TLR7对日本血吸虫感染诱导的脾脏ICOS+CD4+ T细胞的影响

目的 研究日本血吸虫感染小鼠脾脏中Toll样受体7(TLR7)对可表达诱导共刺激分子(ICOS)的CD4⁺ T细胞的含量、表型和功能的影响。方法 使用日本血吸虫分别感染C57BL小鼠和TLR7基因敲除(TLR7 KO)小鼠,并分别设未感染对照组。分离脾脏,制备单细胞悬液,使用流式细胞计数分别检测ICOS⁺CD4⁺ T细胞的含量、ICOS⁺CD4⁺ T细胞活化和功能相关分子的表达情况。结果 与未感染对照组相比,C57BL/6组小鼠脾脏ICOS⁺细胞的比例由(13.7±3.1)%升高至(24.6±4.3)%,差异有统计学意义(P<0.05);感染C57BL/6组小鼠ICOS⁺CD4⁺ T细胞中表达CD69、CD40L和CXCR5分子细胞的比例明显升高,分别达到(32.2±7.1)%、(4.0±1.4)%、(6.1±1.1)%(P<0.05),CD62L⁺细胞的比例明显下降至(20.1...     

复方万年青胶囊对大鼠血管性痴呆的改善作用

目的探讨复方万年青胶囊对大鼠血管性痴呆的改善作用及机制。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠血管性痴呆模型,将40只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、复方万年青胶囊0.375 g/kg组和尼麦角林0.011 g/kg组,每组10只,连续ig给药45 d,每天1次。采用Morris水迷宫实验考察大鼠寻找站台潜伏期、原象限停留时间比和距离比,并检测生化指标IL-6、乙酰胆碱酯酶(AchE)的水平。结果与模型组相比,复方万年青胶囊组大鼠在第1、2、4、5天寻找站台的潜伏期均明显缩短(P0.05),在原象限停留时间比和距离比均明显增加(P0.05),生化指标AchE水平明显降低(P0.01),细胞因子IL-6水平降低,无显著性差异。结论复方万年青胶囊具有改善大鼠血管性痴呆的作用,可能与降低AchE活性,提升乙酰胆碱水平,修复受损的中枢胆碱能神经系统有关。     

五味子糖浆原药材、中间体及成品的HPLC指纹图谱相关性研究

目的建立五味子糖浆原药材、中间体、成品的HPLC指纹图谱,并分析三者的相关性。方法采用ACE5-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长218 nm,柱温30℃。结果对长白山产地的五味子药材、五味子糖浆中间体及成品进行了测定,建立了相应的HPLC指纹图谱,并标定了五味子药材含有18个共有峰,中间体及成品含有12个共有峰。10批长白山地区五味子药材的化学成分及质量稳定;同厂家不同批号五味子糖浆中间体及成品相似度较大,药材与中间体及成品的相关性良好。结论建立的HPLC指纹图谱方法简便、可靠、重复性好,为科学评价及有效控制五味子糖浆质量提供了依据。     

激活核受体PXR 促进小鼠GM-CSF 来源的树突状细胞的分化

目的:研究孕烷受体(PXR)激动剂pregnane-16 -carbonitrile(PCN)对小鼠GM-CSF 来源树突状细胞(DC)分化的影响。方法:建立小鼠DC 体外GM-CSF 和IL-4 诱导分化体系,并用PCN 对体系进行处理。流式细胞术检测CD11c+ DC的比例;ELISA 和流式细胞术检测DC 产生细胞因子IFN 、IL-1、IL-2 和IL-12 的量;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-timeRT-PCR)检测调控DC 分化相关信号通路基因的表达。结果:成功建立小鼠DC 体外分化体系;PCN 处理能显著促进DC 分化,且DC 产生的细胞因子IFN 和IL-2 的量显著增多;Real-time RT-PCR 检测结果表明,与对照组相比,PCN 处理组中调控DC 分化的Notch 和Wnt 信号通路相关基因HES1、WISP1 和WISP2 的表达量显著上升。结论:PXR 激动剂PCN 能显著促进小鼠GM-CSF 来源的DC 的分化及其IFN 和IL-2 的产量,并且这种促进作用可能是通过Notch 和Wnt 信号通路进行调控。     

