ETS基因重排在前列腺癌中的特征分析

目的 确定前列腺癌人群中ETS家族常见成员基因ERG、ETV1、ETV4和ETV5重排的发生频度;分析ERG基因重排与常见临床及分子病理学指标的关联;验证ERG过表达是否促进前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT).方法 荧光原位杂交技术(FISH)检测128例前列腺癌患者肿瘤组织中ERG、ETV1、ETV4和ETV5基因的重排和PTEN基因的缺失;免疫组织化学PV-9000二步法检测前列腺癌组织中雄激素受体(AR)及转录因子SOX4的表达;采用siRNA、Real-time PCR和Western blot检测ERG与前列腺癌细胞EMT的关联.结果 ERG在前列腺癌人群中重排发生率为23％ (25/108),其中60％(15/25)的ERG重排患者伴有ERG 5’端的缺失.ETV1、ETV4和ETV5的重排发生率分别为2％ (2/109)、1％(1/103)和0％.ERG基因重排与肿瘤远处转移呈正相关(P＜0.05),但与Gleason评分、术前PSA水平及肿瘤临床分期等无关联.ERG基因重排与PTEN基因的缺失、SOX4蛋白的表达均呈正相关(P＜0.05),但与AR的表达未见相关性;体外实验显示,干扰ERG的表达可抑制前列腺癌Vcap细胞EMT的发生.结论 ERG基因重排在我国前列腺癌患者中的发生频率较西方国家低.ERG基因重排与EMT相关,并可能与其他基因协同发挥促癌作用.     

二烯丙三硫对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及与uPA系统关系的初探

目的:研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法:细胞增殖活性(MTS)比色法测定20、40、60μmol·L-1DATS处理前列腺癌PC-3细胞24、48、72h后PC-3细胞的增殖能力;细胞体外侵袭试验检测20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞侵袭能力的作用;划痕试验观察40μmol·L-1DATS处理PC-3细胞24h后PC-3细胞迁移能力;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法分别检测40μmol·L-1DATS作用PC-3细胞后的uPA、uPAR和PAI-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果:20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞的生长均有较明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;DATS呈浓度依赖抑制细胞的浸润能力,其中40μmol·L-1与体内试验更接近;40μmol·L-1DATS明显抑制细胞的迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达无显著影响。结论:DATS抑制PC-3细胞的增殖、浸润和迁移,该效应可能与DATS显著上调PAI-1的表达有关系。     

去势抵抗性前列腺癌的发生发展机制及药物治疗新进展

去势抵抗性前列腺癌(CRPC)患者预后极差。CRPC的发生和进展机制极为复杂,迄今尚未被完全阐明,因此治疗策略的选择仍是临床上极具挑战性的问题。近年来,治疗CRPC的新药不断涌现,包括雄激素合成抑制药物(阿比特龙)、雄激素受体(AR)抑制药物(恩杂鲁胺)、免疫治疗剂(sipuleucel-T)、放射剂(镭-223)和化疗药物(卡巴他赛)等。因而,针对CRPC的治疗有了更多选择,系统治疗亦发生了很大变化。简要综述近年来人们对CRPC发生发展机制的最新理解和最有前途的药物在CRPC治疗中获得的新进展。     

二烯丙三硫对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的抑制及对uPA系统的调节

目的 研究二烯丙三硫（DATS）对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物（uPA）系统的调节作用。方法 实时定量PCR法(real time PCR)检测乳腺癌细胞株uPA系统中uPA、uPA受体（uPAR）和uPA抑制物（PAI-1）的表达;使用不同浓度DATS处理乳腺癌细胞,MTS比色法测定细胞的增殖能力;Matrigel体外浸润实验检测DATS（20~60μmol/L） 对细胞浸润能力的影响;Transwell小室迁移实验和划痕试验评价60μmol/L DATS对细胞迁移能力的影响;RT-PCR和Western blot分别测定60μmol/L DATS作用后,乳腺癌细胞中uPA、uPAR和PAI-1 mRNA和蛋白表达的变化;ELISA法检测细胞培养液中PAI-1蛋白含量的变化。结果 20~80μmol/L DATS对高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。60μmol/L DATS明显抑制MDA-MB-231细胞的浸润和迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达水平无显著影响。结论 DATS抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达。