纳米二氧化钛颗粒体外对人肺腺癌A549细胞的毒性效应

目的探讨不同作用时间下粒径为25nm的锐钛矿型二氧化钛(TiO2)颗粒对人肺腺癌A549细胞的毒性效应。方法将100μg/ml的纳米TiO2颗粒悬液与A549细胞在37℃、5%CO2的细胞培养箱中分别孵育1h、4h、8h和24h后,收集细胞。通过乳酸脱氢酶(LDH)检测实验检测纳米TiO2颗粒对细胞膜的损伤情况;通过ATP检测实验检测纳米TiO2颗粒对线粒体产生的影响;通过超氧化物歧化酶(SOD)活性检测实验检测纳米TiO2颗粒对细胞的氧化损伤情况;采用透射电子显微镜观察纳米TiO2颗粒引起细胞超微结构的变化;利用CCK-8法检测纳米TiO2颗粒对细胞存活率的影响。结果随着纳米TiO2颗粒作用时间的延长,细胞外液中LDH活性增强,细胞内ATP浓度降低,SOD活性降低,细胞存活率呈现明显下降(P<0.05),且细胞线粒体和内质网出现不同程度的肿胀和扩张。结论纳米TiO2颗粒体外能够引起肺腺癌细胞氧化损伤,抑制细胞生长,且对细胞的毒性效应存在时间依赖性。     

一种电动肋软骨旋切器的研制

目的:针对现有取肋软骨手术创伤大、颗粒软骨制备方式效率低的实际问题,研制一种新型的可经微创切口直接切取软骨碎片的旋切器械。方法:根据现有医用旋切器及刨削刀的构造和工作原理,首先在Auto CAD环境下构建旋切刀头,后以金属3D打印成形,再根据设计的结构组装成电动肋软骨旋切器。将该器械分别在尸体和猪活体进行实验性操作,以观察旋切效果。将用该器械从猪体内取出的软骨碎片和传统方法制备的颗粒软骨分别以Ⅱ型胶原酶消化分离软骨细胞,进行台盼蓝染色计数。结果:成功组装出国内首台电动肋软骨旋切器。可在尸体及活体猪胸廓以旋切的方式直接获取肋软骨碎片,对周围组织损伤较小。旋切所得软骨碎片和由传统刀片制备的颗粒软骨经消化分离后的软骨细胞活率无统计学差异(P>0.05)。结论:电动肋软骨旋切器可经小切口旋转切取肋软骨碎片,经初步验证,该旋切器具有有效性和安全性。     

透射电镜超薄切片前期载网清洗方法

在透射电镜生物样品的制备与观察中,要经过取材、固定、漂洗、脱水、修块、定位、超薄切片、染色等一系列繁复的程序,所有步骤环环相扣,缺一不可.超薄切片需被捞取在特殊的载网上才可进行透射电镜观察,而制作载网的材料一般为铜,因此也将载网称为铜网.     

碳纳米管对肺组织病理损伤

目的:探讨碳纳米管对肺组织的病理损伤.方法:雄性SD大鼠鼻腔滴注0.5 mg/ml的单壁碳纳米管(SWNTS)和多壁碳纳米管(MWNTS)颗粒悬液25 d,双蒸水滴注作为对照,取大鼠肺组织.采用光学显微镜和透射电子显微镜观察2种碳纳米管材料对肺组织的病理损伤.结果:SWNTS染毒组,观察到肺泡壁增厚,部分肺泡隔断裂,肺泡融合成肺大泡,肺间质有炎症细胞浸润,较高倍数下可以观察到肺组织中沉积有疑似SWNTS颗粒;在肺泡Ⅱ型上皮细胞中,板层体溶解,出现空泡化;在肺泡巨噬细胞中,次级溶酶体增多,细胞核染色质异常;MWNTS染毒组肺组织损伤情况与SWNTS染毒组相似,但较SWNTS染毒组要轻.结论:鼻腔滴注SWNTS和MWNTS均引起肺组织的病理学损伤和超微结构变化.相同的质量浓度下,SWNTS毒理效应强于MWNTS.     

生物样品电镜超薄切片染色技术的改进

目的 提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量.方法 在传统染色方法基础上进行改进,采用"插入式滴染法"和连续染色方式.结果 在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色.结论 与传统方法相比省时省药,减少污染概率,电镜观察结构清晰,反差较好.     

物样品电镜超薄切片染色技术的改进

为提高透射电镜生物样品超薄切片的染色效率和染色质量,在传统染色方法基础上进行改进,采用“插入式滴染法”和连续染色方式,在较短时间内完成大批生物样品超薄切片的电子染色。与传统方法相比省时省药,减少污染几率,电镜观察结构清晰,反差较好。     

锐钛矿型纳米二氧化钛颗粒对人肺腺癌A549细胞的毒性效应

目的:探讨锐钛矿型纳米二氧化钛颗粒(TiO2)对人肺腺癌A549细胞的毒性效应.方法:将不同浓度的锐钛矿型纳米TiO2颗粒悬液与A549细胞共孵育4h后,收集细胞.CCK-8法检测锐钛矿型纳米TiO2颗粒对细胞存活率的影响;采用激光扫描共聚焦显微镜观察锐钛矿型纳米TiO2颗粒进入细胞后活性氧(ROS)的产生状况;采用透射电镜观察锐钛矿型纳米TiO2颗粒引起细胞超微结构的变化.结果:纳米TiO2颗粒对细胞的生长具有抑制作用,且存在剂量-效应关系;染毒后细胞内产生ROS,随着TiO2浓度的增高,ROS的产生增多;透射电镜观察显示纳米TiO2颗粒成簇状存在于细胞中,并对细胞超微结构产生较大损伤.结论:锐钛矿型纳米TiO2颗粒能够诱导细胞产生活性氧,产生细胞毒性,从而损伤细胞超微结构,抑制细胞生长.