EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过IκBα的降解活化NF-κB

目的　阐明鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化核转录因子NF κB的机制。方法　利用强力霉素Dox诱导表达LMP1的鼻咽癌细胞株Tet on LMP1 HNE2为实验模型 ,首先应用免疫印迹方法测定Dox诱导后不同时相LMP1的表达动力学以及IκBs蛋白量及功能的改变。进而用间接免疫荧光法检测NF κB的亚细胞定位。最后采用瞬间共转染及报道基因活性分析分析NF κB的活性。结果　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,Dox处理 15分钟后LMP1的表达迅速升高并维持与较高水平直至 12 0分钟。LMP1的诱导性表达导致IκBα的磷酸化并降解 ,但IκBα蛋白总量无改变。继IκBα的磷酸化并降解 ,NF κB(P6 5 )自胞浆易位至胞核且活性升高。IκBα的显性负性突变子抑制NF κB(P6 5 )的核易位及报道活性。LMP1的诱导性表达并未引起IκBβ蛋白水平变化。结论　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,EB病毒LMP1通过IκBα的磷酸化并降解激活核转录因子NF κB的活性 ,并且 ,LMP1诱导的NF κB活性能被IκBα的显性负性突变子完全抑制。IκBβ在此信号传导途径中无改变。LMP1表达前后IκBα蛋白总量维持恒定可能是由于NF κB的活化迅速启动了IκBα的重头合成这一自身调节环路所致。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。     

EGCG干预LMP1激活的AP-1信号转导通路

目的　探讨EGCG对鼻咽癌细胞激活蛋白 1(AP 1)信号转导通路的干预作用 ,阐明在鼻咽癌细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化的AP 1信号转导通路中靶分子的机制。方法　采用EB病毒阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGCG对CNE1和CNE1 LMP1细胞的生存率的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对AP 1活性的作用。利用间接免疫荧光法观察EGCG对JNK核移位的影响 ,再分别提取CNE1和CNE1 LMP1的胞浆及胞核蛋白 ,Westernblot分析EGCG抑制JNK的核移位后 ,胞浆及胞核蛋白中JNK的变化。采用Westernblot分析EGCG对c Jun的磷酸化水平的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对cyclinD1启动子活性的影响 ,并用Westernblot分析EGCG对cyclinD1蛋白表达的作用。结果　EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性 ,并可抑制AP 1的活性。EGCG能抑制JNK的核移位 ,并抑制c Jun的磷酸化。EGCG对AP 1信号通路下游的靶基因cyclinD1的启动子活性及其蛋白表达都有抑制作用。结论　EGCG对信号转导通路上的AP 1、JNK、c Jun、cyclinD1多个靶点分子具有干预作用。LMP1是EB病毒这种编码的蛋白 ,因此 ,EGCG抑制与病毒相联系的信号转导通路 ,可能是EGCG抑制与病毒相关的肿瘤的分子机     

蛋白质组学研究在确定新的肿瘤标志物中的意义

随着蛋白质组学技术、高通量技术及生物信息学技术的发展,越来越多的肿瘤标志物被发现,并将逐步应用于临床,这些进展必将为肿瘤的早期检测和风险评价提供可靠的依据.现综述蛋白质组学研究策略在肿瘤标志物的筛选和鉴定中的应用.     

