从ECCE到Phaco的转变--核处理技术的实验研究

目的通过化学方法制成动物核性白内障模型,探讨相对能量复合指数(RECP)与角膜内皮细胞活性的关系。方法将5种化学物质注入晶状体,以透过黑白条纹的清晰程度判断晶状体混浊程度并分级。然后将实验眼球分为6组(Ⅰ组为对照组;Ⅱ-Ⅵ为实验组),行标准超声乳化白内障摘除手术。手术后立即取下角膜,作锥蓝-茜素红联合染色标本和扫描电镜标本。结果晶状体内注入甲醛、冰醋酸、无水乙醇、丙酮和苯扎溴铵均能形成晶状体混浊,其中:冰醋酸致晶状体混浊能力最弱,无水乙醇、丙酮次之,甲醛、苯扎溴铵最强。当RECP≤90时,锥蓝-茜素红双重染色和扫描电镜均表明角膜内皮细胞活性好,其形态和细胞联接均无改变。当RECP=120时,角膜内皮细胞形态尚正常,但是细胞联结和胞膜部分破坏。当RECP=150时,角膜内皮细胞严重损伤。结论用化学方法制作核性白内障模型供过渡训练使用是可行的。当RECP超过某一数值(>90)时,即与角膜内皮细胞的活性成负相关。     

中药复方血栓通可抑制血管生成

目的:探讨复方血栓通对血管生成的作用。方法:鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)法检测复方血栓通对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的复方血栓通对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导的ECV-304细胞增殖的影响;Transwell小室检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞移行的影响;Matrigel实验检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果:复方血栓通中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成;MTS比色法显示,1.5625～100g/L复方血栓通对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用,而更低和更高浓度的复方血栓通则无抑制作用;Transwell小室实验显示,复方血栓通为0,3.125,6.25和12.5g/L时ECV-304细胞移行数分别为219±17,183±14,135±13和19±9;Matrigel实验显示,复方血栓通为0,0.390625,0.78125和1.5625g/L时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为26.3±1.2,18.7±1.5,14.7±0.6和2.7±0.6。结论:复方血栓通具有明显抑制血管生成的作用。     

复方血栓通对猴脉络膜一视网膜内皮细胞增生、移行和管腔形成的作用

目的探讨复方血栓通干预猴脉络膜．视网膜内皮细胞（Rr／6A）参与血管生成的作用及机理。方法实验研究。本研究分为四部分：①取对数生长期RF／6A细胞进行培养,设立空白对照组、阳性对照组以及不同浓度的复方血栓通观察组．每组均加入终浓度为10ng／ml的血管内皮生长因子（VEGF）．阳性对照组加入终浓度0．20mg／ml的硫酸鱼精蛋白,复方血栓通观察组设立0．39～50．00mg／ml的多个不同浓度组。培养24h后采用酶联免疫检测仪测定各组吸光度4值,观察不同浓度的复方血栓通对VEGF诱导的RF／6A细胞增殖的影响。②设立空白对照组和终浓度为3．13、6．25、12．50mg／ml的复方血栓通组,培养24h后检测不同浓度复方血栓通对RF／6A细胞移行的影响。⑧设立空白对照组和终浓度为0．39、0．78、1．56mg／ml的复方血栓通组,培养12h后检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A细胞管腔形成的影响;④设立空白对照组、终浓度为0．20mg／ml的硫酸鱼精蛋白阳性对照组和终浓度为1．56、3．13、6．25mg／ml的复方血栓通组,培养24h后,运用Western Blot和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）的方法,分别检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A细胞表达VEGF、基质金属蛋白酶2（MMP．2）蛋白和mRNA的影响。对多组计量资料进行单因素方差分析。结果①各组间4值差异有统计学意义（F=158．669,P〈0．01）,同空白对照组比较,0．78～25．00mg／ml浓度的复方血栓通对VEGF诱导的RF／6A细胞增殖具有明显抑制作用（尸均〈0．011;②复方血栓通浓度为0、3．13、6．25和12．50mg／ml时,RF／6A细胞移行数分别为123．3±13．8、114．3±15．5、54．0±6．1和40．3±10．1,组间差异有统计学意义（B36．918,P〈0．01）;与空白对照组比较,6．25和12．50mg／ml浓度的复方血栓通对RF／6A细胞移行具有明显的抑制作用（P均〈0．01）;③复方血栓通浓度为0、0．39、0．78和1．56mg／ml时RF／6A细胞内皮管腔形成数分别为20．3±2．5、12．7±2．1、9．7±1．2和0．7±0．6,组间差异有统计学意义（F=64．324,P〈0．01）;与空白对照组比较,0．39、0．78和1．56mg／mA浓度的复方血栓通对RF／6A细胞内皮管腔形成均具有明显的抑制作用（P均〈0．01）,且抑制作用随浓度增加而增强;④空白对照组、阳性对照组以及1．56、3．13和6．25mg／ml浓度的复方血栓通组VEGF和MMP．2蛋白相对含量组间差异均有统计学意义（F=343．346、1670．505,P均〈0．01）;与空白对照组比较,其余各组均具有显著抑制RF／6A细胞VEGF和MMP-2蛋白表达的作用（P均〈0.01）,复方血栓通的抑制作用随浓度增加而增强;各组VEGF和MMP-2mRNA相对含量的差异也有统计学意义（F=228．130,208．579,P均〈0．01）,与空白对照组比较,其余各组均具有显著抑制RF／6A细胞VEGFmRNA表达的作用（P均〈0．01）,复方血栓通的抑制作用随浓度增加而增强。结论复方血栓通可能通过抑制RF／6A细胞增殖、移行以及管腔形成来抑制其参与新生血管生成．其机理可能与抑制RF／6A细胞VEGF、MMP-2的表达有关。     

