支气管哮喘患儿血清Rac1水平变化及临床意义

目的 通过检测支气管哮喘患儿血清Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)水平变化,探讨其与患儿病情严重程度及预后的关系。方法 选择2019年1月—2022年1月新疆医科大学第一附属医院收治的支气管哮喘患儿150例为观察组,根据病情严重程度分为轻度组(49例)、中度组(59例)、重度组(42例),以健康儿童80例为对照组,采用RT-PCR法检测受检者血清单个核细胞Rac1 mRNA水平,采用Pearson分析Rac1 mRNA与患儿气道炎症反应及肺功能的相关性,采用logistic回归分析研究支气管哮喘患儿预后的危险因素。结果 轻度组(0.14±0.03)、中度组(0.07±0.02)、重度组(0.06±0.03)的Rac1 mRNA均低于对照组(0.16±0.03),t=3.675、19.990、17.493,均P<0.05;Rac1 mRNA与哮喘患儿白介素-25(IL-25)、白介素-33(IL-33)、呼出气一氧化氮(FeNO)、免疫球蛋白E(IgE)呈明显负相关关系(r=-0.620、-0.691、-0.660、-0.634,均P<0.01),与第1秒用力呼气流量(...     

CD38基因敲除对小鼠脾脏B细胞炎性因子产生的影响

目的 分析CD38基因敲除小鼠脾脏中B细胞的数量及B细胞中炎性因子和去乙酰化酶1(SIRT1)的表达水平,探讨CD38基因敲除对B细胞中炎性因子的影响及其潜在机制.方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测小鼠尾巴CD38和新霉素(Neo)基因的DNA表达水平;磁珠阴选法分选出野生型(WT) C57BL/6和CD38-/-小鼠脾脏中的B细胞,经流式细胞仪鉴定B细胞分选纯度;实时定量PCR检测CD38和炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)基因的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测CD38及SIRT1的蛋白表达水平.结果 鉴定CD38-/-小鼠,并成功分选出WT和CD38-/-小鼠脾脏中的B细胞(纯度＞95％).与WT小鼠相比,CD38-/-小鼠脾脏发育障碍,脾细胞总数及其中的B细胞数量均减少(P＜0.01),伴炎性因子TNF-α和IL-1β mRNA表达水平下降(P＜0.0l),SIRT1蛋白表达水平上升(P＜0.05).结论 CD38基因敲除可引起脾脏B细胞数量减少;并可能通过激活SIRT1通路,抑制脾脏B细胞中炎性因子TNF-α和IL-1β的表达.     

重水标记法测定大鼠血浆清蛋白合成动力的研究

目的:以重水(~2H_2O)为示踪剂测定大鼠血浆清蛋白合成动力学的相关参数。方法:将20只SD大鼠以腹腔注射、日常饮水的形式标记2H2O,分别在首次标记后的第1、3、5、6、10周末,各取4只大鼠心脏穿刺取血浆。三氯乙酸/乙醇法提纯血浆清蛋白并用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,将提纯的清蛋白酸水解,分离纯化清蛋白中的丙氨酸及血浆游离丙氨酸,并衍生,用气相色谱-质谱仪(GC-MS)检测血浆清蛋白中2H-丙氨酰基的丰度和血浆游离丙氨酸中2H的丰度。计算清蛋白的分数合成率、合成动力学方程。结果:血浆清蛋白的分数合成率为15.3%/w,合成动力学方程为f_t=1.256×(1-e~(-0.153t))。结论:重水标记法能有效测定血浆清蛋白的合成动力学参数,适用于机体代谢相关的生理、病理机制研究。