腺病毒介导靶向NF-κB基因的shRNA对体外食蟹猴子宫内膜细胞增殖活性的影响

目的合成高特异性靶向NF-κB基因的shRNA腺病毒载体,观察其对体外培养的食蟹猴子宫内膜细胞的增殖活动是否具
有直接的抑制效应。方法设计携带有NF-κB-p65基因及空载基因的shRNA腺病毒载体,体外培养食蟹猴子宫内膜细胞,分成
实验组及对照组,实验组转染携带NF-κB-p65 shRNA的腺病毒,对照组转染携带空载基因的腺病毒,共培养后观察有关细胞增
殖活性如凋亡蛋白及细胞周期的改变情况。结果腺病毒载体PCR和测序结果与预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为
1.58×1011 U/ml。NF-κB-p65-shRNA腺病毒感染食蟹猴子宫内膜细胞后,实验组子宫内膜细胞凋亡蛋白的表达水平明显高于阴
性对照组（P<0.05）;实验组凋亡细胞较对照组明显增多,进入细胞分裂期细胞数明显少于对照组（P<0.05）。结论携带NF-κB
基因的腺病毒体外感染食蟹猴子宫内膜细胞后可加速子宫内膜细胞的凋亡,并抑制子宫内膜细胞的增殖,为后期该基因在食蟹
猴子宫内膜异位症模型上的研究提供理论基础。
     

IL-1β诱导子宫内膜异位症间质细胞activin A及相关因子的表达

目的探讨白细胞介素1β（IL-1β）对子宫内膜异位症（内异症）在位内膜间质细胞activin A、follistatin、cripto的表达及蛋白
分泌的影响。方法分离培养内异症在位内膜间质细胞,加入不同浓度IL-1β（250 pg/ml,500 pg/ml,750 pg/ml）干预。实时荧光
定量PCR技术及酶联免疫吸附试验,分别从mRNA及蛋白水平检测activin A、follistatin、cripto 的变化。结果经IL-1β刺激,
activin A及follistatin mRNA表达及蛋白分泌较对照组呈IL-1β剂量依赖性增加;cripto mRNA表达较对照组呈IL-1β剂量依赖
性增加。结论IL-1β可影响内异症在位内膜activin A、follistatin、cripto的分泌及表达。
     

妊娠合并泌尿系统感染的诊断与治疗

随着孕周的增加,泌尿系统的解剖和生理功能不断发生适应性改变,这些改变常导致泌尿系统疾病的发生,尤其是感染性疾病。本文就妊娠合并泌尿系统感染疾病的分类、诊断及治疗,供临床医师参考。     

自然妊娠中期合并卵巢过度刺激综合征一例并文献复习

卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)是促性腺激素诱发排卵治疗中所导致的医源性并发症,无超促排卵史的OHSS在临床上比较罕见,其发病机制仍尚未完全明确。本文就一例先天性子宫畸形,自然受孕并在孕中期发生卵巢过度刺激综合征的孕妇进行病例报道和讨论。     

shRNA靶向抑制NF-κB基因治疗食蟹猴子宫内膜异位症的研究

目的 观察靶向NF-κB基因的短发夹状RNA(shRNA)在治疗食蟹猴子宫内膜异位症的效果,分析NF-κB基因在食蟹猴子宫内膜异位症发生发展中的作用.方法 构建食蟹猴子宫内膜异位症模型,同时合成高特异性的靶向NF-κB基因的shRNA腺病毒及其阴性对照空载shRNA腺病毒.将建模成功的食蟹猴分成实验组、阴性对照组及单纯建模组,将NF-κBshRNA腺病毒在腹腔镜下直接注入实验组食蟹猴子宫内膜异位病灶内,阴性对照组在病灶内注射空载shRNA腺病毒,单纯建模组病灶内注射生理盐水.注射腺病毒后4周,腹腔镜下观察病灶变化,取各组子宫内膜异位病灶进行CD34免疫组化染色检测微血管密度,并采用蛋白印迹法(western blot)检测NF-κB及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达.结果 成功构建了食蟹猴子宫内膜异位症模型.实验组食蟹猴异位病灶较前萎缩,其微血管密度(0.002 0±0.000 3)较阴性对照组(0.021 9±0.002 6)、单纯建模组(0.024 5±0.003 3)明显减小,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组食蟹猴NF-κB蛋白的表达水平(0.338±0.174)较阴性对照组(0.678±0.021)、单纯建模组(0.645±0.098)明显下降,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).实验组食蟹猴PCNA蛋白的表达水平(0.37±0.17)低于阴性对照组(0.57±0.26)、单纯建模组(0.57±0.28),分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NF-κB shRNA通过靶向抑制NF-κB基因的表达后,能够抑制食蟹猴子宫内膜异位症的进展,抑制子宫内膜异位病灶的血管生成能力,减弱异位子宫内膜细胞的增殖能力.