高三尖杉酯碱通过mTOR通路诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡

目的:观察高三尖杉酯碱(Homoharringtonine,HHT)对人CML细胞株K562的增殖及凋亡的影响,并从mTOR通路探索HHT抗CM L效应的作用机制。方法:采用不同浓度HHT或联合mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)处理K562细胞,用CCK-8法检测细胞增殖抑制活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测BCL-6、Caspase-3及mTOR通路相关蛋白的表达水平,RT-PCR法检测BCL-6 mRNA表达水平。结果:HHT可抑制K562细胞的增殖并促进其凋亡,且呈浓度依赖性(r=0.970)。随着HHT作用浓度的增加,mTOR通路相关蛋白表达水平升高(r=0.908),而BCL-6 mRNA及蛋白的表达水平下降(r_(mRNA)=-0.961,r_(protein)=-0.981)。与HHT单用组相比,联用RAPA可显著下调mTOR及Caspase-3的表达,并上调BCL-6表达。结论:HHT可通过激活mTOR通路抑制抗凋亡BCL-6蛋白的表达,进而诱导CML细胞凋亡。     

短周期大剂量地塞米松+小剂量地塞米松维持治疗特发性血小板减少性紫癜的疗效

目的:观察短周期大剂量地塞米松+小剂量地塞米松维持治疗特发性血小板减少性紫癜的疗效、不良反应和并发症.方法:地塞米松40 mg/d,分2次口服,连用4 d,每2周为1个疗程,连用3个疗程.大剂量地塞米松使用间歇期间,22例患者常规采用地塞米松0.035 mg/(kg·d)维持治疗(HD-RM组),23例患者仅在血小板≤20×109/L时或患者仍有1级以上出血时采用地塞米松0.035 mg/(kg·d)维持治疗(HDSM组),采用甲泼尼龙冲击并维持治疗的22例患者为对照组(甲泼尼龙组).结果:(1)HD-RM组3个疗程结束时的有效率高于HD-SM组(81.8%vs 65.2%,P<0.05).(2)HD-RM组3个疗程结束时的有效率与甲泼尼龙组相当(81.8%vs 77.2%,P>0.05).但HD-RM组的不良反应和并发症的发生率及平均住院费用明显低于甲泼尼龙组;(3)HD-RM组和HD-SM组第3个疗程结束时的有效率高于第1和第2个疗程结束时;(4)HDRM组患者每个疗程结束后的有效率均高于HD-SM组;(5)疗程结束后第1、2、3、4个月HD-RM组患者复发平分别为18.2%、18.2%、27.3%和31.8%,均低于HD-SM组和甲泼尼龙组.结论:短周期3个疗程方案是治疗成人初诊特发性血小板减少性紫癜的有效方法,大剂量地塞米松使用间歇期小剂量地塞米松维持治疗有助于提高患者的远期疗效,同时不良反应和并发症的发生率较小.     

免疫分型在-些特殊类型急性白血病诊断中的应用

目的 报告免疫分型在一些特殊类型急性白血病(AL)诊断中应用的重要意义.方法 应用流式细胞术(FCM)分析369例AL的免疫表型.结果 369例AL中有2例诊断为急性髓细胞白血病(AML)·M0,1例诊断为AML-M7,0例诊断为急性杂合性白血病(HAL),5例诊断为急性未分化型白血病(AUL),2例诊断为侵袭性NK细胞白血病.结论 AML-MO、AML-M7、HAL、AUL和侵袭性NK细胞白血病等特殊类型AL的诊断依赖于细胞免疫表型分析.     

输注淋巴细胞防治造血干细胞移植后白血病复发的观察

目前能治愈白血病的最有效方法仍然是异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT),但对于移植后复发的病例,过去只能采用二次移植,其疗效多数都不理想。自从1995年Kolb[1]等报道了异基因骨髓移植(all-BMT)治疗慢性粒细胞白血病患者复发,经过供者淋巴细胞输注(DLI)后再次获得血液学和细胞遗传学缓解以来,许多研究报告已经肯定DLI对治疗和预防各类白血病Allo-HSCT后复发有很好的疗效。我院于2004年3月至2007年1月应用DLI治疗10例Allo-HSCT后患者,现报道如下。资料和方法1.病例资料10例均为我院2004年3月至2007年1月住院患者,其中慢性粒细胞…     

康莱特注射液联合奥沙利铂对SW480细胞株增殖和凋亡的影响

目的:研究康莱特注射液(Kanglaite Injection)联合奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用CCK-8法检测康莱特、L-OHP及其联合作用对SW480细胞的增殖抑制率的影响;FCM法检测2者对SW480细胞周期及凋亡率的影响;免疫细胞化学法和蛋白质印迹法检测2者对凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响。结果:康莱特及L-OHP对SW480细胞增殖均有抑制作用,两药联合具有协同作用(P<0.05),细胞周期被阻滞于G2/M期(P<0.05);康莱特联合L-OHP对SW480细胞的凋亡率为(23.3±3.04)%,明显高于L-OHP单药作用的(9.00±2.14)%及康莱特单药作用的(7.50±0.85)%(P<0.05);免疫细胞化学法及蛋白质印迹法检测均显示康莱特能协同L-OHP抑制SW480细胞中Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论:康莱特可协同L-OHP抑制SW480细胞的增殖,并促进其凋亡。     

