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新型编织型生物反应器内大量乳猪肝细胞的组织化培养 总被引:1,自引:2,他引:1
目的:使反应器内培养的肝细胞能在较长时间保持肝细胞的特殊功能和活力,提高生物反应器的功效并为反应器内储存和运输肝细胞提供可能。方法:将新生实验型小猪肝细胞与微载体共同培养,待肝细胞与微载体充分粘附形成微载体-球形聚集体后,将其置入新型编织型生物反应器的外腔,用培养液循环式人工毛细管培养系统进行培养,在培养液内加入氯化氨、醋胺酚检测生物反应器的转化功能,行无血清培养检测肝细胞的白蛋白的合成功能,观察肝细胞的酶漏出量。锥虫蓝染色观察肝细胞的活力,电镜观察其超微结构。结果:生物反应器内培养的肝细胞在1周内能保持较高的活力,并保持着较高的氯化氨、醋胺酚的生物转化及白蛋白合成功能,酶的漏出量也少。肝细胞超微结构示内质网、线粒体等细胞器丰富,核内染色体分布均匀,肝细胞间的微绒毛形成胆小管样结构。结论:肝细胞与微载体及肝细胞之间的聚集,形成直径大小不等的肝细胞-微载体球形聚集体,这种由肝细胞重新结合而成的聚集体类似于体内的肝组织结构,在新型编织型生物反应器内的中空纤维网架的支持下,肝细胞聚集体均匀地分散其中,为肝细胞的生长提供了一个类似体内内环境的三维空间,因而在无氧合器供氧的情况下,肝细胞也能在1周内保持较好的形态和功能。 相似文献
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目的 比较导管直接溶栓 (catheter -directedthrombolysis,CDT)和系统性溶栓 (systemicthrombolysis ,ST)治疗急性深静脉血栓形成后的静脉壁形态学变化及近期疗效。方法 2 0只成年杂种犬通过结扎双侧股静脉远近端制作急性深静脉血栓模型。 4 8h后松开结扎线 ,DSA造影证实血栓形成。将模型犬随机分成CDT组 10只和ST组 10只。CDT组经股静脉插入多个侧孔的溶栓导管 ,经导管用微泵以 8ml/h的速度滴入重组链激酶 (re combinantstreptokinase ,r sk) (15 0 0 0U/kg ,溶于 5 0mlNS中 )每 2h取血测定PT、APTT ,并造影观察溶栓进展。ST组从膝下外周静脉滴入r sk用量同前。结束后造影观察溶栓效果。术后 1d从各组随机抽取 5只获取标本 ,余下的 4周后再次造影观察静脉通畅度 ,并获取标本。HE染色观察静脉是否通畅 ,是否有附壁血栓 ;Masson三色染色观察胶原纤维沉积情况 ;免疫组化染色观察平滑肌肌动蛋白表达情况 ;扫描电镜观察内皮细胞损伤程度。结果 CDT组在 6h内均能完全溶解血栓 ,血栓溶解率为 10 0 % ,而ST组仅为 2 0 % ,二者相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;PT、APTT未见明显延长 ;CDT组 1d和 4周时均未见附壁血栓 ,而ST组可见有附壁血栓 ;术后 1d两组间胶原纤维染色面积和平滑肌肌动蛋白表达面积无明显 相似文献
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脐血内皮细胞体外人工血管内皮化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 寻找来源方便的内皮细胞 ,解决人工血管内皮化问题。方法 收集胎儿脐血 ,Ficoll离心获得单核细胞 ,置内皮细胞培养液中 ,诱导内皮细胞祖细胞转化为内皮细胞并扩增 ;作光镜、扫描电镜形态学观察 ,免疫细胞化学定性、流式细胞仪定量测定 ;采用旋转贴壁培养法 ,使内皮细胞衬里人工血管腔面。结果 1.脐血内皮细胞祖细胞在培养第 5天 ,细胞扩增 3 6± 1 7倍 ,并开始转化为内皮细胞 ,在以后的二周内保持增殖。 2 .免疫细胞化学检测显示 :内皮细胞培养早期 ,Ⅷ因子、CD34、CD31、VEGFR 2表达均为阳性 ,后期除Ⅷ因子有较高表达外 ,其他指标表达阴性。 3 .形态学观察 :在普通玻璃培养瓶中 ,内皮细胞呈铺路石形、单层贴壁生长 ;应用旋转贴壁培养法 ,内皮细胞呈片状生长 ,并贴壁于人工血管腔面 ,符合人工血管内皮化要求。结论 循环内皮细胞能在体外诱导、培养、扩增 ,并能保持一定的生物学活性 ,可作为人工血管内皮研究 ,有望应用于临床。 相似文献
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循环内皮细胞参与人工血管体内内皮化过程的动物实验 总被引:1,自引:1,他引:1
