橡皮圈组织夹内牵引辅助在内镜黏膜下 剥离术治疗结直肠病变中的应用（含视频）

目的评价橡皮圈组织夹内牵引辅助内镜黏膜下剥离术（rubber band and clip facilitated endoscopic submucosal dissection, RAC ESD）治疗结直肠病变的安全性和有效性。方法采用回顾性队列研究方法,分析2018年9月—2019年8月间在北京大学第一医院内镜中心接受内镜黏膜下剥离术（endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗,符合纳入和排除标准的115例结直肠病变患者,依照ESD手术方式分为RAC ESD组（n=34）及传统ESD组（n=81）,比较两组间手术时间、单位时间切除面积、整块切除率、完全切除率、治愈性切除率、并发症发生率及肿瘤复发率等指标。结果RAC ESD组中位标本面积632(753) cm2,中位手术时间400(550) min,中位单位时间切除面积014(020) cm2/min。传统ESD组中位标本面积471(502) cm2,中位手术时间500(500) min,中位单位时间切除面积009(007) cm2/min。RAC ESD组标本面积略大于传统ESD组,手术时间略短于传统ESD组,但差异均无统计学意义（P均＞005）。RAC ESD组单位时间切除面积明显大于传统ESD组（P=0008）。RAC ESD组整块切除率、完全切除率及治愈性切除率分别为1000%（34/34）、1000%（34/34）及971%（33/34）,传统ESD组分别为1000%（81/81）、963%（78/81）和914%（74/81）。两组均无操作相关并发症发生。经过（100±55）个月随访,两组均无局部复发。结论RAC ESD治疗结直肠病变可提高手术效率,安全有效。     

内镜黏膜下剥离术治疗SiewertⅡ型胃食管交界早期癌及癌前病变的临床分析

目的 探讨内镜黏膜下剥离术（endoscopic submucosal resection,ESD）治疗胃食管交界早期癌及癌前病变的安全性和有效性。方法 回顾性分析2012年7月—2019年6月间在北京大学第一医院内镜中心接受ESD治疗的67例SiewertⅡ型胃食管交界早期癌及癌前病变患者资料,对病变的临床病理特征、整块切除率、完全切除率、治愈性切除率、并发症发生率进行统计分析,并对可能影响治愈性切除的因素进行分析。结果 67例病变中隆起型病变5例,浅表型病变59例,凹陷型病变3例。病变中位直径1.6(1.8)cm,中位手术时间60.0(56.0)min。整块切除率97.0%（65/67）,完全切除率91.0%（61/67）,治愈性切除率82.1%（55/67）。肿瘤最大径（OR=8.457,95%CI：1.227~58.302,P=0.030）及病理类型（OR=15.133,95%CI：1.518~150.870,P=0.021）与非治愈性切除相关。3例（4.5%）患者发生ESD相关并发症,1例术后迟发出血,内镜下止血后好转;2例术后瘢痕狭窄,内镜引导下探条扩张后好转。58例随访患者中1例垂直切缘阳性且未接受后续治疗的患者出现复发;1例患者随访中发现异时性早期胃癌,再次ESD切除。结论 ESD治疗胃食管交界早期癌及癌前病变安全有效,操作前应对病变大小、边界、浸润深度进行准确评判,制定适宜的治疗方式及手术策略。     

胃间质瘤63例临床分析

目的总结胃间质瘤（胃GIST）的临床病理及免疫组织化学（免疫组化）特征,探讨胃GISTs诊断与治疗的方法及影响其预后的因素。方法总结1997年1月至2007年5月北京大学第一医院普通外科收治的63例经手术治疗的胃GISTs患者的临床资料,并进行Flecther侵袭危险性分级和预后分析。结果B超、CT及内镜超声（EUS）对本组患者的术前诊断准确率分别为72．2％、81．0％和94．3％。F=6．065,P〈0．05;差异有统计学意义。CD117阳性率88．9％,CD34阳性率95．1％。开腹或腹腔镜行胃部分切除38例,近端胃大部切除4例,远端胃大部切除8例;全胃切除13例,其中联合胆囊切除3例,联合胰体尾及脾切除7例;联合左肝外侧叶切除1例,行D：淋巴结清扫12例（均无淋巴结转移）。全组病例1、3、5年生存率分别为96．4％、84．7％和71．7％。单因素分析显示,侵袭危险性分级和肿瘤大小是影响患者生存的因素（P〈0．05）;而性别、年龄、核分裂像、免疫组化表达情况、是否联合脏器切除以及是否行淋巴结清扫与预后元关（P〉0．05）。多因素分析显示,侵袭危险性分级是胃GIST的独立预后因素（P=0．041）。结论术前EUS诊断准确率最高。建议用Fletcher侵袭危险性分级方法来判断胃GISTs的生物学行为及其预后。     

