应用假病毒技术研究HIV-1复制抑制剂

建立以HIV-1复制为靶点的细胞水平假病毒药理筛选模型，并运用该模型筛选化合物库中随机选取的化合物。细胞水平的HIV-1假病毒药理筛选模型是应用水泡性口膜炎病毒的外壳糖蛋白(vesicular stomatitis virus glycoprotein，VSV-G)包装HIV-1核心建立的，简称VSVG/HIV模型。细胞被VSVG/HIV感染后，病毒携带的报告基因的表达水平(荧光素酶活性或GFP阳性细胞比例)反映了HIV-1的复制水平。对HIV-1复制有抑制作用的化合物应用VSVG/MLV模型对其特异性地进一步检测。被感染细胞中报告基因的表达水平与病毒稀释度呈显著的剂量依赖效应。阳性药物齐多夫定(zidovudine，AZT)、拉米夫定(lamivudine，3TC)、去羟基苷(didanosine，DDI)可剂量依赖性地抑制HIV-1的复制，其IC₅₀分别为48.5 nmol·L^-1、 0.13 μmol·L^-1和1.73 μmol·L^-1，与文献报道一致。在随机筛选的500个化合物中有3个化合物可以抑制HIV-1的复制，IC₅₀分别为1.92、 5.38和3.39 μmol·L^-1，而对MLV的复制无影响。VSVG/HIV假病毒系统是一种安全、有效的针对HIV-1复制的药理筛选模型。当将此模型与VSVG/MLV模型联合使用时，可判断化合物作用的特异性。实验表明：3个化合物，2-甲硫基-5-(4-甲基苯并)酰胺基-1,3,4-噻二唑(化合物A)、N-(3-羟基苯基)-2-(4-异丁基苯基)丙酰胺(化合物B)和N-(4-甲基吡啶基)-4-甲基苯磺酰胺(化合物C)可以特异性抑制HIV-1的复制。     

555例膜性肾病与285例膜增生性肾小球肾炎临床病理学分析

目的对大样本的肾活检组织病理诊断为膜性肾病(MN)和膜增生性肾小球肾炎(MPGN)患者进行回顾性分析,为指导临床医师提高诊治水平,判断患者的预后提供帮助。方法回顾性分析MN和MPGN患者的年龄分布、性别比例、就诊症状、多种实验室检测指标和组织的免疫荧光沉积情况,通过统计学方法寻找具有显著差异的各项指标。结果①MN的发生率男性多于女性,MPGN的发生率是女性多于男性(P<0.01),MPGN的发病年龄比膜性肾病年轻(P<0.01)。②MN就诊前症状以水肿为主(86.67%),而MPGN就诊前症状除有水肿外,还常伴有乙型肝炎病毒(HBV)感染、高血压、腰痛、感冒等一些症状和体征,同时,还有明显的血尿、尿素氮和肌酐增高以及血清HBV阳性等实验室检测的指标(P<0.01)。③MN肾活检组织的免疫荧光检测以IgG和C3沉积为主(P<0.01),MPGN肾活检组织的免疫荧光检测以IgA和C3沉积为主(P<0.05)。结论 MN发病缓慢,进展缓慢,预后相对良好。MPGN进展快,常伴有一系列并发症的发生,而且这些并发症是促进疾病进展的重要因素,也是判定疾病进展和预后的重要指标。     

超声引导下桡动脉穿刺置管术的应用进展

超声引导下桡动脉穿刺置管术较传统触诊盲穿法具有显著优势,可提高成年人和小儿桡动脉穿刺置管成功率,降低不良反应发生率。但不同的超声引导下桡动脉穿刺置管术各有其优势及不足,因操作技能问题可出现如穿透后壁、血肿、痉挛等风险。文章描述了超声引导下桡动脉穿刺置管术的操作方法、影响其成功率的因素和相关并发症。超声技术的运用可以提高...     

艾司氯胺酮静脉推注麻醉在小儿扁桃体、腺样体切除术中的应用观察

目的 观察艾司氯胺酮静脉推注麻醉在小儿扁桃体、腺样体切除术中的应用效果。方法 50例扁桃体、腺样体肥大患儿随机分为观察组和对照组各25例,两组均行腺样体和(或)扁桃体切除术;观察组术前静脉推注1 mg/kg艾司氯胺酮进行麻醉诱导,术中静脉泵注0.5～1 mg/kg艾司氯胺酮行麻醉维持;对照组静脉推注芬太尼2μg/kg诱导,术中静脉泵注瑞芬太尼0.1～0.2μg/(kg·min)进行麻醉维持。观察两组麻醉前(T₀)、气管插管时(T₁)、手术开始时(T₂)、手术后10 min(T₃)、拔出气管插管时(T₄)的血压(SBP、DBP)、心率(HR)及入麻醉后监测治疗室(PACU)后15 min(T₅)、30 min(T₆)的疼痛评分量表评分(FLACC评分)、儿童麻醉苏醒期躁动评分量表评分(PAED评分)、Watcha量表评分和手术时间、拔管时间、PACU停留时间、术后不良反应。结果 与同组T0时点比较,观察组T₁时点H...     

