放线菌Ⅱ型菌毛粘附与凝集活性的研究

目的:研究粘放菌Ⅱ型菌毛在细菌粘附与凝集过程中的作用。方法:制备粘放菌Ⅱ型菌毛多克隆抗体抗血清,检其对粘放菌变异株5519、5951、T14V的粘附抑制率,同时肉眼观察它对粘放菌与血链菌34间凝集反应的影响。结果:抗Ⅱ型毛多克隆抗体能减少5519、5951、T14V对玻壁的粘附量,并抑制5951、T14V与血链菌34间的凝集反应。结论:粘放菌Ⅱ型菌具有粘附与凝集的活性。     

假牙清洁剂的有效性测试

目的　用体外检测法比较两种假牙清洁剂清洁义齿的有效性。方法　采用分光光度法和色度测定法分析了上海牙膏厂有限公司提供的两种假牙清洁剂的有效性。结果　色度测定法的Shade(遮色值 )变化比较明显。假牙清洁片组的Shade变化均值是 1.875 ,假牙清洁剂组的Shade变化均值是 0 .5 6 2 5 ,两者具有显著差异 (P <0 .0 1)。两种假牙清洁剂的光吸收度值多呈一个逐渐上升的趋势。假牙清洁片的光吸收度值高于留兰香假牙清洁液。结论　本研究使用的假牙清洁片的清洁效果优于留兰香假牙清洁剂 ,建议清洁假牙的作用时间为一周以上。本实验建立的体外检测假牙清洁剂清洁义齿效率的方法可行。色度测定法优于分光光度法     

基托材料对变形链球菌ftf基因表达的影响

目的:比较不同基托材料(热固性基托树脂,钴铬合金)表面变形链球菌ftf基因表达的差异.方法:将各组材料分为唾液覆盖组和未覆盖组,于体外厌氧环境下(95%N2, 5%CO2, 37 ℃,16 h)在材料表面形成变形链球菌生物膜,收集生物膜菌体,提取总RNA,逆转录.实时荧光定量PCR方法检测各组样本ftf基因的表达差异.结果:唾液覆盖组中,材料之间基因表达差异无显著性.唾液未覆盖组中,热固性基托树脂表面ftf表达最高(P<0.05);热固性树脂和钴铬合金在唾液覆盖后的ftf表达量明显降低(P<0.05).结论:不同材料表面变形链球菌ftf表达量存在一定的差异,唾液覆盖可减少差异.     

磷酸锆载银抗菌剂对种植体周炎致病菌抗菌效能研究

目的研究磷酸锆载银抗菌剂对种植体周炎致病菌的抗菌效能。方法将载银磷酸锆抗菌剂用无菌中心脑浸液(BHI)培养基稀释成浓度从10mg/mL到0.020mg/mL递减的抗菌剂应用液,与1×106CFU/mL的牙龈卟啉单胞菌(Pg)、具核梭杆菌(Fn)、伴放线放线杆菌(Aa)标准菌液混合,厌氧恒温培养48h,划线接种后计数菌落数,取无细菌生长的最低抗菌剂浓度为其最小杀菌浓度。结果磷酸锆载银抗菌剂对Pg、Fn和Aa的最小杀菌浓度分别为0.039、0.313、0.625mg/mL。抗菌剂对三种细菌杀菌能力由强到弱依次为Pg>Fn>Aa。结论磷酸锆载银抗菌剂对Pg、Fn和Aa均具有杀菌效能,可用于对抗种植体周炎的致病菌。     

40种中药浸液对幽门螺旋杆菌的体外抑制作用

OBJECTIVEIn search of efficiency substance of Chinese herbs, which could be used in preventing and treating Helicobacter pylori diseases. METHODExtracted efficiency substance from Chinese herbs and Identified by antimicrobial sensitivity tests performed o