干眼患者使用表面麻醉剂后泪河形态的改变

目的：探讨干眼患者使用表面麻醉剂后泪河的变化。
　　方法：随机选取干眼患者50例。随机选取一眼滴用表面麻醉剂纳入试验组,另一眼用9g/L生理盐水点眼纳入对照组,点药15 min 后通过眼前节相干光学断层扫描仪( anterior segment optical coherence tomography,AS-OCT)记录并比较两组的泪河高度( tear meniscus height,TMH)、泪河深度( tear meniscus depth,TMD)以及泪河横截面面积( tear meniscus area,TMA)。
　　结果：表面麻醉剂使用后TMH为0.173±0.040mm,TMD为0.166±0.019mm,TMA为0.049±0.013mm2,与点药前相比,差异均有统计学意义( tTMH=2.78,P<0.01;tTMD=2.31,P<0.01;tTMA=2.69,P<0.01),点药后两组相比,差异均有统计学意义(tTMH=5.87,P<0.01;tTMD=2.04,P<0.05;tTMA=4.63,P<0.01)。
　　结论：表面麻醉剂减少干眼患者泪液分泌量,临床工作中应加强预防和干预。     

眼挫伤探察术中暴发性脉络膜上腔出血1例

患者 女 34岁 因左眼被纸箱砸伤2天，于2003年7月23日由外地转至我院。既往体健，无高血压、糖尿病史，无青光眼、近视史。入院急查：血常规、凝血四项、血生化、传染病四项正常。视力：右眼1．5，左眼眼前光感。右眼外眼及眼前后节未见异常。左眼眼睑略红肿，结膜完整，未见破裂口，混合性充血，约7点至1点近角膜缘结膜下见条形隆起的棕黑色色素膜组织。     

