组织芯片原位杂交技术的应用体会

组织芯片技术将数十个甚至上千个不同个体的组织标本按预先设计的顺序排列在一张玻片上，与组织化学、免疫组化和原位杂交等技术相结合，可以在基因、基因转录和相关表达产物生物学功能三个水平上进行相关研究，是一种高通量、多样本，并具有平行分析功能的工具，成为近年来发展迅速的一种崭新的病理学技术。我们将组织芯片与原位杂交技术相结合，用于检测小鼠哮喘模型肺组织中的肾上腺＆受体的变化，取得了较理想的效果，现介绍如下。     

经HE染色的细胞涂片上再行免疫组化染色法简介

<正>胸腹水细胞涂片通常行HE染色诊断,有时需再进行免疫组织化学染色以满足鉴别诊断之用。但由于再次取材受限,往往使工作陷于被动或无法进行。笔者在工作中成功摸索出一种在一张涂片上同时进行多种抗体的免疫组织化学染色,并保留一部分HE染色的方法,现以1例会诊的HE涂     

乳腺癌组织微阵列Laminin-R与Paxllin和CD105的表达及其意义

目的:探讨Laminin-R、Paxllin、CD105在乳腺癌组织中的表达及其意义.方法:构建乳腺癌组织微阵列,应用免疫组织化学SP法,检测160例乳腺浸润性导管癌患者Laminin-R、Paxllin和CD105以及ER、PR的表达.结果:Laminin-R在乳腺癌组织中的表达率为55.6%(89/160),Laminin-R表达值的高低与肿瘤的组织学分级、ER表达、PR表达无关,但与淋巴结转移有关(P<0.05);Paxillin在乳腺癌中的表达率为31.88%(51/160),Paxillin表达值的高低与肿瘤的淋巴结转移、ER表达、PR表达无关,但与组织学分级有关(P<0.05);CD105微血管密度(MVD)表达值的高低与肿瘤的组织学分级、淋巴结转移、ER表达、PR表达均无关.结论:组织微阵列的建立使乳腺癌相关基因及其蛋白产物的筛选工作简便、快捷;Paxllin、Laminin与乳腺癌的生物学行为相关,且对乳腺癌的预后也有一定的提示作用.     

介绍一种塑料包埋指甲的制片方法

有些指甲病变用传统石蜡包埋制作切片,很难做出明确的病理诊断。我们通过不断的摸索,发现使用塑料包埋能将硬而韧的指甲制作出较理想的切片,现介绍如下。1材料与方法1·1材料取自临床疑有病变的指甲。塑料包埋试剂盒购自天津血液病研究所。1·2方法①预处理:将指甲放入苦味酸饱和液中软化固定2~8 h,再放入70%乙醇中,经30~50 min洗去苦味酸;为了加快其脱黄过程可以在70%乙醇中加少量饱和石炭酸水溶液或浓氨水[1]。②标本处理:室温下,70%乙醇1 h,80%乙醇1 h 20 min,95%乙醇1 h,100%乙醇1 h,丙酮40 min,放入塑料包埋剂甲液(HEMA,聚乙二醇400)…     

肿瘤细胞药敏实验技术简介

由于肿瘤细胞具有生物学异质性。不同类型肿瘤的化疗效果有较大的差异。随着分子生物技术的发展，现已证明肿瘤细胞对化疗药物的敏感性差异在于其存在天然抗药性及获得性抗药的缘由。因此。在使用化疗药物之前，应对肿瘤细胞进行药物敏感性检测．筛选出针对性较强的个体化治疗敏感药物，以减少用药的盲目 性．从而提高治疗效果，并改瞢患者的生存质量。现将我们采用临床化疗常规用药来对肿瘤细胞进行药物敏感性检测情况介绍如下。     

E-选择素及其配体SLeX介导大肠癌早期黏附的观察

目的:探讨E-选择素及其配体SLeX在大肠癌LoVo细胞与血管内皮细胞ECV304早期黏附中的作用.方法:采用SP法观察E-选择素在内皮细胞ECV304及LoVo中的表达;采用活性染料玫瑰红摄入法检测E-选择素及其配体SLeX在大肠癌LoVo细胞与TNF-α激活内皮细胞ECV304早期黏附中作用.结果:E-选择素和SLeX分别在ECV304和LoVo细胞膜及细胞质内有明确的阳性表达;血管内皮细胞ECV304被TNF-α激活后,其与LoVo细胞间的黏附较激活前明显增加,且具有浓度及时间的依赖性,P＜0.001;用不同浓度的抗E-选择素单抗处理血管内皮细胞ECV304,或用其配体SLeX单抗处理肿瘤LoVo细胞后,随着E-选择素单抗、SLeX单抗浓度增加,细胞相对黏附率逐渐降低(P＜0.001),阻断率逐渐增加(P均＜0.05),提示E-选择素单抗、SLeX单抗可阻断大肠癌细胞与血管内皮细胞间黏附.结论:E-选择素和其配体SLeX是介导血管内皮细胞与大肠癌LoVo细胞系黏附反应的主要早期黏附分子.     

怎样制作良好的淋巴结切片

在医学科技飞速发展的今天,病理工作逐渐得到重视,要求也越来越高。然而从目前情况来看,淋巴结切片的优片率却很不理想,直接影响到病理诊断的准确性:本人对淋巴结组织切片进行多次实验,现总结如下:1材料采用本科正常淋巴结标本,取材厚2~4厘米,厚薄要均匀。2方法根据不同的时间,     

急诊护理中护患纠纷的原因及防范对策

医患关系是当前极为敏感的社会问题[1]。随着患者自我保护意识和医疗需求的不断提高,医患纠纷呈逐渐上升的趋势。医院急诊工作中发生的医患纠纷许多牵涉到护理问题。急诊作为医疗抢救的前沿,患者病情危急,护患之间无暇进行详细沟通,易产生     

一种适用于染色机的沉淀酸化伊红染液

在常规H-E染色中,伊红染液往往用水溶性伊红Y,浓度为0.5～1%,但组织切片经水洗或低浓度酒精脱水后易脱色,特别是在染色机染色时,脱色更显著.现介绍一种适用于染色机染色的沉淀酸化伊红染液.     

非特殊型浸润性乳腺癌HER-2检测方法的对比研究

目的 应用实时定量PCR技术(quantitive real-time PCR,qPCR)检测石蜡包埋非特殊型浸润性乳腺癌标本的HER-2表达状况,与免疫组织化学技术(immunohistochemistry,IHC)和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)相应检测结果进行比较,以验证qPCR技术检测HER-2方法的可靠性和实用性. 方法 采用FISH和qPCR技术对IHC检测结果分别为HER-2(0、1+、2+、3+)的乳腺癌标本各100例进行检测,用kappa检验分析三者的一致性. 结果 100例HER-2 (0)和HER-2(1+)的标本HSH和qPCR的检测结果均无扩增,符合率100％;IHC检测HER-2(2+)的标本,FISH和qPCR检测结果之间k=0.731 (P＜0.001),二者一致性强;IHC检测HER-2(3+)的标本,HSH与qPCR检测结果k=0.634 (P＜0.001),二者具有较好的一致性,与IHC检测结果也具有较强的一致性.三者对乳腺癌患者的临床病理指标反应具有较好的一致性. 结论 qPCR方法简便、实用、有效,检测乳腺癌HER-2基因状况可与HSH法互为补充.