背景:已有实验表明,通过自体血管内皮细胞种植于人工血管腔面提高了血管移植的通畅率。骨髓内皮细胞衬里人工血管是否有利于人工血管体内的内皮化过程?目的:通过骨髓内皮细胞衬里人工血管间置移植的动物实验观察人工血管内皮化效果。设计:观察对比动物实验。单位:上海市第六人民医院。材料:实验于2000-09/2001-10在上海市第六人民医院完成。选用20只上海地区杂种犬,犬龄1.0~2.0岁,雌雄不拘,体质量(18.7±2.3)kg方法:分离犬骨髓单核细胞,ePTFE人工血管以2种规格(4 mm×4cm和8mm×5cm)完成内皮化。颈总动脉移植:选用10只实验犬切除颈总动脉主干4cm,将直径4mm长4cm的ePTFE人工血管间置移植于双侧颈总动脉,内皮化人工血管为实验组,未经内皮化人工血管为对照组,每组5只。术后2周及2个月采用彩色超声检查移植血管通畅率及血流速率。下腔静脉移植:选用剩余10只实验犬,6只为实验组,实验犬麻醉下将下腔静脉游离约8~10 cm,阻断两端,切除约5 cm,取直径8 mm长5 cm内皮化ePTFE人工血管,以5-0 Prolene作端端吻合,4只为对照组,以相同规格ePTFE人工血管为移植血管。术后2个月测定血管通畅率。同时与上述时间点计算各组移植血管内皮细胞覆盖率及内膜厚度。主要观察指标:①各组实验犬不同时间点移植血管通畅率及血流速率。②各组移植血管内皮细胞覆盖率及内膜厚度。结果:①颈总动脉移植术后2周和2月实验侧通畅率分别为100% (5/5)和60%(3/5).同期对照侧通畅率分别为40%(2/5)和0%(0/5)。术后2个月实验组平均血流速率明显小于对照组(P<0.05)。下腔静脉移植实验组和对照组2月移植血管通畅率为83%(5/6)和50%(2/4)。②颈总动脉及下腔静脉移植术后2周实验组血管腔面内皮细胞覆盖率大于对照组,差异有显著性意义(P<0 05),术后2个月实验组血管内膜厚度小于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:骨髓内皮细胞衬里的ePTFE人工血管在体内能较快完成内皮化过程,能抑制内膜增生;循环内皮细胞作为内皮细胞的潜在来源,具有一定临床应用价值。 相似文献
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血管平滑肌肉瘤非常少见 ,多发生于大、中静脉。发生于动脉的血管平滑肌肉瘤实属罕见。其临床表现缺乏特征性 ,这种肿瘤性病变在术前和病理证实前几乎不能得到诊断。我们曾收治 1例临床诊断为“腹主动脉瘤并腹主动脉 下腔静脉瘘”行人造血管移植术 ,术后诊断为“腹主动脉血管平滑肌肉瘤”的病例 ,现报告如下。病例介绍患者 :女性 ,72岁。否认有高血压、冠心病、糖尿病和各种传染病史。入院前 2年有可疑腹部外伤史。入院前 2月起自觉腹部有一肿块 ,末曾就诊。入院前 2周起中下腹部腹块处出现反复刺痛感 ,且进行性加重 ,遂来我院就诊。B型超… 相似文献
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为尝试在非转流条件下 ,完成双侧颈总动脉一期间置移植 ,用成年期草犬 1 0条 ,单纯硫喷妥钠静脉全麻 ,取颈正中切口 ,在无颈动脉转流下 ,分别阻断双侧颈总动脉并切除4cm片段 ,以 4mm× 4cm之膨体聚四氟乙烯 ( e PTFE)人工血管作间置移植。结果 :1 0条犬双侧颈总动脉人工血管移植后均能成活 ,术中双侧颈动脉阻断时间分别为左侧 1 4.2±4.9min、右侧 1 6.7± 5.1 min,出血量约为 1 0 0 ml。结果提示 :正确的血管缝合方法 ,一般熟练程度 ,无需预作颈动脉转流 ,可一期完成犬双侧颈总动脉间置移植。 相似文献
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患者 ,男 ,43岁 ,因腹痛 3d加剧 1h伴恶心呕吐从外院转入。往有“胃病”史 ,无明显糖尿病史。体查 :T3 7.2℃ ,BP 110 /70mmHg ,P 12 0次 /分 ,神清 ,消瘦 ,体位呈蜷曲状 ,心肺 (-) ,腹部平坦 ,上腹部压痛 ,肌卫 (± ) ,无反跳痛 ,墨菲氏征阴性 ,肝肾区叩痛阴性 ,肠鸣音较弱。血WBC 3 4.4×10 9/L ,N 84.3 % ,尿常规因暂无尿未做 ,血淀粉酶、胆红素和GPT正常。腹部平片仅见小肠少许积气 ,未见膈下游离气体和肠梗阻。肝、胆、胰B超示胆囊结石 ,胆囊大小正常和壁无增厚 ,胆总管、肝和胰腺未见异常。心电图正常。考虑腹痛原… 相似文献