结直肠癌液体活检研究进展

近年来,包括循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA和外泌体在内的液体活检技术有效地应用在结直肠癌早期诊断、复发和耐药监测及预后评估等临床与基础研究中.现就液体活检在结直肠癌基础与临床的研究与应用作一综述.     

卡巴胆碱对脓毒症大鼠肠道上皮细胞通透性和紧密连接的作用

目的：探讨卡巴胆碱对脓毒症大鼠肠道上皮细胞通透性和紧密连接的作用。方法取健康成年雄性 SD 大鼠,随机分为4组（每组8只）,经腹腔注射10 mg／kg 脂多糖（LPS）复制脓毒症模型：对照组：腹腔注射等体积的生理盐水;脓毒症组：腹腔注射10 mg／kg LPS;卡巴胆碱组：腹腔注射10 mg／kg LPS,15 min 后腹腔注射0．1 mg／kg 卡巴胆碱;α－BGT 组：腹腔注射10 mg／kg LPS,5 min 后皮下注射1．0μg／kg α－BGT,10 min 后腹腔注射0．1 mg／kg 卡巴胆碱。给予 LPS 3 h 后放血处死动物,取回肠组织,光镜下观察肠道上皮组织损害,荧光分光光度计测量体外漏出的 FITC －Dextran,统计肠系膜淋巴结、肝、脾中细菌移位数量,电镜下观察肠道上皮细胞紧密连接超微结构变化,共聚焦显微镜下观察肠道上皮细胞紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白移位,Western blot 法检测紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白含量。结果给予 LPS 后3 h,各组大鼠肠黏膜上皮细胞严重损伤,微绒毛坏死、脱落,炎性细胞浸润伴出血,肠黏膜组织学评分显著升高（P ＜0．05）,肠道上皮组织通透性显著升高（P ＜0．05）,肠系膜淋巴结、肝、脾中的菌落数明显增加（P ＜0．05）,肠道上皮细胞紧密连接结构破坏,为低密度电子致密影,肠道上皮细胞紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白结构缺失,细胞周围着色减少,大量移位。腹腔注射卡巴胆碱后可显著减轻脓毒症大鼠上述改变,皮下注射α－BGT 后可逆转卡巴胆碱的上述作用。结论卡巴胆碱可减轻脓毒症大鼠肠道上皮细胞损伤,降低其通透性,改善上皮细胞紧密连接蛋白移位和表达,该作用是通过激活胆碱能抗炎通路完成的。     

肝癌大鼠肝组织中Treg细胞及TGF-β1表达变化及相关性

目的探讨肝癌大鼠肝组织中调节性T细胞(Treg细胞)及转化生长因子(TGF)-β1的表达情况及其相关性。方法采用随机数字表法将60只雄性Wistar大鼠分为肝癌组(20只)、生理盐水对照组(20只)和正常对照组(20只),采用腹腔注射二乙基亚硝胺制备肝癌模型,100 mg/kg,1次/w,连续注射8 w。对比三组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占CD4~+T细胞比例和TGF-β1灰度值,分析CD4~+CD25~+Treg细胞和TGF-β1表达的相关性。结果三组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占CD4~+T细胞比例情况和TGF-β1灰度值整体比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占比显著高于正常对照组和生理盐水对照组,TGF-β1灰度值显著低于正常对照组和生理盐水对照组(均P<0.05);生理盐水对照组的TGF-β1灰度值显著低于正常对照组(P<0.05),CD4~+CD25~+Treg细胞占比与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05)。肝癌组大鼠CD4~+CD25~+Treg细胞和TGF-β1表达水平呈正相关(r=0.823,P=0.000)。结论肝癌大鼠肝组织中CD4~+CD25~+Treg细胞及TGF-β1均呈现高表达,两者呈正相关,能对免疫微环境产生抑制作用,进而为肿瘤发展提供有利条件。     

血浆硫氧还蛋白对肝癌的诊断价值研究

目的 通过检测肝癌患者血浆硫氧还蛋白(TRX)和甲胎蛋白(AFP)水平,探讨TRX对肝癌的诊断价值.方法 2012年5-9月,应用酶联免疫吸附技术(ELISA)检测90例肝癌患者(肝癌组)、40例肝硬化患者(肝硬化组)和35例健康体检者(对照组)血浆TRX和AFP水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线计算TRX诊断肝癌的敏感度和特异度,并分析TRX的表达与肝癌患者临床特征之间的关系.结果 肝癌组血浆TRX水平明显高于肝硬化组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),TRX水平和AFP水平间无直线相关性(r=-0.06,P=0.560).不同年龄、性别、肝炎病毒感染状态、肿瘤大小、肿瘤组织分化程度及TNM分期的肝癌患者血浆中TRX的水平间差异均无统计学意义(P＞0.05).ROC曲线分析显示以33.0 μg/L为临界值,TRX诊断肝癌的敏感度为74.4%,特异度为77.3%.90例肝癌患者血浆TRX阳性50例,阳性率55.6%,AFP阳性30例,阳性率33.3%;TRX联合AFP检测阳性例数65例,阳性率72.3%.结论 血浆TRX可成为诊断肝癌的新的辅助肿瘤标志物,TRX和AFP联合检测可以提高肝癌的早期诊断率.     

