近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞分离培养及生物学特性

目的：建立近交系五指山小型猪(inbreed line miniature pig of Wuzhishan,ILMW)脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ASCs)体外分离培养和鉴定方法。方法：选取6月龄健康ILMW 3头,从颈部皮下无菌获取脂肪组织约100 g,采用0.1% I型胶原酶消化组织,获得ILMW-ASCs,并进行体外培养和增殖;取第3,5,8,13代细胞进行如下实验：测量细胞大小,观察细胞形态,检测细胞表型、细胞周期、细胞凋亡,并进行细胞诱导分化和绘制细胞增殖曲线。结果：体外分离培养的ILMW-ASCs在体外贴壁,呈成纤维样或旋涡状生长;原代细胞培养 36 h出现贴壁,第5天进入对数增殖期,约7 d后80%的细胞汇合。 ILMW-ASCs细胞直径及体积分别为(17.00±0.54) μm和(2.58±0.24)×10–9 L。细胞表面抗原CD29,CD44和CD90呈高表达,不同代数之间的差异不明显(均P>0.05);CD45,CD8a和HLA-DR呈低表达,与第3代相比,随着代数的增加细胞表面抗原的阳性率逐渐增高(均P<0.05)。ILMW-ASCs成脂诱导结果为油红O染色呈阳性;ILMW-ASCs成骨诱导结果为茜素红染色呈阳性。ILMW-ASCs的第13代细胞出现凋亡和衰老,与较低培养代数相比细胞周期S期的比例下降(均P<0.05)。结论：ILMW-ASCs取材方便,贴壁时间早,细胞增殖活跃,传代周期短,传代后能保持稳定的生物学特性,是猪来源ASCs的最佳选择之一,可为大动物疾病模型和组织器官修复的细胞治疗提供候选干细胞来源。     

DEAD-box家族蛋白在癌症中的研究进展

DEAD-box家族蛋白是一类ATP依赖的RNA解旋酶,在RNA代谢的过程中发挥重要的作用。DEAD-box家族 蛋白可通过调节癌基因和抑癌基因的表达及肿瘤相关信号通路等影响细胞的增殖、分化、凋亡,进而发挥促癌或抑 癌的作用。     

藿香正气水佐治婴幼儿腹泻42例

对婴幼儿腹泻病42例应用藿香正气水配合治疗,疗效显著,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料84例患儿均为2009年11月至2011年元月本院门诊输液或住院病人,对照组42例,男20例,女22例;年龄6个月至1岁30例,1～2岁12例;伴发热3例,伴呕吐者35例。治疗组42例,男22例,女20例;年龄6个月至1岁31例,1～2岁11例;伴发热4例;伴呕吐者36例。2组病例就诊时均在发病天之内,     

低强度脉冲超声增强人外周血淋巴细胞增殖及抗癌活性的实验研究

目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人外周血淋巴细胞(HPBL)增殖和抗肿瘤效应的影响。方法采用Ficoll梯度离心法分离HPBL;将LIUPS强度0设为对照组,10 mW/cm^2组、20 mW/cm^2组、30 mW/cm^2组、40 mW/cm^2组、50 mW/cm^2组为刺激组刺激HPBL增殖,每天一次,每次刺激10 min,连续刺激2 d。CCK-8法检测各组细胞增殖活性;酶联免疫吸附法检测抗肿瘤因子[γ干扰素(INF-γ)、白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)]表达情况;采用共培养HPBL与人肺巨细胞癌95D细胞检测其抗肿瘤活性。结果 LIPUS刺激HPBL2 d共2次后,30 mW/cm^2组的细胞增殖能力增强,与对照组和其他强度刺激组比较,细胞数量和细胞团块数量均增多。CCK-8检测结果显示,30 mW/cm^2组光密度值与对照组、20 mW/cm^2组、40 mW/cm^2组、50 mW/cm^2组比较差异均有统计学意义(P=0.032、0.027、0.027、0.001)。抗肿瘤因子检测显示,30 mW/cm^2组INF-γ、IL-2、TNF-α和GM-CSF分别为(39.66±8.30)ng/L、(619.84±125.94)ρg/ml、(461.29±14.08)ng/L、(108.11±2.07)ng/L,均高于对照组[(24.40±6.84)ng/L、(279.56±128.18)ρg/ml、(417.17±21.44)ng/L和(96.53±1.56)ng/L]和50 mW/cm^2组[(16.52±0.87)ng/L、(141.00±93.71)ρg/ml、(171.96±9.46)ng/L、(72.56±8.95)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.01)。共培养实验显示,30 mW/cm^2组人肺巨细胞癌95D细胞杀伤率为51.11%±5.21%,显著高于对照组(42.86%±0.55%)和50 mW/cm^2组(42.00%±3.67%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 LIPUS刺激可提高HPBL的增殖活性和杀伤率。     

营养指导对改善孕妇营养摄入的作用

近年来孕期合理摄人营养正日益受到孕妇及家属和妇产科工作者是重视,但是由于诸多的原因,目前孕妇的膳食营养素摄入水平仍不尽合理,这不仅会影响到孕妇的健康,还回影响胎儿的正常发育.为了解孕妇在得到适当的营养指导后,其各种营养索摄入水平的改善情况,对120例来湖北省中医院产科门诊的孕妇膳食情况进行了分组对比观察.1资料与方法     

低强度脉冲超声增强人外周血淋巴细胞的增殖及抗癌活性

目的：本研究我们为了探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对人外周血淋巴细胞(HPBL) 增殖和抗肿瘤效应的影响。方法：采用Ficoll梯度离心法分离HPBL;采用强度为0-80 mW/cm_²的LIUPS刺激HPBL增殖;CCK-8法检测细胞增殖活性;ELISA法检测抗肿瘤因子(γ干扰素(INF-γ)、白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF))在培养基上清中的表达;采用共培养HPBL与人肺巨细胞癌细胞(95D)检测其抗肿瘤活性。结果：与对照组(0 mW/cm_²)相比,LIPUS刺激组(30 mW/cm_²)每天刺激10 min,刺激2d后HPBL细胞增殖增强(P<0.01)。抗肿瘤因子刺激组INF-γ(39.66ng/L±8.30)、IL-2(619.84 pg/mL ± 125.94)、TNF-α(461.29 ng/L ± 14.08)和GM-CSF (108.11 ng/L ± 2.07),分别大于对照组(24.40ng/L±6.84)、(279.56 pg/mL ± 128.18)、(417.17 ng/ ± 21.44)和(96.53 ng/L ± 1.56);共培养实验显示,30 mW/cm_²组肺癌杀伤率为51.11%±5.21,对照组为42.86%±0.55。结论：LIPUS刺激后可提高HPBLs的增殖活性和杀伤率。本研究结果可能对LIPUS联合淋巴细胞治疗肿瘤具有较大的治疗潜力和依据。