螺旋藻多糖对老龄小鼠脑和肝中SOD、MDA的影响

目的：研究螺旋藻多糖对老龄小鼠脑、肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的影响。方法：SOD测定为黄嘌呤氧化酶法，MDA测定为硫代巴比妥酸法。结果：螺旋藻多糖可显著增强老龄小鼠脑和肝SOD活性，降低MDA含量。结论：螺旋藻多糖具有一定的抗衰老作用。     

siRNA和miRNA及其抗病毒的研究近况

近年来,随着siRNA和miRNA的发现,二者的关系正逐渐被深入研究,而二者的应用更成为探讨的热点.针对siRNA和miRNA的关系和应用,本文介绍了siRNA和miRNA的形成和生物学效应并从生化特征、功能和生源论等方面对二者进行比较,以及在此基础上,着重概括了siRNA和miRNA在抗病毒治疗方面的研究近况.     

自体角膜缘干细胞移植与单纯切除术治疗翼状胬肉

手术治疗翼状胬肉是最常用的方法,但术后均有一定的复发率[1].我们分别采用自体角膜缘干细胞移植和单纯切除术治疗翼状胬肉患者95例,现报道如下.     

银线草醇F:一种新结构类型HIV-1逆转录酶RNaseH活性抑制剂

乌药烷型二聚倍半萜类化合物银线草醇F具有抑制HIV-1复制活性,为研究该化合物的作用机制,应用实时荧光定量PCR法、ELISA法及荧光测定法分别测定化合物对HIV-1逆转录进程、逆转录酶RNA-依赖DNA聚合酶活性以及RNase H活性的影响。结果显示,银线草醇F抑制HIV-1逆转录产物LTR/Gag生成,IC50为9.11μmol·L 1,与HIV-1活病毒感染实验结果 (6.12μmol·L 1)一致;该化合物特异性抑制RNase H的活性,IC50为26.4μmol·L 1;对逆转录酶的RNA-依赖DNA聚合酶活性无显著影响。银线草醇F是一个作用于RNase H的具有新结构类型的HIV-1逆转录酶抑制剂。     

应用假病毒模型寻找H5NI高致病流感病毒侵入抑制剂

目的：建立不同亚型流感病毒侵入环节的细胞水平重组病毒药理筛选模型,并应用该模型筛选流感病毒侵入抑制剂。方法：将表达流感病毒外壳蛋白（hemagglutinin,HA）质粒和HIV-1核心基因共转染至病毒生成细胞,生成由HA包装HIV核心的重组病毒颗粒,简称HA／HIV模型,HIV-1核心基因上携带的报告基因的表达水平可以反映感染水平。在筛选过程中,以VSVG／HIV模型作为特异性对照模型,以HA抗体作为阳性对照。结果：成功构建了两种H5N1亚型和-种H5N2亚型的流感病毒侵入为靶标的药理筛选模型,HA抗体可以成功抑制HA／HIV假病毒颗粒的侵入。应用以上模型筛选了2000余个化合物,其中发现三个海洋来源的化合物YCUA-6、YC-72、GC-29可以剂量依赖性抑制三种不同亚型流感病毒HA介导的侵入,其IC50均在1～10μM之间。结论：目前针对流感病毒的侵入环节尚无有效的药物,本研究首次建立了以流感病毒侵入环节为靶标的药物筛选模型,发现三个海洋来源化合物单体YCUA-6、YC-72、GC-29可有效抑制H5N1高致病流感病毒的侵入,本研究提供了流感病毒侵入抑制剂的先导化合物,为研发新靶点和新结构类型的流感病毒抑制剂建立了筛选和物质平台。     

微量元素锌铁与高血脂和动脉粥样硬化关系的实验研究

本实验采用随机对照的前瞻性研究,用高脂饲料诱导大鼠动脉粥样硬化(AS)形成,同时检测不同水平的锌、铁与高血脂和动脉粥样硬化关系,系统深入地探讨了微量元素锌铁的抗AS作用及其机理.结果 表明:锌、铁的适宜比例可有效提高机体的抗氧化能力.这为进一步研究微量元素锌铁与AS的关系,探讨锌铁防治AS的机理,使之应用于临床提供了有价值的理论基础.