坏变细胞的DNA对HpaⅡ限制性片段分析法测量DNA甲基化水平的干扰作用

用~3H-TdR在不同时期标记细胞DNA,以区别在HpaⅡ限制性片段放射活性分析中的DNA系来自增殖中的或坏变中的细胞.实验证明MNNG处理后存活的细胞中并无DNA甲基化水平的变化.而经MNNG或Hanks液处理的脱落细胞DNA,在HpaⅡ水解前后其DNA片段的L_w皆明显降低,并可干扰对新复制DNA的HpaⅡ识别位点的分析.因此作者认为,在缺乏严格设计以除外上述因素的体系中,作出关于细胞DNA甲基化状态变化的结论是不可信的.     

化学致癌物和抗致癌物检测技术的基础和应用研究

该课题已发表论文33篇,内容有6项: 一、非程序性DNA合成试验的改进。本改进法以~(14)C-胸苷预标记的同步化培养细胞为测试细胞,从而在测量非程序性DNA合成的~3H-胸苷掺入的比放射活性时可省略繁复的DNA定量测定,而以~3H/~(14)C放射活性比代替,大大缩短了测试周期和材料消耗。二、创建一个以ADP-核糖基转移酶介导的细胞NAD含量降低为DNA损伤检测终点的试验法。研究证明该酶活性和它的唯一底物(细胞NAD)含量由于在DNA复制过程中出现的小片段DNA的刺激而呈细胞周     

癌胚抗原选择性促进大肠癌的转移

癌胚抗原(CEA)是一种癌胚糖蛋白、其功能至今尚不明了。血清 CEA 浓度是人大肠癌(CRC)预后的重要指标。CEA 基因的核苷酸顺序与免疫球蛋白基因家族有同源性,故 CEA 可能参与细胞识别和细胞间反应。CEA 还可能是一种粘附因子,促进肿瘤细胞与正常细胞的结合。作者在实验性 CRC 肝转移裸鼠模型上验证此种假说。     

一株源于NIH远交系小鼠的可移植性乳腺癌ZMBC902的建立

动物模型是实验肿瘤学研究的一种常用手段,目前国内外已建立了多种不同宿主、不同肿癌的动物模型,但较为理想的肿瘤动物模型并不多。迄今国内已建立的小鼠乳癌模型已不下十株,均由近交系小鼠如津白Ⅱ号(TAⅡ)、615系和BALB/c的自发乳腺肿瘤经同系或异系移植成,并已在肿瘤学实验研究中得到了初步应用。本文报道的小鼠可移植性乳腺癌ZMBC902源自NIH远交系小鼠,在2年多的移植传代     

Screening and identification of down-regulated genes in colorectal carcinoma by subtractive hybridization: a method to identify putative tumor suppressor genes.

Ｓｃｒｅｎｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｏｗｎ┐ｒｅｇｕｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｒｃｉｎｏｍａｂｙｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ：ａｍｅｔｈｏｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｐｕｔａｔｉｖｅｔｕｍｏｒｓ...     

人类结直肠癌的肿瘤抑制基因

过去认为,只要有单个或多个协同的癌基因激活,就可导致细胞癌变;活动癌基因的作用是显性作用(“domi-nantly acting”)。但是早年设计的“恶性—正常”体细胞融合试验却提示,在正常细胞中存在某种抑制性基因,可以阻止恶性性状的表达。近年人们用细胞遗传学和 DNA限制性片段长度多态性分析(RFLP)技术,进一步证明某些基因的遗传性缺失可以作为癌变的关键性因素。这类基因被称为“肿瘤抑制基因”(tumor suppressov gene)。二年多前克隆得到的视网膜母细胞瘤抑制基因(Rb-1),为肿瘤抑制基因假说提供了有力证据。目前已经在小细胞肺癌,乳癌和结直肠癌等其它人类肿瘤中发现了肿瘤抑制     

人大肠肿瘤的DNA甲基化水平

通过高效液相色谱技术,分析15例人大肠肿瘤(腺癌与腺瘤)的肿瘤组织及其自身正常肠粘膜的DNA总体5-甲基胞嘧啶(mC)含量,发现5例腺癌DNA的甲基化水平低于其正常粘膜DNA,1例腺癌高于正常粘膜,另外9例(8例腺癌和1例腺瘤)则与正常粘膜相近似。对其中的10例腺癌进行mC精确定量和分组分析,证明癌DNA与正常DNA并没有甲基化水平的统计学差异,但是癌DNA mC含量的个体差异显著比正常粘膜DNA的小。作者推测可能是肿瘤中DNA甲基化水平的趋同化现象造成了过去所谓的DNA“低”或“高”甲基化。     

HSU17714基因反义重组质粒的构建及其对人大肠癌细胞生长的影响

我所应用减式杂交方法筛选人大肠癌负相关基因,得到一与已知基因同源性仅50％的cDNA片段,已作为新发现的基因被NCBI收录入国际基因库,我们将此cDNA片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体pREP9的多克隆位点中,构建了HSU17714基因的反义RNA表达载体,并籍脂质体将之导入人结肠癌SW1116细胞中,双层软琼脂集落培养试验、流式细胞技术分析及MTT比色法等结果分别提示转染该重组体的肠癌细胞的非锚着依赖性生长能力、增殖周期活性和细胞生长速度均受到不同程度的抑制,说明外源重组体pREP9 HSU17714(AS)对肠癌SW1116细胞的生长具有抑制作用。