抗菌肽17BIPHE2通过阻滞肺腺癌A549细胞周期促进其凋亡

目的探讨抗菌肽17BIPHE2抑制人肺腺癌A549细胞增殖机制。方法 MTT比色法检测0~40μmol·L-1的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞和正常肺上皮BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞仪检测17BIPHE2对A549细胞细胞周期、线粒体膜电位、细胞内钙离子的影响;TUNEL染色和流式细胞仪检测17BIPHE2诱导的A549细胞凋亡。结果抗菌肽17BIPHE2可选择性抑制肺腺癌A549细胞增殖(P0.05),对正常肺上皮BEAS-2B细胞无明显抑制作用;A549细胞经不同浓度抗菌肽17BIPHE2处理24 h后,细胞周期阻滞于S期(P0.05);同时抗菌肽17BIPHE2能够明显降低A549细胞中线粒体膜电位(P0.05),随着17BIPHE2浓度不断增加,A549细胞内钙离子浓度也明显升高(P0.05);结论抗菌肽17BIPHE2可能通过阻滞A549细胞细胞周期,降低线粒体膜电位、升高细胞内钙离子浓度从而诱导A549细胞凋亡。     

抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用北大核心CSCD

目的探讨抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用及其作用机制。方法 MTT法检测0~40μmol/L的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞增殖的影响;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Real-time PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2的表达变化;透射电子显微镜观察细胞超微结构变化。结果 17BIPHE2可抑制A549细胞的增殖,其IC50值为34.33μmol/L,同时20、25、30、35、40μmol/L的17BIPHE2对A549细胞的生长抑制率分别为(1.8±2.7)%、(6.1±2.1)%、(24.6±4.6)%、(55.2±1.1)%、(76.3±1.2)%。与对照组相比,25、35μmol/L的17BIPHE2处理24h的A549细胞凋亡率显著增高(P<0.05),细胞核呈现固缩,染色质深染,线粒体嵴断裂,内质网肿胀等凋亡细胞的特征。Bax的表达上调(P<0.05),Bcl-2的表达受到抑制(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高。结论17BIPHE2可能是通过上调Bax表达,下调Bcl-2表达诱导A549细胞凋亡,抑制其增殖。     

抗菌肽merecidin作用于人肺腺癌A549细胞株的磷酸化蛋白质组学分析

目的：观察抗菌肽merecidin作用于人肺腺癌A549细胞后其细胞内所有蛋白质的磷酸化水平变化,探究抗菌肽对 A549细胞生物学功能的影响以及促进细胞凋亡可能涉及到的信号通路与作用靶点。方法： 9 μmol/L抗菌肽merecidin作用于肺 腺癌A549细胞6 h后收集并提取总蛋白,通过胰酶酶解肽段,并对肽段进行TMT标记和HPLC分级,IMAC-Fe富集磷酸化肽段, 利用高分辨质谱对富集肽段进行检测。利用MaxQuant软件对质谱分析得到的磷酸化肽段进行搜库鉴定和定量,结合生物信息 技术分析差异磷酸化蛋白质的功能、通路等信息。结果：通过对对照组和抗菌肽merecidin处理组磷酸化蛋白进行IPA分析, 以 上调或下调倍数≥2倍且P<0.05的条件鉴定出抗菌肽merecidin处理组中差异磷酸化蛋白质共有753个,其中明显上调有229个、 下调有417个;其中与细胞凋亡相关的差异蛋白质有RB1、MAPK1、ARAF、PTK2、FOXO、MARCKS等。生物进程分析结果显示 差异磷酸化蛋白主要集中在细胞信号转导、核酸的降解转运以及细胞能量代谢、蛋白质的翻译合成、细胞骨架的形成等,富集结 果显示差异磷酸化蛋白质主要参与凋亡相关信号通路有MAPK、ErbB、 PI3K-Akt和Ras等,通过蛋白互作分析找出凋亡相关蛋白 质PTK2,PRKCA、MA2PK2、MAPK1、LMNA等之间有关联。结论：抗菌肽merecidin可能通过影响RB1、MAPK1、ARAF、PTK2、 FOXO、MARCKS等基因和信号通路诱导肺癌A549细胞的凋亡及其他细胞功能的改变。     

抗菌肽merecidin诱导人肺腺癌细胞系A549凋亡

目的探讨抗菌肽merecidin对人肺癌细胞系A549的作用及其机制。方法实验分为对照组(Ctrl)、顺铂干预组(cisplatin 40μmol/L)、merecidin干预组(merecidin 25/35μmol/L)、caspase抑制剂组(z-VAD-fmk)、caspase抑制剂+merecidin干预组(z-VAD-fmk+merecidin 25/35μmol/L)。MTT法检测细胞增殖,annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测caspase-3、8、9、激活型caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果抗菌肽merecidin明显抑制A549细胞增殖(P0.05),merecidin处理24 h后的IC_(50)值为34.8μmol/L。与Ctrl组相比,merecidin干预组的凋亡率显著升高(P0.05);与merecidin干预组相比,caspase抑制剂+merecidin干预组的凋亡率并没有下降。caspase-3、8、9蛋白表达无显著变化且未检测到激活型caspase-3蛋白表达。Bcl-2蛋白表达下调(P0.05)及Bax蛋白表达增多(P0.05)。结论抗菌肽merecidin可以抑制人肺腺癌细胞A549的增殖并诱导其凋亡。