肝癌组织中KLF4的表达及意义

目的探讨Kruppel样因子4（KLF4）在肝细胞癌（简称肝癌）中的表达及意义。方法应用寡核苷酸基因芯片、逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学技术检测KLF4在健康人、肝硬化及肝癌组织中的表达,并分析KLF4与肝癌临床病理特征的关系。结果寡核苷酸基因芯片分析,KLF4在肝癌差异表达基因谱中明显下调（Ratio=0.438）;RT-PCR及免疫组织化学方法证实,KLF4在肝癌中低表达,其表达缺失与病理学分级显著相关。结论KLF4在肝癌组织中的低表达与肿瘤分化程度密切相关。     

盐酸千金藤碱抑制肝癌肾脏、睾丸转移及其分子机制

目的 通过裸鼠肝原位移植荧光人肝癌细胞,观察肝癌细胞肾脏、睾丸转移情况,并探讨盐酸千金藤碱抑制肝癌细胞转移及其分子机制.方法 采用慢病毒转染构建稳定表达荧光素酶基因的人肝癌细胞SMCC-7721-Luc.BALB/c裸鼠皮下接种SMCC-7721-Luc细胞,待肿瘤长至100 mm3左右,取皮下瘤植入裸鼠肝脏包膜,建立裸鼠原位肝癌模型.裸鼠腹腔注射盐酸千金藤碱,用小动物活体成像系统观察肝原位肿瘤肾脏、睾丸转移情况.给药21 d后,解剖取肿瘤组织,Western blot检测相关蛋白表达,同时取肝脏、肾脏、睾丸等组织,用10％中性甲醛固定,进行病理分析.结果 构建的SMCC-7721-Luc细胞能稳定表达Luc基因,裸鼠肝原位接种该细胞后产生较强、稳定的荧光.活体成像系统显示盐酸千金藤碱能抑制裸鼠原位肝癌向肾脏、睾丸转移,与其降低MMP-7和N-cadherin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达有关.结论 盐酸千金藤碱通过调控MMP-7、N-cadherin和E-cadherin蛋白抑制原位肝癌向肾脏、睾丸转移.     

CD24在肝癌组织中的表达

目的探讨CD24在肝细胞癌组织中的表达情况及作为肝癌早期诊断指标及分子靶向治疗的可能性。方法应用寡核苷酸基因芯片、RT-PCR和免疫组织化学技术检测CD24在人正常肝组织、肝硬化组织及肝癌组织中的表达,分析CD24与临床病理学特征的关系及其发生的分子生物学机制。结果寡核苷酸基因芯片、RT-PCR及免疫组织化学方法证明CD24在肝癌组织中mRNA及蛋白水平均呈高表达,与病理学分级无显著相关性。结论 CD24在肝癌组织中显著增高,但与肿瘤分化程度无密切相关性。     

骨髓间充质干细胞经尾静脉移植治疗肝纤维化

BACKGROUND: Liver fibrosis is the early stage of terminal liver diseases. Effective treatment for liver fibrosis can prevent the occurrence of terminal liver diseases. Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation is a promising method to treat liver fibrosis. OBJECTIVE: To study the therapeutic effect of bone marrow mesenchymal stem cells on liver fibrosis in rats. METHODS: Eighteen Sprague-Dawely rats were randomized into three groups: control, model and cell transplantation groups. Animal models of carbon tetrachloride-induced liver fibrosis were made in the latter two groups. After modeling, 1 mL bone marrow mesenchymal stem cells (5×105) or the same volume of normal saline was injected via the tail vein into the rats in the cell transplantation and model groups, respectively. Rats in the control group were given no treatment. Degree of liver fibrosis, liver function, histological changes of the liver were detected and observed in the three groups at 4 weeks after treatment. RESULTS AND CONCLUSION: In the control group, the liver tissues had normal structure with no fibrosis; in the model group, proliferation of fibrous tissues in the portal area of the liver, inflammatory cell infiltration, vacuolar degeneration and irregular arrangement of liver cells, and tissue structure damage were observed; in the transplantation group, liver tissue damage was severer than the control group but milder than the model group. Levels of serum hyaluronidase, type IV collagen and procollagen III were significantly lower in the cell transplantation group than the model group (P < 0.05). These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can alleviate liver fibrosis and improve liver function in rats with carbon tetrachloride-induced liver fibrosis.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程      

结肠黏膜肿瘤临床病理特征及内镜下切除术的疗效分析

目的 探讨结肠黏膜肿瘤临床病理特征及内镜下切除术的疗效。方法 回顾性分析行内镜下切除术的70例结肠黏膜肿瘤患者的病例资料。分析结肠黏膜肿瘤的临床病理特征与不同类型内镜下切除术的特点、并发症与临床疗效。结果 结肠黏膜肿瘤中以炎性息肉最为多见，占比57.14%(40/70),其次为管状腺瘤[18.57%(13/70)]、混合状腺瘤[11.43%(8/70)]、锯齿状腺瘤[7.14%(5/70)]、绒毛状腺瘤[4.29%(3/70)]、神经内分泌瘤[1.43%(1/70)];70例结肠黏膜肿瘤患者，发生于左半结肠的有50例，占比71.43%(50/70),发生于右半结肠的有20例，占比28.57%(20/70);炎性息肉以左半结肠最为多见，共31例(44.29%),管状腺瘤、混合状腺瘤多见于左半结肠，分别为8例(11.43%)、6例(8.57%),锯齿状腺瘤多见于右半结肠，共3例(4.29%);70例结肠黏膜肿瘤直径<10 mm的最多，占比54.29%(38/70),10～20 mm占比28.57%(20/70),>20 mm占比17.14%(12/70);70例结肠黏膜肿瘤患者...