非致死性过氧化氢持续性损伤对视网膜色素上皮细胞连接的影响

背景 活性氧中间产物可导致细胞氧化损伤,视网膜色素上皮(RPE)细胞对视细胞外节膜盘的吞噬产生了大量的活性氧中间产物过氧化氢(H2O2),易对RPE细胞本身造成反复的氧化损伤. 目的 探讨非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接的影响. 方法 ARPE-19细胞株以8×104个/L的密度接种在96孔板中,在24孔板中细胞爬片的接种密度为4×104个/L,并在DMEM/F12培养液中培养,无血清培养液饥饿培养24 h后用于实验.将不同浓度(0～0.60 mmol/L)的H2O2加入培养液,单溶液细胞增生(MTS)法检测不同浓度H2O2持续性损伤对RPE细胞活力的影响;用Transwell小室法培养细胞,跨上皮细胞电阻(TER)法检测细胞单层的形成时间;以罗丹明-异硫氰酸荧光素标记葡聚糖的量测定H2O2对RPE细胞单层通透性的影响;免疫荧光法检测RPE细胞之间紧密连接蛋白ZO-1的表达情况.结果 不同质量浓度H2O2作用组细胞活力(A490值)的差异有统计学意义(F=991.501,P=0.000),0.20～0.60 mmol/L H2 02组细胞活力明显低于对照组,差异均有统计学意义(t=3.200、11.368、4.256、2.929、10.818、15.433、64.125、98.805,P＜0.05).ARPE-19细胞接种于Transwell小室后l1d时TER值为(24.9±1.3)Ω ·cm2,7d时为(17.8±1.4)Ω·cm2,差异有统计学意义(t=5.228,P=0.014);至第15天左右达到稳定水平,约为(25.9±0.9)Ω·cm2.细胞通透性检测表明,无细胞的空白组葡聚糖渗漏量(相对荧光强度)为433.08±51.53,无H2O2的对照组渗漏量为255.39±16.44,明显低于空白组,差异有统计学意义(t=12.515,P=0.006);H2O2处理的实验组渗漏量为363.28±26.17,较对照组渗漏增加,差异亦有统计学意义(t=14.412,P=0.005).免疫荧光检测可见无H2O2对照组细胞ZO-1连接完整,H2O2组较无H2O2对照组细胞ZO-1连接呈断裂状. 结论 非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接有破坏作用.     

糖尿病干眼患者的波前像差分析

目的比较糖尿病干眼患者与正常人的眼波前像差的变化,探讨像差技术在糖尿病干眼诊断中的作用。方法随机选取2型糖尿病干眼患者45例、正常对照组50人,采用iTrace视功能分析仪,记录瞳孔直径3mm和5mm的总高阶像差、慧差、球差、三叶草差的均方根值(RMS)。采用独立样本t检验比较2型糖尿病干眼患者和正常人群的像差值。结果 3mm瞳孔直径下,总高阶像差:糖尿病干眼组0.344±0.082、正常对照组0.135±0.023(P<0.01);慧差:糖尿病干眼组0.115±0.061、正常对照组0.032±0.025(P<0.01);三叶草差:糖尿病干眼组0.053±0.042、正常对照组0.036±0.025(P<0.05);球差:糖尿病干眼组0.271±0.125、正常对照组0.124±0.015(P<0.05)。5mm瞳孔直径下,总高阶像差:糖尿病干眼组0.656±0.096、正常对照组0.294±0.015(P<0.01);慧差:糖尿病干眼组0.304±0.054、正常对照组0.107±0.237(P<0.01);三叶草差:糖尿病干眼组0.180±0.042、正常对照组0.131±0.106(P<0.05);球差:糖尿病干眼组0.419±0.027、正常对照组0.336±0.087(P<0.05)。3mm瞳孔直径下和5mm瞳孔直径下糖尿病干眼患眼较正常眼的总高阶像差、彗差、三叶草差、球差均有显著升高。结论 2型糖尿病患者的干眼与波前像差的增加密切相关,波前像差的增加可能成为诊断糖尿病干眼的指标之一。     

翼状胬肉术中缝合方式对术后波前像差的影响

目的 比较翼状胬肉术中采用间断缝合和连续缝合两种缝合方式对术后患者波前像差的影响.方法 对门诊53例(53只眼)翼状胬肉患者,施行翼状胬肉切除联合球结膜移植手术.其中一组30例(30只眼)结膜植片行连续缝合;另一组23例(23只眼)采用间断缝合术.健康眼自身对照.分别于术前、术后7天,术后1个月使用iTrace视功能分析仪,记录5 mm瞳孔直径下两组患者的总高阶像差、慧差、球差、三叶草差的均方根值(RMS).P＜0.05认为差异有统计学意义.结果 (1)两组患者术后7天、术后1个月的各项高阶像差值均较术前明显下降,但与正常对照眼相比差异仍有统计学意义.(2)术后7天,术后1个月,连续缝合组的各项像差值均较间断缝合组明显下降.结论 使用连续缝合法缝合球结膜植片能更加显著降低翼状胬内切除术后波前像差值,有利于提高患者的视觉质量.