稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

张力刺激对关节软骨细胞β-肌动蛋白mRNA表达的影响

目的 观察张力刺激对关节软骨细胞β-肌动蛋白(β-aetin)mRNA表达的影响.方法 分别获取正常和骨关节炎关节软骨细胞,给予3%、6%和15%的张力刺激,运用实时定量PCR方法检测不同张力刺激强度下关节软骨细胞β-actin mRNA表达的变化.结果 6%和15%的张力刺激均可明显提高lE常关节软骨细胞β-actinmRNA表达(1.34±0.05,1.36±0.04,P＜0.05),而只有15%的张力刺激才能明显增加骨关节炎关节软骨细胞β-actin mRNA表达.结论 关节软骨细胞β-actin mRNA表达量随张力刺激强度不同而变化,不同内外环境使关节软骨细胞对张力刺激的反应不同,故在其相关生物力学研究中不能应用β-actin作为内参.     

不同强度张应力刺激影响关节软骨细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA表达的研究

目的观察不同强度张应力刺激对人体体外培养的关节软骨细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA表达的影响。方法获取因股骨颈骨折行髋关节置换术患者的股骨头关节软骨细胞。对第一代关节软骨细胞分别施加强度为3%、6%、15%延伸率的张应力刺激,张应力刺激后提取细胞的总RNA,进一步逆转录成cDNA,实时荧光定量PCR检测Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达。结果虽然3%和6%的张应力刺激均可增加Ⅱ型胶原mRNA的表达,但没有统计学意义;15%的张应力刺激能明显抑制Ⅱ型胶原mRNA的表达,且有统计学意义。尽管张应力刺激均可增加聚集蛋白聚糖mRNA的表达,但均没有统计学意义(P0.05)。结论不同强度的张应力刺激对关节软骨细胞表达Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA的影响不同。15%延伸率的张应力刺激可明显抑制关节软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达,但不能明显改变聚集蛋白聚糖基因的表达,这可能与关节软骨细胞的功能适应性有关。     

Effects of cyclic tensile strain onβ-actin mRNA expression in articular chondrocytes

Objective To investigate the effects of cyclic tensile strain on β- actin mRNA expression in articular chondrocytes.Methods The normal and articular chondrocytes with osteoarthritis were obtained and exposed to 3% , 6% and 15% cyclic tensile strains, respectively.The real-time quantitative PCR was used to determine the altered expressions of the P-actin mRNA under different cyclic tensile strains.Results Both 6% and 15% cyclic tensile strains significantly up-regulated the β-actin mRNA expressions (1.34±0.05, 1.36±0.04, P＜0.05) in normal articular chondrocytes, whereas only 15% cyclic tensile strain was shown to be associated with up-regulated β-actin mRNA expressions in articular chondrocytes with osteoarthritis.Conclusions The β-actin mRNA expressions of articular chondrocytes may change along with different level of cyclic tensile strains.Reaction of articular chondrocytes to cyclic tensile strains may vary under different internal or external circumstances.Therefore, the β-actin appears ineligible as a housekeeping gene in studies on biomechanical of chondrocytes.     

衰老骨再生微环境中免疫细胞的特征及影响

骨骼的再生能力会随着机体的衰老而下降,显著影响老年患者骨折后再生愈合的能力,造成患者治疗后的长期卧床以及由此带来的各种并发症,从而导致老年骨折的死亡率高。随着老龄化社会的来临,对老年患者骨折的更高水平修复越来越重要。免疫细胞及其分泌的细胞因子在骨平衡及骨再生过程中发挥着不可或缺的作用,免疫衰老同样也会影响骨再生能力。研究衰老的免疫系统在骨再生过程中的作用具有重要临床价值。本文主要就衰老骨再生微环境中免疫细胞的特征和最新研究进展作一综述。     

人脐带间充质干细胞的异质性探讨及基于单细胞RNA测序结果的亚群分析

［摘要］　目的　探讨人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）的异质性,并基于单细胞RNA测序结果进行亚群分析。方法　选择两株由郑州奥博细胞医学实验室有限公司提供的hUCMSCs（分别命名为hUCMSCs-1和hUCMSCs-2）,通过实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）进行干性基因［性别决定区Y-box 2（Sox2）、Nanog］检测。对hUCMSCs进行成骨诱导,3 d后检测成骨基因碱性磷酸酶（Alp）的表达,7 d后进行碱性磷酸酶染色,14 d后进行茜素红染色。对两株hUCMSCs进行成软骨诱导,21 d后检测成软骨基因二型胶原（COL2A1）的表达。用10 ng/mL白细胞介素-1β（IL-1β）刺激大鼠软骨细胞24 h,与hUCMSCs-1和hUCMSCs-2共培养后,检测软骨细胞合成代谢基因蛋白聚糖（ACAN）和分解代谢基因基质金属蛋白酶3（MMP3）的表达。对hUCMSCs-1进行单细胞RNA测序,并根据功能进行亚群分组,通过生物信息学分析方法描绘各个亚群标志基因热图、富集的信号通路。结果　两株hUCMSCs的Sox2、Nanog、Alp、COL2A1表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。在成骨诱导7 d后,hUCMSCs-1的碱性磷酸酶染色程度深于hUCMSCs-2。在成骨诱导14 d后,茜素红染色结果显示,hUCMSCs-1钙结节数量多于hUCMSCs-2。经IL-1β干预后,软骨细胞与两株hUCMSCs共培养后的MMP3表达水平差异有统计学意义（P<0.05）,但ACAN表达水平差异不显著（P>0.05）。基于单细胞RNA测序结果,hUCMSCs-1可分为C1、C2、C3三个功能亚群。C1亚群的信号通路在细胞外基质受体相互作用上富集,与软骨细胞合成代谢相关;C2亚群信号通路在细胞衰老和凋亡上富集,与细胞的自我更新相关;C3亚群信号通路在DNA复制和减数分裂上富集,与细胞周期相关。结论　不同个体来源的hUCMSCs存在异质性,其在成骨、成软骨和抗分解代谢能力方面可能存在差异。通过单细胞RNA测序可较好地根据hUCMSCs的功能特性对其进行分群,有助于提高间充质干细胞治疗的临床疗效。