强直性脊柱炎患者血清基质金属蛋白酶-3,TNF-α,IL-15,CRP水平及意义的研究

目的探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3),TNF-α,IL-15,CRP水平及意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定45例AS患者和31例健康对照组的血清MMP-3、白细胞介素15(IL-15)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及C-反应蛋白(CRP)水平,比较各个指标在AS组与对照组之间的差异,并分析AS组患者各指标间的相关性。结果血清MMP-3,TNF-α,CRP水平在AS组患者显著高于健康对照组(P<0.001),IL-15水平两组比较也有显著性差异(P<0.05);在AS组仅有MMP-3与IL-15之间存在相关性。结论MMP-3和IL-15在AS发病机制中起着重要作用,可以作为评估AS病情的二个有价值的血清学指标。     

Btk及NFκB在急性髓系白血病细胞中的表达及其意义

摘要本研究检测Btk及NFκB在急性髓系白血病（AML）患者白血病细胞中的表达,评价其在AML发生、发展中的作用。选取14例AML初诊及治疗达完全缓解患者的骨髓单个核细胞标本,检测Btk、NFκB在mRNA及蛋白质水平的表达。结果表明：在mRNA及蛋白质水平,AML患者细胞中均有Btk、NFκB的表达。Btk、NFκB蛋白在初发AML患者白血病细胞中表达高,达完全缓解后,其表达下降或检测不到（P〈0．05）。结论：Btk、NFκB在AML的发生、发展中可能起重要作用,它们有可能作为AML的潜在治疗靶点及用于预后预测。     

PCI-32765和Bortezomib对B细胞肿瘤细胞系细胞增殖、凋亡的影响及其机制的研究

本研究旨在探讨Btk抑制剂PCI-32765和蛋白酶体抑制剂bortezomib对Raji、Ramos细胞的增殖、凋亡的影响及其作用机制.PCI-32765和bortezomib单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞后,分别运用CCK-8法及流式细胞术检测细胞的增殖与凋亡,Western blot法检测Btk、NFκB、c-IAP1、Bcl-xL、caspase-3等蛋白的表达.结果表明：①PCI-32765（0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μmol/L）和bortezomib（10、20、30、40、50、60、80 nmol/L）处理Raji和Ramos细胞48 h,均可抑制细胞增殖,抑制率呈剂量依赖性,且两药具有协同作用;②PCI-32765（2.0μmol/L）、bortezomib（20 nmol/L）单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞不同时间（8、12、24、36、48、72 h）,均可抑制细胞存活率,抑制率呈时间依赖性,且两药具有协同作用;③PCI-32765（2μmol/L）和bortezomib（20 nmol/L）单药及联合用药处理Raji和Ramos细胞48 h,可明显促进Raji及Ramos细胞的凋亡.Raji细胞实验结果,空白对照组、PCI-32765和bonezomib单药组、联合用药组的细胞凋亡率分别为10.34±0.53％、24.26±0.91％、43.66±1.08％与74.06±0.72％,各组间有统计学差异（P＜0.05）;Ramos细胞实验结果,空白对照组、PCI-32765和bortezomib单药组、联合用药组的细胞凋亡率分别为15.16±1.49％、71.36±0.82％、75.32±2.36％与84.30±0.91％,各组间有统计学差异（P＜0.05）;④PCI-32765和bonezomib单药处理Raji、Ramos细胞后,细胞内Btk、NFκB、Bcl-xl及c-.IAP1的表达水平较对照组降低,Caspase-3的表达水平升高,两药联用后,作用增强.结论：PCI-32765和bonezomib可以协同抑制Raji与Ramos细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与抑制Btk、NFκB的活性,下调Bcl-xl及c-IAP1等抗凋亡蛋白,同时上调Caspase-3等凋亡蛋白的表达而发挥作用.     

靶向SMC1A基因慢病毒介导的RNA干扰对奥沙利铂治疗敏感性的影响

目的 探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A（SMC1A）基因对奥沙利铂（L-OHP）敏感性的影响。方法 构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒。与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP／SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株。RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况。CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用。 结果 pGCSIL-GFP／SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp。RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞（0.13±0.02 vs. 1.02±0.06,0.182±0.019 vs. 1.114±0.032;P＜0.05）;Western blotting 显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制;不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础。     

自体造血干细胞移植治疗自身免疫性疾病8例报告

目的观察自体造血干细胞移植（APBSCT）治疗自身免疫性疾病（AID）的疗效和对患者生活质量的影响。方法对8例进展或难治性AID进行APBSCT治疗。采集的干细胞单个核细胞计数4．15（2．24～6．46）×10^8／kg。预处理方案为CTX和ATG静脉滴注。对比移植前后临床症状与体征、实验室指标及ECOG评分变化,同时应用WHOQOL—BREF和SF-36量表对患者生活质量进行评价。结果8例均获得自体造血干细胞成功植入,外周血中性粒细胞≥0．5×10^9／L的中位时间为移植后14（12～16）d,血小板≥20×10^9／L的中位时间为移植后15（12-19）d,血小板≥50×10^9／L的中位时间为移植后16（13～22）d。移植后患者症状、体征缓解,病情活动指标改善,ECOG评分移植后3个月较移植前1个月平均下降1分（P〈0．05）。WHOQOL—BREF和SF-36量表评价提示患者生活质量有改善。结论APBSCT治疗AID有较好的近期疗效,远期疗效尚需更长时间观察。WHOQOL—BREF和SF-36量表可用于AID患者移植前后生存质量的比较。