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T-2毒素是由镰刀菌代谢产生的一种毒性很强的霉菌毒素,是单端孢霉稀族类毒素的一种。T-2毒素具有典型的免疫毒性特征,目前已证实了T-2毒素诱导的免疫毒性与氧化应激、炎症反应、凋亡及自噬等分子机制有关,涉及多条信号通路,调节与免疫应答和细胞凋亡/存活相关的信号分子表达。氧化应激是T-2毒素诱导DNA断裂和凋亡的关键毒性机制,细胞凋亡通路维持毒素免疫调控的动态平衡,而自噬可促进T-2毒素诱导的免疫抑制,在免疫调控中发挥着关键而复杂的作用。此外,T-2毒素免疫调控中也存在类似“免疫逃逸”的机制。本综述对T-2毒素的免疫毒性及其毒性作用的分子机制进行了详细阐述,为T-2毒素的毒性机制及防控研究提供参考。 相似文献
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目的:获得原核表达及纯化结核杆菌CFP-10蛋白及其抗血清。方法:从H37RV结核杆菌基因组中扩增得到CFP-10的编码基因,通过原核表达系统(BL21-pET28a+)表达及镍亲和层析和Q sepharose阴离子交换层析获得内毒素合格的CFP-10蛋白。将此蛋白免疫家兔,获得抗CFP-10的抗血清,并通过间接ELISA的方法检测其抗体滴度。结果:重组质粒pET28a-CFP-10构建成功,其编码的蛋白在BL21中获得了高效表达,且经纯化获得了内毒素合格的CFP-10蛋白,免疫家兔获得的抗血清效价能达到1∶256 000。结论:成功的表达及纯化了CFP-10蛋白,并制备了高滴度的CFP-10抗血清,为临床血清学检测以及新型结核疫苗研究奠定基础。 相似文献
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目的:探讨白细胞分化抗原14(CD14)-159C/T(rs2569190)和白细胞介素8(IL-8)-251A/T(rs4073)基因多态性与坏死性小肠结肠炎(NEC)易感性之间的关系,阐明NEC易感性的可能影响因素,为NEC的发病机制研究提供遗传学理论依据。方法:选取28例NEC新生儿(NEC组)和41例非NEC新生儿(对照组)作为研究对象,提取并应用基因聚合酶链式反应(PCR)扩增其外周血DNA,并采用Sanger基因测序方法,检测CD14-159C/T和IL-8-251A/T区域的等位基因频数和基因型频数的分布,探讨其与NEC易感性的关联性。结果:CD14-159C/T和IL-8-251A/T位点基因型频数分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);CD14-159C/T的等位基因和基因型频数分布在2组间比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-8-251A/T位点的基因型频数分布在2组间比较差异无统计学意义(P>0.05);而NEC组IL8-251A/T基因位点T等位基因频数分布高于对照组(χ2=4.184,P=0.041,OR=2.14,95% CI:1.03~4.46)。结论:CD14-159C/T的基因位点多态性和NEC的发病无关联,而IL-8基因的-251 T位点与NEC发病易感性存在关联,IL-8基因的-251 T等位基因突变可能是NEC的危险因素之一。 相似文献
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实时荧光定量PCR法检测人粪便中双歧杆菌方法的建立及评价 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立利用实时荧光定量PCR法检测人粪便中双歧杆菌浓度的方法,为检测人肠道内菌群浓度提供有效手段。方法:提取60例儿童粪便样本中细菌总DNA。选择细
菌种属的特异性基因16SrRNA作为扩增区,依据双歧杆菌的16SrRNA序列共设计3条引物,以常规PCR扩增出的16SrRNA部分基因片段制作标准品,应用SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料,对连续稀释的标准品及待测样本进行分析,建立绝对定量的标准曲线,同时计算出待测样本双歧杆菌浓度;根据可检测到的标准品最低拷贝数计算反应灵敏度;分析PCR产物熔解曲线评价反应特异性;重复检测梯度稀释的标准品,用相同浓度标准品的Ct值变异系数(CV)评价反应稳定性。结果:常规PCR扩增出双歧杆菌16SrRNA部分基因片段长度约为613 bp,测序结果正确,成功构建了双歧杆菌实时荧光定量PCR反应中的标准品;生成的标准曲线R2=0.999,最低检测限度为每个反应1.48×102个拷贝;实时荧光定量PCR产物的熔解曲线为单峰。对待测样本分批进行荧光定量PCR检测,各组间每微升1.48×103~1.48×107个拷贝浓度标准品Ct值的变异系数为2.94%、3.39%、3.54%、3.08%和3.34%。60份儿童粪便样本双歧杆菌浓度对数值为7.77±0.86(拷贝数?g-1湿便)。结论:本研究所建立的实时荧光定量PCR法敏感性高、特异性强,且重复性好,适用于检测人粪便中双歧杆菌的浓度。 相似文献
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目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养含目的基因的农杆菌,来获得农杆菌渗透液。选择待渗透的目标叶片,用针头轻轻在叶片上刺穿一个小孔,然后将制备好的农杆菌渗透液注入叶片,使其慢慢吸收渗透液。需要从渗透后的烟叶中提取和纯化SARS-CoV-2 S重组蛋白,并进行初步鉴定。对SARS-CoV-2 S重组蛋白进行纯化与鉴定,并对纯化的SARS-CoV-2 S重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:采用植物烟草成功地表达SARS-CoV-2 S重组蛋白,其分子量约为53.2 kD,Western blot结果显示His-tag抗体可以识别SARS-CoV-2 S重组蛋白。结论:基于植物的瞬时表达系统可作为SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的快速研制方法。 相似文献
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分子生物学作为医学研究生的核心基础课程,对未来医学发展起着关键作用。“科教融合”是高校实施创新型人才培养模式的重要战略计划,打造高水平教学质量的突破口。文章阐述了“科教融合”对医学研究生创新能力培养的必要性,并针对现阶段分子生物学教学模式存在的问题,提出了基于“科教融合”的理念,开展优化教学内容、传统教学与现代教学方法相融合、将科研成果引入教学、改革考核方式等四个方面的改革措施。并以2019级吉林大学医学部研究生为对象来实施,结果发现在新“科教融合”的教学模式下,研究生的分子生物学成绩及科研能力都得到了显著的提高,有效地促进科研与分子生物学教学的相辅相成,培养了学生的创新能力和专业素养,对推动吉林大学医学研究生教育建设和培养创新型和卓越型人才具有重大意义。 相似文献
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一种重组口蹄疫疫苗的原核表达、纯化及其活性检测 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:利用原核表达系统诱导表达一种可以作为口蹄疫疫苗的重组蛋白J11-G,并对这种蛋白进行纯化以及活性检测.方法:对已经构建的表达载体PET28a-J11-G进行酶切鉴定,将鉴定后的重组载体PET28a-J11-G转化入大肠杆菌BL21,在BL21细菌细胞中诱导表达月的蛋白,用改良的镍亲和层析法纯化目的蛋白,以EIJSA检测纯化所得蛋白的活性.结果:长期冻存的重组载体PET28a-J11-G结构完整,其在大肠杆菌BL21中经1 mmol/L IPTG诱导后表达出相对分子质量(Mr)约为47 000的目的蛋白,经纯化后获得了产率和纯度均很高的重组蛋白J11-G,ELISA检测证明该蛋白活性良好.结论:成功地对重组蛋白J11-G进行了诱导表达,改良法有利于蛋白产率和纯度的提高,纯化蛋白具有较好的免疫活性.重组蛋白J11-G将可能成为一种抗口蹄疫疫苗. 相似文献
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