胃间质瘤不同侵袭危险性的超声内镜图像特点

目的通过分析不同侵袭危险性的胃间质瘤的EUS图像特点,探讨EUS在胃间质瘤诊治中的价值。方法回顾性分析1997年7月至2007年7月北京大学第一医院普通外科收治的36例胃间质瘤患者临床资料,36例均经手术治疗,并且术前均行EUS。对所有病例进行Flecther侵袭危险性分级,记录内镜及EUS图像特点,包括肿瘤大小、有无溃疡、边界、内部回声是否均匀、内部回声特点及生长方式。对各侵袭危险性间质瘤的内镜及EUS图像特点进行归纳,差异比较采用方差分析及秩和检验。结果胃间质瘤的最大径平均7．3cm（1．0～20．0cm）,侵袭危险性较高组肿瘤大于侵袭危险性较低组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;侵袭危险性越高的胃间质瘤其溃疡、边界不清、外形不规则、内部回声不均匀现象越常见,组间差异有统计学意义（P〈0．05）。各组间肿瘤内部回声是否有囊性变或伴有点片状高回声以及肿瘤的生长方式,差异无统计学意义。结论根据EUS的图像特点,可以帮助术前判断胃间质瘤的侵袭危险性分级,对进一步诊治有重要意义。     

组织因子/活化凝血Ⅶ因子复合物对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7的调控作用

目的:观察活化凝血Ⅶ因子(actived factor Ⅶ,FⅦa)对大肠癌LoVo细胞系表达基质金属蛋白酶-7(ProMMP-7)的影响,探讨其可能的组织因子信号转导通路.方法 :(1)用Western blot检测100 nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞系不同时间点及不同浓度FⅦa刺激LoVo细胞系12 h后细胞ProMMP-7蛋白水平;用Western blot检测5 mg/L组织因子(tissue factor,TF)抗体预孵育LoVo细胞系0.5 h后再给予100 nmol/L FⅦa刺激12 h后细胞ProMMP-7蛋白水平.(2)观察用100 nmol/L FⅦa刺激时丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)各亚通路信号蛋白(包括细胞外信号调节激酶ERK1/2,丝裂原激活蛋白激酶P38及c-Jun-N末端蛋白激酶JNK)磷酸化水平变化.(3)在FⅦa刺激前0.5 h分别加入ERK1/2,P38和JNK信号通路特异阻断剂PD98059,SB203580和SP600125,培养12 h后检测细胞ProMMP-7蛋白的变化.结果 :(1)FⅦa可刺激LoVo系细胞表达ProMMP-7并呈时间依赖性和剂量依赖性,在刺激的12 h左右ProMMP-7达峰值,是正常对照组的5.5±0.6倍(P=0.006);用TF抗体预处理的LoVo细胞系,其FⅦa上调ProMMP-7表达的作用被完全阻断.(2)用100 nmol/L FⅦa刺激LoVo细胞5 min时,MAPKs磷酸化活性蛋白p-ERK1/2和p-P38表达水平开始增加,至10 min时达峰值(分别为对照组的2.2±0.3倍和3.9±0.5倍,P值分别为0.02和0.01),存在时间效应关系,而p-JNK活性无改变(为对照组的1.1±0.1倍).(3)ERK1/2通路阻断剂PD98059及P38通路阻断剂SB203580可部分减少FⅦa上调LoVo细胞系表达ProMMP-7的效应,分别降低了32%±5%(P=0.01)和61%±10%(P=0.009),JNK通路特异性阻断剂SP600125对ProMMP-7的表达无明显影响.结论: FⅦa通过与LoVo细胞表面的TF结合诱导ProMMP-7的表达,并呈时间依赖性和剂量依赖性;ERK1/2和P38 MAPKs亚通路参与LoVo细胞TF信号转导通路并与TF/FⅦa调控ProMMP-7表达有关.     

恩重如山 情深刻骨：深切缅怀我的师爷张齐联教授

张齐联 教授时间如白驹过隙,正当全国抗击疫情的战役取得辉煌胜利并进入新的工作常态之时,不知不觉又到了9月。1年前的9月30日,就在建国70周年大庆的前夕,张齐联教授因病与世长辞。蓦然回首,性格耿直,极具专业精神,不向命运屈服,为了中国的消化内镜事业奋斗了大半辈子的张齐联教授已经离开我们快一年了。年卫东教授是领我内镜入门的授业恩师,而他的恩师张齐联教授就是我的师爷。张教授对我恩重如山,翻看着那些已发黄的照片,睹物思人,在师爷驾鹤西去周年祭之际,摘录我心中珍藏的一些记忆,以表达晚辈的崇敬追思之情和怀念感恩之意。     