阻断致瘤病毒复制的抗肿瘤药物筛选策略

许多病毒与人类恶性肿瘤的发生有关，阻断病毒与靶细胞的结合和融合、干扰病毒的复制和表达，抑制与病毒复制有关的酶等多个环节，将为抗肿瘤药物的筛选提供相关策略。     

长托宁联合力月西应用于小儿术前给药的临床观察

目的观察长托宁联合力月西应用于小儿术前用药对镇静、情绪、心率、血压及呼吸道分泌物的影响。方法4-10岁泌尿外科患儿40例,ASAⅠ级,随机分为两组,A组20例肌注阿托品0．02mg／kg＋鲁米那钠2mg／kg;B组20例肌注长托宁0．02mg／kg＋力月西0．1mg／kg,分别记录基础值、入室、诱导、手术开始、术毕各时点的平均动脉压（MAP）、心率（HR）、脉搏氧饱和度（SpO2）;观察镇静、情绪状态、与父母分离和静脉穿刺时的行为变化及在麻醉诱导时面红、口干程度、手术结束时有较多分泌物的病例数。结果长托宁联合力月西应用对患儿的心率和血压影响轻微,而抑制腺体分泌的作用较强且还具有一定的镇静和抗焦虑作用。结论长托宁联合力月西应用于小儿术前效果满意,是一种较好的小儿麻醉前用药配伍组合。     

循证护理应用于原发性闭角型青光眼患者的效果观察

目的：探讨循证护理在原发性闭角型青光眼手术患者中的应用效果。方法：将50例球后麻醉下行小梁切除术的原发性闭角型青光眼手术患者随机分为研究组和对照组各25例。比较2组Zung焦虑自评量表（SAS）、Zung抑郁自评量表（SDS）、改良睡眠状况自评量表（SRSS）和社会支持评定量表（SSRS）评分变化。结果：SAS、SDS和SRSS评分护理后研究组明显低于对照组（P〈0.05）,而SSRS各维度评分研究组显著高于对照组（P〈0.05）。结论：循证护理可改善原发性闭角型青光眼手术患者的负性情绪,提高睡眠质量和社会支持。     

彩色多普勒超声结合BI-RADS对乳腺良恶性肿瘤的诊断价值

目的:应用彩色多普勒超声观察乳腺肿瘤的二维声像图特点和彩色多普勒血流显像特点,结合BI-RADS(breast imaging reporting and data system,BI-RADS)分类,提高乳腺恶性肿瘤的诊断率。方法:分析经病理证实的68例乳腺恶性肿瘤及142例乳腺良性肿瘤的二维声像图特点、彩色多普勒血流显像特点和BI-RADS分类。结果:142例乳腺良性肿瘤中,94例病灶的二维声像图和血流有明显良性肿瘤特征,BI-RADS分类为Ⅱ级;余48例病灶的二维声像图和血流特点未定性,BI-RADS分类Ⅲ级18例、BI-RADS分类Ⅳ级30例。68例恶性肿瘤中,65例病灶的二维声像图和血流有明显恶性肿瘤特征,BI-RADS分类为Ⅴ级;余3例病灶的二维声像图和血流特点未定性,BI-RADS分类Ⅲ级1例、Ⅳ级2例。结论:彩色多普勒超声结合BI-RADS在乳腺良恶性病变的鉴别诊断方面的应用,有助提高乳腺恶性肿瘤的诊断率,做到早期诊断、早期治疗。     

p16、Cyclin D1和CDK4基因在胰腺癌中的表达及其意义

为探讨抑癌基因Ｐ１６、癌基因ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４在胰腺癌中的作用及其相互关系,应用免疫组织化学方法检测了ｐ１６、ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４基因在胰腺癌中的表达。结果：Ｐ１６在胰腺癌中为低表达,Ｃｙｃｌｉｎ,Ｄ１和ＣＤＫ４呈过度表达在胰腺癌发生中起协同作用。     

中国人鼻咽癌恶性转化基因的克隆及其生物物理性状研究

鼻咽癌是我国南方及东南亚一些国家和地区的高发肿瘤,其病因发病机理一直是国内外研究的热门课题。利用小鼠JB6细胞和分子克隆技术,我们成功地从中国人鼻咽癌细胞株CNE2中克隆出恶性转化基因Tx。鼻咽癌恶性转化基因Tx全长16kb,其3’端含人Alu重复序列。Tx基因在DNA杂交水平与ras、myc等瘤基因以及EB病毒基因无同源性。将该基因转