虎眼万年青提取物对肝纤维化的治疗作用研究

采用四氯化碳(CCl4)制备小鼠肝纤维化模型,检测AST,ALT,γ-GT,MDA,GSH-px,SOD等血清指标,ELISA方法检测PCⅢ,IV-C,LN,HA等血清标记物;肝组织采用HE和Masson胶原染色,光镜下观察病理学改变;Western blot检测Ⅲ型胶原、TGF-β,α-SMA,E-cadherin蛋白表达,观察虎眼万年青提取物对CCl_4诱导的小鼠肝纤维化治疗作用,并探讨作用机制。结果表明,虎眼万年青提取物组(50,150,500 mg·kg~(-1))均可明显降低血清AST,ALT,γ-GT,MDA水平,升高GSH-px,SOD水平;降低肝纤维化血清标志物PCⅢ,IV-C,LN,HA的表达;明显改善CCl_4所致大鼠肝纤维化的病理学改变,证明虎眼万年青提取物对肝纤维化具有治疗作用。其机制是可能与抑制细胞外基质沉积,抑制肝星形细胞活化以及抑制上皮间质转化,进而抑制肝脏纤维化有关。     

颈腰康胶囊药效学研究

目的:研究颈腰康胶囊的药效学,为颈腰康胶囊的临床合理应用提供理论依据。方法:采用热板法、扭体法、耳廓肿胀法、足跖肿胀法、剪尾法、玻片法及急性血瘀模型,分别考察颈腰康胶囊镇痛、抗炎消肿及活血化瘀的药效作用。结果:实验结果表明颈腰康胶囊对热致痛及醋酸引起的化学刺激致痛均具有明显的镇痛效应;颈腰康胶囊对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀均有较好的抗炎消肿作用;通过剪尾法、玻片法及建立肾上腺素急性血瘀模型,结果表明颈腰康胶囊可显著延长出血时间与凝血时间,改善血液黏度。结论:颈腰康胶囊具有显著的镇痛、抗炎消肿及活血化瘀的药理作用。     

日本血吸虫感染C57BL/6小鼠脾脏调节性B细胞的检测

目的探讨日本血吸虫感染C57BL/6小鼠脾脏不同亚群调节性B细胞的含量。方法使用日本血吸虫尾蚴经腹部感染C57BL/6小鼠,5周后分离感染组及正常对照组小鼠脾细胞,制备单个细胞悬液。使用细胞表面染色的方法,通过流式细胞术检测小鼠CD19~+B细胞含量及表达免疫调节相关分子CD5、CD11b以及PD-1的B细胞亚群的含量。结果 C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后,脾脏B细胞的百分比含量及数目明显增多,差异有统计学意义(P0.01);CD5~+和CD11b~+B细胞的含量明显增加,差异有统计学意义(P0.05);而PD-1~+B细胞的含量变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。结论日本血吸虫感染能在C57BL/6小鼠体内诱导CD5~+和CD11b~+调节性B细胞产生。     

精芪双参胶囊处方中各药味的药效支撑作用研究

目的:探究精芪双参胶囊各药味在抗组织缺氧及活血方面的药效支撑作用。方法:依据精芪双参胶囊传统制备工艺制备各药味阴性处方,并通过小鼠亚硝酸钠中毒缺氧模型及大鼠急性血瘀模型,考察精芪双参胶囊各药味在抗缺氧及活血化瘀方面的药效支撑作用。结果:处方中黄芪、丹参是精芪双参胶囊抗组织缺氧及活血化瘀的主要药味,处方中人参、黄精两味药在精芪双参胶囊抗组织缺氧及活血化瘀药效方面贡献较小。结论:精芪双参胶囊黄芪、丹参两味君臣药的药效支撑作用突出,可作为产品药效物质基础研究及质量标准提升的主要研究对象。     

C57BL/6小鼠肺组织CD103~+T细胞的免疫学特性

为了研究正常C57BL/6小鼠肺脏组织中CD103~+T细胞的数量、表型和功能等免疫学特性,本研究选取C57BL/6小鼠肺脏组织,制备冰冻切片进行免疫荧光染色,可观察到小鼠肺脏组织中CD103的表达及其分布情况;制备单细胞悬液,使用FCM检测肺CD103~+T细胞的表型特征;用佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)和离子霉素刺激后,检测细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-9的分泌情况。实验结果显示,小鼠肺脏组织中CD103主要在CD8~+T淋巴细胞中表达,比例高达(51.28±10.37)%。在CD8~+CD103~+T细胞中,CD62L的表达率为(79.63±2.87)%,明显高于CD103~-T细胞(47.83±9.55)%(P0.01);但是CD103~-T细胞比CD103~+T细胞表达更高水平的IFN-γ(P0.01)和IL-9(P0.05)。以上结果表明在C57BL/6小鼠肺脏组织中存在一群表型和功能独立的CD103~+T细胞。