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高同型半胱氨酸血症患者循环内皮祖细胞的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观察高同型半胱氨酸血症(Hhcy)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的变化.方法:入选患者60例,其中Hhcy患者30例(Hhcy组),非Hhcy患者30例(对照组).采用全自动荧光偏振免疫分析法检测血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy),流式细胞仪计数循环EPCs(即AC133 KDR 细胞).此外,采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养4d后贴壁细胞进行细胞化学分析.激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝集素Ⅰ和DiI标记的乙酰化LDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.采用改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察EPCs的迁移和黏附能力.结果:Hhcy患者循环EPCs数量、外周血正在分化的EPCs数量[(63.9±11.7)、(36.1±6.5)个]均较对照组的[(91.5±14.2)、(51.5±8.3)个]明显减少,均P<0.01;这2种EPCs数量均与血Hcy水平呈反向线性关系.Hhcy患者EPCs的迁移和黏附能力也较对照组的明显受损,EPCs的这2种功能与血Hcy水平呈反向线性关系.结论:Hhcy患者外周血EPCs数量减少、功能减退,且EPCs的数量和功能与血Hcy水平呈反向线性关系. 相似文献
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目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)影响内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的可能机制。 方法:采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,培养4 d后,收集贴壁细胞,加入不同浓度Hcy(10 μmol/L、30 μmol/L、100 μmol/L和200 μmol/L)干预,或先予以1 μmol/L 阿托伐他汀预处理1 h,然后再用200 μmol/L Hcy干预。采用SA-β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测衰老细胞,细胞增殖ELISA试剂盒和集落生成能力测定实验检测EPCs的增殖能力和集落形成能力,端粒重复序列扩增法(TRAP)-ELISA定量检测端粒酶活性,Western blotting检测EPCs Akt Ser473磷酸化水平。结果:Hcy呈浓度依赖性增加SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数量,200 μmol/L最为显著,较对照增加了2倍(15.2±9.8 vs 51.9±13.5,P<0.01),而阿托伐他汀能显著减少Hcy诱导的衰老细胞的数量。此外,Hcy干预后伴随EPCs增殖和集落形成能力的显著损害。Hcy随着浓度的增加而显著降低EPCs端粒酶活性。进一步研究发现Hcy显著减少Akt磷酸化。结论:Hcy加速EPCs衰老,伴随EPCs增殖和集落形成能力的损害,提示细胞衰老也许是Hcy损害EPCs的机制之一。Hcy加速EPCs衰老可能跟EPCs端粒酶活性下降以及Akt磷酸化水平的下降有关。阿托伐他汀可以预防Hcy对EPCs的损害效应。 相似文献
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尼古丁对人外周血内皮干细胞数量和活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察尼古丁影响出生后的血管新生是否与其影响外周血内皮干细胞(EPC)的数量和活性有关。方法 采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7d后,收集贴壁细胞,加入不同浓度尼古丁(分别为10 - 12 ,10 - 10 ,10 - 8,10 - 6 及10 - 4mol·L- 1)培养一定的时间(12 ,18,2 4 ,32及4 8h)。激光共聚焦显微镜鉴定FITC UEA Ⅰ和DiI acLDL双染色阳性细胞被认为是正在分化的EPC ,流式细胞仪检测其表面标志进一步鉴定EPC ,倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、体外血管生成试剂盒和粘附能力检测实验,观察EPC的增殖能力、迁移能力、体外血管生成能力和粘附能力。结果 尼古丁在浓度为10 - 12 ~10 - 8mol·L- 1范围内显著增加外周血EPC数量,改善外周血EPC的粘附能力、迁移能力、增殖能力和体外血管生成能力,并且EPC数量随尼古丁浓度增加而增加,10 - 8mol·L- 1浓度尼古丁EPC影响最为显著(P <0 .0 1,n =6 )。另外,10 - 8mol·L- 1尼古丁呈时间依赖地增加外周血EPC数量,改善外周血EPC功能。而尼古丁在浓度>10 - 6 mol·L- 1却减少外周血EPC数量,损害外周血EPC功能。结论 尼古丁可增加EPC数量并改善其功能,然而高浓度尼古丁或许对EPC具有毒性 相似文献
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内皮祖细胞是内皮细胞的前体细胞,近年研究表明它在冠心病的发生、发展中扮演了重要角色。本文就冠心病患者内皮祖细胞数量、功能的改变及内皮祖细胞在冠心病的治疗应用等方面研究进展作一综述。 相似文献
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氧化低密度脂蛋白对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 观察氧化低密度脂蛋白(ox LDL)对外周血内皮祖细胞(EPC)数量和功能的影响。方法 密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度ox LDL(分别为25,50,100,200μg/ml)和LDL(100μg/ml)培养一定的时间(6、12、24和48h)。激光共聚焦显微镜和流式细胞仪鉴定EPC,分别观察EPC的增殖、迁移、黏附和体外血管生成能力。结果 Ox LDL显著减少外周血EPC数量,200μg/mlox LDL作用24h对EPC数量的影响最为显著(较对照组减少了近70%,P<0.01)。另外,100μg/mlox LDL呈时间依赖关系减少EPC数量,于24h达到高峰(P<0.01)。Ox LDL也显著损害了外周血EPC的黏附、迁移、增殖和体外血管生成能力。结论 Ox LDL可减少EPC数量并损害EPC功能。 相似文献
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经皮冠状动脉介入治疗(PCI)是冠心病治疗中较为重要的方法之一,目前已成为与药物治疗、外科冠状动脉旁路移植手术(CABG)并驾齐驱的治疗手段。药物洗脱支架(DES)的问世,极大地推进了PCI在临床上的应用。本文现就目前冠心病介入治疗的现状及发展趋势作一综述。 相似文献
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