113例早期结直肠癌及癌前病变内镜粘膜下剥离术标本处理及病理学评估

目的 探讨早期结直肠癌及癌前病变内镜黏膜下剥离术（ESD）标本的规范化病理评估及其重要意义。 方法 选自2012年8月至2016年6月间本院内镜中心行结直肠ESD治疗的连续性113例早期结直肠癌和癌前病变,参照日本结直肠癌处理指南,进行标本规范化处理和病理学评估,包括组织学类型、肿瘤最大径、肿瘤浸润深度、出芽分级、脉管侵犯情况、水平及垂直切缘情况,并综合评估病例的治愈性或非治愈性切除等。 结果 病理诊断结直肠腺瘤63例（55.75％）,其中管状腺瘤29例（25.66％）,绒毛状腺瘤2例（1.77％）,绒毛管状腺瘤32例（28.32％）。锯齿状病变34例（30.09％）,包括传统型锯齿状腺瘤19例（16.81％）,无柄锯齿状腺瘤11例（9.73％）,增生性息肉4例（3.54％）。浸润性腺癌16例（14.16％）,包括高分化腺癌7例,中分化腺癌7例,低分化腺癌1例,黏液腺癌1例。病理评估发现,16例早期浸润性结直肠癌,2例有脉管癌栓,均为发生于乙状结肠的中分化腺癌。108例垂直切缘阴性（95.58％）,1例垂直切缘阳性（中分化浸润性腺癌,pT1b2）,1例垂直切缘可疑阳性,3例无法准确评估。80例（70.80％）水平切缘阴性,20例（17.70％）水平切缘阳性（19例腺瘤,1例中分化腺癌）,13例无法准确评估。术后评估显示,113例ESD标本中病变完整切除率为82.30％,大肠浸润性腺癌的病变完整切除率为93.75％。16例大肠浸润性腺癌,术后治愈性切除5例（治愈性切除率31.25％）,非治愈性切除11例。其中7例非治愈性切除追加手术,余随访未见复发。 结论 标本规范处理、全面准确的病理学评估是结直肠ESD技术发展关键因素,对内镜治疗取得长期成功非常重要。     

组织因子对大肠癌侵袭能力的影响及其与基质金属蛋白酶-9的关系

目的 探讨组织因子(TF)表达对大肠癌细胞体内侵袭能力的影响及其部分机制。方法 利用转染正义／反义TF cDNA的人类大肠癌HT-29细胞和未转染的HT-29细胞分别接种在裸鼠皮下生成皮下种植瘤来观察大肠癌细胞在体内的侵袭能力的变化,对获得的裸鼠种植瘤标本通过Western blot进行TF、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的检测及相关性分析。结果与HT-29细胞组比较,转染了正义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤增大,并且侵袭的范围也明显增大,而转染了反义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤则缩小(F=11.019 P<0.05),同时,转染了正义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤TF表达水平升高,而转染了反义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤TF表达水平降低(P<0.05);转染了正义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤MMP-9表达水平升高,而转染了反义TF cDNA的HT-29细胞组的肿瘤MMP-9表达水平降低(P<0.05).且TF和MMP-9表达差异之间具有显著相关性(r=0.878 P<0.05)。结论TF可以促进大肠癌细胞的体内生长和侵袭能力,其部分机制可能是TF可以上调MMP-9的表达。     

反义组织因子cDNA转染对LoVo细胞基质金属蛋白酶-7及其抑制物-1表达的影响

目的探讨反义组织因子cDNA转染对LoVo细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7及其抑制物(TIMP)-1表达的影响。方法利用构建有反义TFcDNA的质粒pcDNA3．1/Zeo转染LoVo细胞系,应用Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测转染组和对照组细胞系中ProMMP-7/TIMP-1蛋白和mRNA表达水平。结果10%胎牛血清刺激组中,转染反义TFcDNA的LoVo细胞系中MMP-7 mRNA的表达水平明显低于空载体组和未转染细胞组(分别为0．07±0．02、0．25±0．05、0．24±0．06,P＜0．05),其ProMMP-7蛋白表达也低于对照组(分别为0．10±0．02、0．21±0．04、0．20±0．03,P＜0．05)；TIMP-1在三组细胞中的表达未见明显改变；MMP-7表达与各组细胞中的TF表达相关(r=0．938,P＜0．01)。结论MMP-7/TIMP-1表达的失平衡在组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭转移的过程中发挥作用。     

组织因子对大肠癌细胞肝转移能力的作用

目的探讨组织因子（TF）表达对大肠癌细胞血行转移能力的影响。方法利用构建有正义／反义组织因子cDNA（TFcDNA）的真核表达载体pcDNA3．1／Zeo，以脂质体法转染LoVo细胞。经验证转染成功的LoVo细胞采用Western blot检测组织因子的蛋白表达水平，再将24只裸鼠（BALB／C nu／nu）随机分成3组，分别将转染了正义／反义TFcDNA的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞通过脾接种至裸鼠体内。6周后观察裸鼠发生肝表面转移灶的数目，以肝表面转移灶的数目反映LoVo细胞的转移能力。结果与LoVo细胞相比，转染了正义TFcDNA的LoVo细胞的TF表达水平升高，而转染了反义TFcDNA的LoVo细胞的TF表达水平则降低（F=33．9，P〈0．01），转染了正义TFcDNA的LoVo细胞组比LoVo组的肝转移灶的数目多，而转染了反义TFcDNA的LoVo细胞组则比LoVo组的肝转移灶的数目少（F=52．1，P〈0．01）。结论组织因子可以增加人类大肠癌细胞的体内血行转移能力。